赵菲
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
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- 慢病毒介导RNAi沉默大鼠脊髓神经元NF-κB p65基因的观察被引量：1
- 2014年
- 目的 构建NFκBp65基因RNA干扰（RNAi）慢病毒载体并转染体外培养的大鼠脊髓神经元,观察其沉默效率。方法 针对大鼠NFκBp65基因特异性序列,设计3条NFκBp65siRNA序列及1条阴性对照序列,合成包含各正反义靶序列的互补DNA链,退火形成双链DNA,插入到经BamHI和EcoRI酶切后的pFUGW慢病毒载体中,PCR筛选阳性克隆,DNA测序鉴定。与慢病毒包装质粒pHelper1.0、pHelper2.0通过lipofectamine2000共转染至包装细胞293T,经滴度测定后转染体外培养的大鼠脊髓神经元。实验分为5组：阴性对照组、LVNC组、LVshNFκBp651组、LVshNFκBp652组和LVshNFκBp653组,观察转染效率,Westernblotting法检测慢病毒表达载体对神经元NFκBp65基因的沉默效应。结果 测序结果证实合成的寡核苷酸链插入正确,重组载体构建成功,测定病毒滴度为108～9TU/mL,慢病毒重组体能够成功转染大鼠脊髓神经元,转染效率大于90%,与阴性对照组或LVNC组比较,LVshNFκBp651组和LVshNFκBp652组NFκBp65蛋白的表达明显下调（P均〈0.01）,而LVshNFκBp653组无明显下调（P〉0.05）。结论 成功构建了大鼠神经元NFκBp65基因的RNAi慢病毒载体,它可使大鼠脊髓神经元NFκBp65基因表达下调。
- 罗剑刚孙涛林小雯李芸赵菲苗贵申傅志俭
- 关键词：慢病毒神经元
- 神经病理性疼痛大鼠脊髓IL-33蛋白表达的变化被引量：4
- 2015年
- 目的：观察外周神经慢性压榨性损伤（chronic constrictive injury,CCI）大鼠脊髓白介素-33（interleukin-33,IL-33）表达的变化规律。方法：雄性Wistar大鼠60只,分为手术组和假手术组,每组30只,于CCI前1天、CCI后第1、4、7、14、21天各时间点测定机械痛阈及热痛阈后立即处死大鼠,每个时间点5只,取L4~6脊髓,采用Western blot方法测定IL-33的蛋白表达变化。结果：手术组大鼠术侧机械痛阈及热痛阈明显降低,脊髓IL-33水平表达增加,明显高于对侧和假手术组术侧;IL-33蛋白水平于CCI后第1天开始增加,第7天达到高峰（P〈0.01）,于CCI后第21天仍维持于较高水平（P〈0.05）。结论：CCI致大鼠脊髓IL-33活化,参与神经病理性疼痛的调控过程。
- 罗剑刚左玲许维澄林小雯李芸赵菲苗贵申孙涛傅志俭
- 关键词：神经病理性疼痛白介素-33
- 医用臭氧在治疗腰椎间盘突出症中相关阼用的研究进展被引量：1
- 2013年
- 医用臭氧是治疗腰椎间盘突出症常用的微创方法，已取得了良好的临床疗效，注射部位包括盘内、椎旁以及椎间孔内外等。目前的研究表明，臭氧对正常的椎间盘组织和细胞可产生氧化作用。在治疗腰椎间盘突出症中的作用主要包括对髓核的直接氧化作用、调节氧化应激、调节免疫反应、激活镇痛系统和增加氧供使炎症介质减少等。其中，有些作用机制的具体作用途径尚未完全阐明，而大量的临床证据以及明确臭氧的作用途径为其临床应用的推广起到了至关量要的作用。
- 赵菲傅志俭
- 关键词：臭氧腰椎间盘突出症
- 臭氧对腰椎间盘突出症患者髓核NO和IL-6水平的影响：离体实验被引量：7
- 2015年
- 目的 评价臭氧（O3）对腰椎间盘突出症患者髓核NO和IL-6水平的影响.方法 经椎间孔镜取出16例腰椎间盘突出症患者的髓核,每个髓核均分为3份,采用随机数字表法,将其分为3组（n=16）：对照组（C组）不施加任何干预;O320μg/ml组（O320组）和O340μg/ml组（O340组）分别注入20 μg/ml O3和40 μg/ml O3各2 ml.20 min后体外培养72 h,收集培养液,采用硝酸酶还原法检测NO浓度,采用ELISA法检测IL-6浓度;采用实时荧光定量PCR法检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS） mRNA和IL-6 mRNA的表达水平.结果 与C组比较,O320组和O340组髓核培养液NO和IL-6的浓度降低,髓核组织iNOS mRNA和IL-6 mRNA的表达下调（P＜0.05）;O320组和O340组间上述指标比较差异无统计学意义（P＞ 0.05）.结论 O3治疗腰椎间盘突出症患者腰腿痛的机制与其减少椎间盘NO合成和降低局部炎性反应有关.
- 赵菲赵学军林小雯王珺楠罗剑刚苗贵申姜鹏傅志俭
- 关键词：臭氧椎间盘移位
