刘世宇
- 作品数:3 被引量:16H指数:3
- 供职机构:河南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:河南省创新型科技人才队伍建设工程项目国家自然科学基金国家中医药管理局度中医药行业科研专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 怀山药微型块茎形成过程中的生理生化变化被引量:10
- 2017年
- 怀山药脱毒试管苗经诱导可形成脱毒微型块茎,其作为繁殖体比试管苗具有优势。以继代培养的脱毒试管苗带芽茎段为外植体,接种于含60 g·L-1蔗糖的MS液体培养基中,采用黑暗震荡的培养方式进行微型块茎诱导,分别在外植体时期、出芽期、芽伸长期、微型块茎形成期、膨大期和成熟期取材进行相关生理生化指标的测定。结果表明,微型块茎形成过程中可溶性总糖、葡萄糖和果糖含量变化趋势基本一致,均在微型块茎形成期达最大值;蔗糖和淀粉逐渐积累,含量逐步升高;蔗糖合成酶(SS)合成方向活性与蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性分别在微型块茎成熟期和膨大期达最大值,共同促进微型块茎内蔗糖的积累;腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)和淀粉合成酶(SSS)分别在酶活性最高时与淀粉合成积累量呈极显著相关;IAA、ABA和ZR含量均与微型块茎形成正相关,JA与微型块茎形成无明显相关。
- 李明军刘世宇刘雯李俊华张晓丽赵喜亭
- 关键词:怀山药生理生化变化
- 铁棍山药微型块茎遗传转化体系的建立被引量:3
- 2019年
- 怀山药(Dioscorea opposita)遗传转化是对其进行基因功能分析和遗传改良的基础,但目前国内外尚未见相关报道。以怀山药优良品种铁棍山药(D. opposita cv.‘Tiegun’)的微型块茎为受体材料,对影响遗传转化的因素进行优化,建立了由根癌农杆菌介导的山药遗传转化体系。过表达质粒载体p CAMBIA1301-DoSERK2含GUS标记基因和潮霉素(Hyg)抗性筛选基因,沉默质粒载体pART27-DoSERK2含卡那霉素(Kan)抗性筛选基因。根癌农杆菌抑制剂特美汀(Tim)的最佳浓度为500mg·L^(–1);再生芽和生根时, Hyg的最佳浓度分别为15和20 mg·L^(–1), Kan的最佳浓度分别为120和160 mg·L^(–1)。对转化植株进行PCR和GUS组织化学检测,结果显示外源基因已整合到铁棍山药转基因株系的基因组中并在细胞中表达。该研究建立了一套取材便利的铁棍山药遗传转化方法,对其它品种山药的转化也具有参考价值。
- 李俊华刘世宇刘世宇韩林林韩林林张晓丽张晓丽李明军
- 关键词:根癌农杆菌
- 农杆菌介导的怀山药叶片瞬时表达方法的建立被引量:6
- 2016年
- 高效的瞬时表达体系是方便、快捷的研究怀山药基因启动子活性、基因功能和生产重组蛋白的新途径.本研究选取怀山药叶片为受体,以β-葡糖醛酸酶(GUS)和绿色荧光蛋白(GFP)的基因为报告基因,对共培养时间进行分析,得到二者瞬时表达的最初时间以及较佳观察时间,建立根癌农杆菌介导的怀山药瞬时表达技术体系.结果显示:当注射的菌液浓度OD600=0.6,共培养3d时,GUS基因和GFP基因开始有表达,二者适于观察的共培养时间分别为5d和4d.
- 韩林林李俊华赵喜亭张晓丽宋志辉刘世宇李明军
- 关键词:怀山药叶片GUSGFP