目的观察成骨分化后的去分化骨髓间质干细胞(differentiation osteogenic bone marrow mesenchymal stem cells,De-BMSCs)移植对前十字韧带(anterior cruciate ligament,ACL)重建术后腱骨界面骨形成的促进作用,并探索De-BMSCs成骨分化效应增强的分子机制。方法从家兔胫骨和股骨中提取BMSCs,经成骨诱导分化后用普通培养基进行去分化培养制备De-BMSCs,鉴定De-BMSCs的干细胞特性。建立家兔ACL重建模型,分为3组:腱骨界面注射海藻酸钠凝胶(对照组);腱骨界面注射复合BMSCs海藻酸钠凝胶(BMSCs组);腱骨界面注射复合De-BMSCs海藻酸钠凝胶(De-BMSCs组)。术后4周和12周取膝关节标本,进行组织学、影像学、生物力学检测,评估腱骨界面骨形成情况。De-BMSCs体外成骨诱导分化,给予活化T细胞核转录因子1(nuclear factor of activated T cells 1,NFATc1)RNA干扰处理,检测成骨分化标志基因及Nanog/NFATc1/Osterix信号通路的表达,明确De-BMSCs成骨分化效应增强的分子机制。结果De-BMSCs可向成骨、成脂、成软骨分化,具有干细胞特性(均P<0.05)。术后4周De-BMSCs组BV/TV值为0.36±0.01,较对照组0.24±0.03和BMSCs组0.30±0.02明显增加(P<0.05),最大负荷(40.34±1.19)N和刚度(20.67±2.14)N/mm较对照组[(14.88±2.74)N,(8.67±2.19)N/mm]和BMSCs组[(26.31±1.76)N,(13.81±2.14)N/mm]明显升高(均P<0.05);术后12周De-BMSCs组BV/TV值0.47±0.02较对照组0.30±0.02和BMSCs组0.35±0.03明显增加(均P<0.05),最大负荷(64.46±6.69)N和刚度(25.18±3.11)N/mm较对照组[(41.01±6.12)N,(11.59±2.54)N/mm]和BMSCs组[(48.21±4.12)N,(15.89±2.94)N/mm]明显升高(均P<0.05);De-BMSCs成骨分化过程中,Nanog的表达增加(P<0.05),NFATc1的表达上升且其与Osterix的相互作用增强(P<0.05),成骨分化标志基因COL1A、OCN、OPN的表达增加(均P<0.05)。结论De-BMSCs移植可促进ACL重建后的腱骨界面骨形成,其作用机制可能是Nanog/NFATc1/Osterix信号通路介导了De-BMSCs成骨分化效应增强。
目的:探讨当归、阿魏酸钠关节腔注射对大鼠骨性关节炎(OA)软骨退变与自由基的影响。方法:4%木瓜蛋白酶关节腔注射建立大鼠OA模型,1周后48只大鼠分成6组:正常组,模型组,25%、5%当归治疗组,0.5%、0.1%阿魏酸钠治疗组,分组后即开始用不同浓度的当归、阿魏酸钠关节腔注射治疗,每3 d 1次,每次双膝各注射0.1 ml,对照组注射生理盐水。6周后处死动物,抽取血液、关节液检测SOD、MDA,切取关节,大体及组织学观察。结果:两药在高浓度可明显修复关节软骨的退变(均P<0.01),降低关节液、血浆的MDA水平(均P<0.01),增加SOD活性(均P<0.05);两药在低浓度时SOD升高不明显(均P>0.05),但阿魏酸钠仍可明显修复关节软骨的退变(均P<0.01),降低MDA的水平(P<0.01,P<0.05)。结论:当归、阿魏酸钠关节腔注射治疗大鼠OA可促进退变软骨的修复,阿魏酸是当归注射液治疗OA的有效的单体成份之一。
