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陈采霞
作品数:
3
被引量:5
H指数:1
供职机构:
中南大学湘雅医院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
艾宇航
中南大学湘雅医院
张丽娜
中南大学湘雅医院
吴龙
中南大学湘雅医院
刘志勇
中南大学湘雅医院
黄立
中南大学湘雅医院
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吴龙
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陈采霞
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2018
2篇
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脑红蛋白对氧糖剥夺/复氧复糖诱导的人神经母细胞瘤细胞系自噬的影响
2017年
目的探讨脑红蛋白(Ngb)对氧糖剥夺/复氧复糖(OGD/R)诱导的人神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y)自噬的影响。方法通过在SH-SY5Y细胞中转染Ngb质粒,建立Ngb过表达(NGB OE)及相应的空载(Vector)稳转株。细胞行OGD/R处理。聚合酶链反应(PCR)检测自噬相关基因(Atg5、Atg7、BECN1)及FUN14结构域包含蛋白-1(FUNDC1) mRNA表达水平,免疫印迹方法检测自噬相关基因(LC3 Ⅱ/Ⅰ)蛋白表达水平。差速离心法分离线粒体及细胞质,分别使用免疫印迹方法检测帕金森病相关蛋白(Parkin、Pink1)表达水平。结果OGD/R处理后,自噬相关基因Atg5、Atg7、BECN1、FUNDC1 mRNA水平升高(最高分别为4.90±0.71、6.72 ±0.75、2.71±0.39及3.96±0.78倍,均P〈0.05),细胞质中Parkin减少而线粒体中Parkin显著增加。过表达Ngb不能改变自噬相关基因Atg5、Atg7、BECN1 mRNA水平,细胞质或线粒体中Parkin无显著变化。但可以增加FUNDC1 mRNA含量(3.96±0.78倍比6.86±0.63倍,P〈0.05)。结论Ngb不能影响OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞自噬或线粒体自噬水平,而对FUNDC1基因的表达有促进作用,其作用机制需要进一步深入研究。
邓松筠
艾宇航
龚华
吴龙
陈采霞
王译民
刘志勇
黄立
彭倩宜
张丽娜
关键词:
脓毒症
线粒体
氧糖剥夺
脑红蛋白在氧糖剥夺-复氧复糖诱导人神经母细胞瘤细胞线粒体膜电位去极化及活性氧生成中的作用
被引量:5
2017年
目的探讨脑红蛋白(NGB)在氧糖剥夺-复氧复糖诱导的人神经母细胞瘤细胞线粒体膜电位去极化及活性氧生成中的作用。方法在人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞中,使用慢病毒干扰NGB表达,建立NGB表达敲减及相应的空载病毒稳转株。细胞行氧糖剥夺-复氧复糖处理。荧光实时定量PCR检测人神经母细胞瘤细胞NGBmRNA表达水平,免疫印迹检测人神经母细胞瘤细胞NGB蛋白表达水平。线粒体膜电位特异性染料JC-1染色,观察线粒体膜电位变化。DCFH-DA染色,检测细胞内总活性氧水平。检测人神经母细胞瘤细胞释放乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果氧糖剥夺-复氧复糖后,NGB mRNA及蛋白水平升高,分别于4h和8h达高峰(2.04±0.35,1.69±0.18)。NGB转染干扰NGB慢病毒较转染空载病毒线粒体膜电位去极化水平降低[荧光比值(JC-1红色/绿色比值)1.10±0.10比1.46±0.11,P〈0.05],总活性氧产生增多[(36.30±5.32)荧光强度/细胞比(16.26±2.97)荧光强度/细胞,P〈0.05],且LDH释放增多[(63.42±6.14)%比(49.65±5.09)%,P〈0.05]。结论NGB对维持线粒体稳态起重要作用。干扰NGB表达可导致细胞在缺血缺氧状况下线粒体损伤加重,活性氧释放增多,细胞损伤加重。
邓松筠
艾宇航
张丽娜
吴龙
陈采霞
王译民
刘志勇
黄立
彭倩宜
关键词:
脑红蛋白
活性氧
乳酸脱氢酶类
人神经母细胞瘤细胞
氧糖剥夺
Morris水迷宫联合神经功能评分法构建脓毒症脑病大鼠模型的研究
2018年
目的 在脑电生物监测方法构建脓毒症脑病动物模型的基础上,进一步探讨和改良脓毒症脑病大鼠模型。方法 80只SD大鼠放置脑电监测电极后采用经典盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture ,CLP)方法诱发脓毒症,术后分别根据脑电图(electroencephalogram,EEG)监测法(简称EEG法)和Morris水迷宫(Morris water maze, MWM)实验联合神经功能评分法(简称MWM法)将大鼠分为脓毒症脑病(sepsis associated encephalopathy, SAE)组和非脓毒症脑病(non-sepsis associated encephalopathy,NSAE)组,比较两种诊断方法的差异。结果 两种诊断方法具有较高一致性,且与后期标本病理改变相符。结论 SAE大鼠EEG方法模型稳定性欠佳,而MWM法鉴别脓毒症脑病与EEG法具有较好的一致性,可以用于脓毒症脑病动物模型筛查。
陈采霞
张丽娜
吴龙
邓松筠
王运佳
艾宇航
关键词:
神经功能评分
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