孙明军
- 作品数:41 被引量:43H指数:4
- 供职机构:中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金:国家奶牛产业技术体系项目国家科技基础性工作专项宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生机械工程更多>>
- 表达猪流行性腹泻病毒保护性抗原重组乳酸杆菌的构建及鉴定被引量:1
- 2018年
- 为开发一种安全有效的新型猪流行性腹泻口服疫苗,将猪流行性腹泻病毒核心保护性抗原基因(COE)插入到穿梭表达载体,并电转化至乳酸杆菌基因工程菌株内,进行诱导培养,通过Western blot能够检测到大小约27 KD的蛋白表达。该重组乳酸杆菌的构建为动物体内免疫试验的开展和新型黏膜免疫疫苗的研发奠定了基础。
- 孙玉章许运斌王宏华孙明军蒋贻海
- 关键词:猪流行性腹泻病毒黏膜免疫口服疫苗
- 一种区分布鲁氏菌A19疫苗株与野毒株的分子标记
- 本发明提供了一种可区分布鲁氏菌A19疫苗株与国内流行野毒株的分子标记,以及检测该标记的的荧光定量PCR引物、探针及检测方法。所提供的分子标记,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1。本发明还提供一种用于区分布鲁氏菌A19疫...
- 孙明军刘蒙达樊晓旭孙翔翔邵卫星田莉莉孙淑芳范伟兴
- 文献传递
- 一株犬种布鲁氏菌的分离鉴定及其在巨噬细胞内存活能力的研究
- 2023年
- 为分离鉴定流产犬的致病病原及其生物学特性,本研究从重庆某宠物医院无菌采集流产犬全血2份,将其涂布于布鲁氏菌选择培养基,分别在不含CO_(2)和含7.5%CO_(2)条件下37℃培养72 h,观察菌落形态,并经结晶紫染色,观察细菌类型。按照国家标准鉴定分离菌的生化特性。细菌分离结果显示,在不含CO_(2)和含7.5%CO_(2)的培养箱中2份流产犬全血样品在布鲁氏菌选择培养基上均长出边缘整齐、光滑的圆形菌落,透射光下,菌落呈浅黄色且有光泽;结晶紫染色结果显示分离菌为典型的粗糙型细菌;生化鉴定结果显示,分离株在TSA中的生长不依赖于CO_(2),且不产生H2S,氧化酶和脲酶试验均为强阳性。上述结果表明分离到一株犬种布鲁氏菌,命名为B. canis CQ3。对分离菌进行全基因组测序,利用MAUVE对分离株与GenBank中38株不同种的布鲁氏菌基因组进行比对,并构建分离菌全基因组的进化树。将不同种布鲁氏菌及分离株分别接种于TSB培养基中,通过测定不同时间的OD450nm值绘制各菌株的生长曲线。将各菌株及B. canis CQ3株分别以MOI 100感染小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7,在感染后的不同时间(1 h、24 h、48 h和72 h)收集细胞,经相应处理后涂布TSA平板培养72 h后,经菌落计数分析分离菌株在细胞中的存活能力。全基因组序列比对及进化树结果显示,比对到犬种布鲁氏菌的序列数量最多,且B. canis CQ3株与欧洲分离的犬种布鲁氏菌NR-finland株的亲缘关系最近。生长曲线测定结果显示,在6 h~16 h (对数生长期) B. canis CQ3株的生长速度稍快于羊种布鲁氏菌B. melitensis XJ流行株和牛种布鲁氏菌B. abortus DT流行株;整个生长过程中B. canis CQ3株的生长速度与疫苗株A19和S2基本一致。巨噬细胞感染试验结果显示,感染1 h时,B. canis CQ3株进入巨噬细胞数量多于疫苗株A19和S2、B. melitensis XJ和B. abortus DT株。相比B. melitensis XJ和B. abortu
- 焉鑫陈霞孙世雄田雪邵卫星孙翔翔南文龙南文龙樊晓旭孙淑芳
- 关键词:犬种布鲁氏菌
- 一种牛结核病γ-干扰素ELISA检测用鸡尾酒刺激抗原
- 本发明提供一种鸡尾酒抗原,用作牛结核病γ干扰素ELISA试验第一步的刺激抗原。该鸡尾酒刺激抗原可以替代现有的牛型、禽型PPD刺激抗原,简化检测的步骤,而且还可以用于区分待检测的牛是否经过疫苗免疫或发生了自然感染。本发明所...
- 张喜悦孙明军孙翔翔李阳周晓翠陈爽魏荣
- 风扇在改善雾化过氧化氢消毒中的应用被引量:1
- 2022年
- 目的观察风扇的应用对雾化过氧化氢消毒的影响。方法通过载体定性杀菌试验方法,对风扇在雾化过氧化氢消毒中应用效果进行观察。结果在密闭房间内中心地面放置电风扇,在风扇启动状态下实施过氧化氢喷雾消毒。浓度为75 g/L过氧化氢喷雾量为8 mL/m^(3),作用时间约15 h,所有采样点菌片上枯草杆菌黑色变种芽孢全部无菌生长。在不使用风扇的对照组房间内,过氧化氢喷雾量达到20 mL/m^(3),方可达到上述消毒效果。不用风扇在喷雾量8 mL/m^(3)时,试验台面测得过氧化氢浓度为187.0 mg/m^(3),台面下测得过氧化氢浓度为18.8 mg/m^(3);加入风扇后台面下过氧化氢浓度增加至146.0 mg/m^(3)。结论密闭房间内使用风扇可以促进雾化过氧化氢均匀分布,提高杀菌效果。
- 孙世雄樊晓旭孙明军张皓博田莉莉张培培孙淑芳
- 关键词:风扇消毒效果
- 牛结核病的传播与控制被引量:9
- 2017年
- 牛结核病是由牛分枝杆菌引起的一种慢性细菌性人兽共患病。牛分枝杆菌可在相同或不同的物种之间、动物到人之间自然传播,但在人与动物之间或人与人之间的自然传播则较为罕见。牛结核病从牛到牛传播的主要途径是通过呼吸道传播,封闭条件下同圈传播的效率远高于开放条件下的传播效率。人感染牛结核病的风险主要存在于饲养员、兽医等职业人群中。对于普通大众来说,主要风险是食用未经巴氏消毒的生乳及乳制品。本文分析了该病的几种主要防控手段,包括牛奶巴氏消毒、检疫和扑杀阳性牛、发挥公共卫生部门的作用等,以期为我国牛结核病的防控提供参考。
- 张喜悦孙明军范伟兴
- 关键词:牛结核病牛分枝杆菌人兽共患病
- 一种区分布鲁氏菌A19疫苗株与野毒株的分子标记
- 本发明提供了一种可区分布鲁氏菌A19疫苗株与国内流行野毒株的分子标记,以及检测该标记的的荧光定量PCR引物、探针及检测方法。所提供的分子标记,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1。本发明还提供一种用于区分布鲁氏菌A19疫...
- 孙明军刘蒙达樊晓旭孙翔翔邵卫星田莉莉孙淑芳范伟兴
- 一种对动物布鲁氏菌病的通用快速检测方法
- 本发明公开了一种通用快速检测动物布鲁氏菌病的引物、探针及检测方法,其中引物和探针适用于RAA荧光法检测,可实现在33℃条件下20分钟内完成动物布鲁氏菌核酸的检测;与猪链球菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌、大肠杆菌、...
- 樊晓旭孙明军刘婷婷田莉莉张皓博孙翔翔刘蒙达孙世雄亓菲焉鑫张志迟庆安冯淑芳仵国政付树芳魏润宇张培培王毓秀邵卫星孙淑芳范伟兴
- 文献传递
- CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术及应用研究进展被引量:2
- 2016年
- 成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白系统(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR/CRISPR-associated nuclease system,CRISPR/Cas)是广泛存在于细菌和古细菌的适应性免疫系统,其中由Ⅱ型CRISPR/Cas系统改造而来的第三代基因组编辑技术——CRISPR/Cas9系统已广泛应用于生命科学研究的多个领域。本文主要从CRISPR/Cas9系统的发现、作用原理、应用进展及与其他新兴的基因组编辑技术的对比等四个方面进行阐述,重点介绍其最新研究进展,并展望了CRISPR/Cas9系统的应用前景。
- 孙玉章孙明军代永联尹仁福丁壮
- 几种布鲁氏菌病检测方法比对结果分析被引量:6
- 2022年
- 为比较几种常用布鲁氏菌病(简称布病)检测方法特性,在某疫苗免疫的奶牛场随机选取40头奶牛,采集血清和奶样各40份,然后对采集的血清进行虎红平板凝集、试管凝集、胶体金、酶联免疫吸附试验(iELISA和cELISA)和琼脂扩散方法检测,对采集的奶样进行病原学检测(qPCR)和抗体检测(胶体金)。结果显示:4种国标方法(虎红平板凝集、试管凝集、iELISA和cELISA)检出的阳性样品数量有较大差距,分别为16、6、23和33份,其中经试管凝集试验检出的阳性血清,经其他3种国标方法也检测为阳性;通过胶体金法检出阳性血清数(9份)略高于试管凝集试验,且血清及牛奶样品经胶体金检测结果基本一致;琼扩法检出12份阳性血清,且显示抽检奶牛中存在野毒感染;qPCR和胶体金试纸条对采集奶样的检测结果有较大差距,经qPCR检测仅1份样品呈阳性。结果表明:国标方法中,试管凝集试验特异性最高,iELISA和cELISA敏感性较高;病原学检测临床样品检出率较低,琼脂扩散试验敏感性有限,胶体金法敏感性适中,操作简便,适合布病免疫奶牛场自检。本研究为牛场布病不同检测目的方法选择提供了参考。
- 樊丽张建东刘德娟徐吉荣刘雪梅孙明军孙翔翔樊晓旭田莉莉邵卫星孙淑芳刘蒙达
- 关键词:布鲁氏菌病疫苗免疫血清学检测病原学检测