- 伊马替尼联合依维莫司对小鼠垂体瘤细胞AtT-20的作用研究
- 2016年
- 目的垂体瘤药物治疗目前主要针对泌乳素腺瘤和生长激素腺瘤,对于其他类型垂体瘤疗效差,因此新的治疗药物亟待发现。文中探讨伊马替尼联合依维莫司对小鼠垂体瘤细胞AtT-20的作用效果及分子作用机制。方法单独使用伊马替尼、依维莫司以及联合作用于AtT-20细胞。采用细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞的增殖抑制,实时荧光定量PCR检测细胞丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)的mRNA表达水平,Western blot检测AKT和ERK蛋白的磷酸化情况。结果伊马替尼与依维莫司均呈浓度和时间依赖性抑制At T-20细胞增殖,但两者联合作用效果为相互拮抗[联合指数CI分别为(1.13±0.06)、(1.12±0.03)和(1.07±0.03)];单独和联合用药对AKT、ERK的mRNA及蛋白表达水平无明显抑制作用(P>0.05);伊马替尼和依维莫司均可上调AKT、ERK的磷酸化水平,联合用药对p-AKT、p-ERK水平的促进作用明显强于单药(P<0.05)。结论伊马替尼和依维莫司对AtT-20细胞均有抑制作用,但联合用药表现出了拮抗效应。推测其机制为伊马替尼与依维莫司通过阻断信号通路抑制细胞增殖时均负反馈活化AKT、ERK,从而在联合用药时相互拮抗。
- 李浩王凯民李志强沈赞
- 关键词：伊马替尼依维莫司拮抗作用
- 腰大池-腹腔分流术治疗交通性脑积水临床体会被引量：2
- 2018年
- 目的探讨腰大池-腹腔分流术(LPS)治疗交通性脑积水的临床效果。方法选择2015年2月至2016年2月上海市奉贤区中心医院15例交通性脑积水患者,其中男性11例,女性4例;年龄16~85岁,平均年龄50岁。其中脑外伤手术后脑积水10例,高血压脑出血引起脑积水4例,幼儿脑积水1例。15例患者均采用索菲萨套装引流管(8档可调阀门SW8A型)行LPS治疗,比较术前、术后患者临床效果。结果术前9例小便失禁及11例行走不稳术后随访期间症状消失;分流术前11例智能障碍的患者随访期间有不同程度好转;8例记忆减退患者有所改善;8例昏迷患者中术后清醒5例,其中神志清醒4例,神志模糊2例,2例仍昏迷,但生命体征平稳;在7例清醒患者中,其主诉头痛头晕、恶心呕吐等症状有不同程度改善;2例持续癫痫患者,经抗癫痫治疗后,意识转清,癫痫未再发作。术后均未发生远端堵管现象,1例腹腔段连接处引流管少许渗液,1例出现感染;均得到及时处理。15例患者随访1~5个月,颅脑CT结果示,12例脑室缩小(其中7例恢复正常),3例不明显。术后KPS评分,>50分者2例,50分者2例;40分者7例,30分者3例,20分者1例;较术前有提高。结论 15例患者采用可调压分流管行LPS治疗交通性脑积水,可有效改善临床症状,获得良好效果,值得临床推广。
- 王凯民沈冬青李志强
- 关键词：交通性脑积水腰大池腹腔分流术
- Sirtuin在低氧诱导人脐带间充质干细胞增殖中的作用被引量：3
- 2017年
- 目的探讨低氧对人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)中Sirtuin(SIRT)蛋白表达影响及与细胞增殖的关系。方法组织块贴壁法分离和培养h UC-MSCs;流式细胞仪鉴定细胞表面标志物;CCK-8法测定低氧与常氧下不同时间点h UC-MSCs的增殖能力;流式细胞仪检测低氧与常氧下细胞周期的变化;免疫荧光与Western blotting测定低氧与常氧下细胞SIRT蛋白定位与表达。结果成功分离h UC-MSCs;细胞CD90、CD105、CD29、CD44高表达,CD14、CD19、CD34、CD45、HLA-DR无表达;CCK-8测定低氧培养24、48、72 h细胞的增殖能力均高于常氧培养(P均<0.05);在低氧下培养24、48 h后S期细胞比率高于常氧培养(P均<0.05);免疫荧光检测SIRT1、6位于细胞核内,SIRT2定位于胞浆,SIRT3、4、5定位于线粒体。Western blotting测定SIRT1在低氧培养24、48 h蛋白表达量均高于常氧条件(P均<0.05),常氧培养72 h的SIRT1表达量高于24 h及48 h(P均<0.05);SIRT2表达量在低氧培养24 h高于常氧培养(P<0.05),48 h后低于常氧培养,72 h后高于常氧培养(P<0.05);低氧培养24、48、72 h后SIRT5的表达量均高于常氧处理(P均<0.05),常氧与低氧培养细胞48 h和72 h后均高于24 h时SIRT5的表达(P均<0.05)。结论低氧处理24、48、72 h均可以促进h UC-MSCs的增殖。低氧诱导SIRT1、2与5表达改变提示SIRT1、2、5可能参与了低氧对h UC-MSCs增殖的调控。
- 王凯民谭娟娟严志强李志强
- 关键词：人脐带间充质干细胞低氧增殖SIRTUIN
- SIRT在低氧诱导人脐带间充质干细胞增殖中的作用
- 目的： 间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是起源于生物体早期中胚层的一类多能干细胞，它们具有自我复制和向多种细胞系（向成脂、成软骨、成骨等）分化的潜能，是组织工程和再生医学中重要来源...
- 王凯民
- 关键词：人脐带间充质干细胞细胞增殖低氧环境
