丁立新
- 作品数：8 被引量：14H指数：3
- 供职机构：中国疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金烟台市科学技术发展计划项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学自动化与计算机技术更多>>
- 人IER5基因在昆虫杆状病毒表达系统中的表达与鉴定
- 2020年
- 目的:利用昆虫杆状病毒表达系统表达早期快速反应基因5(IER5)蛋白,为后续蛋白质结晶及探索蛋白质三级结构提供线索。方法:以HeLa细胞cDNA为模板扩增出IER5基因片段,构建重组转移质粒pFastBac1-IER5;重组转移质粒经双酶切及测序鉴定后转化至感受态细胞DH10Bac,以获得重组的穿梭质粒rBacmid-IER5;将重组穿梭质粒感染Sf9细胞,待细胞出现明显病变时收集重组杆状病毒;用间接免疫荧光、SDS-PAGE及Western blot以及对表达产物进行分析鉴定。结果:重组转移质粒pFastBac1-IER5经双酶切后得到与预期相同的2条条带;重组穿梭质粒rBacmid-IER5经PCR鉴定在3300 bp左右出现一条特异性条带;间接免疫荧光结果提示IER5蛋白在Sf9细胞中得到表达;SDS-PAGE结果显示,表达产物的相对分子质量约为48 k,Western blot结果表明表达产物能与IER5抗体特异性结合。结论:利用昆虫-杆状病毒表达系统成功表达了人IER5蛋白,获得了体外表达重组IER5蛋白的相对分子质量、溶解性等物理化学特性。
- 熊强姜晓燕丁立新刘晓丹周平坤丁库克
- 关键词：SF9细胞杆状病毒表达系统
- X射线测定蛋白质结构的技术进展与研究现状被引量：7
- 2019年
- X射线晶体衍射技术是一种非常重要的测定蛋白质晶体结构的方法。近几十年,虽然各种新的实验方法和通过计算机预测蛋白质结构域的方法层出不穷,但是测定蛋白质结构主要还是通过X射线晶体衍射技术。随着同步辐射装置和X射线自由电子激光的发展,X射线在测定蛋白质结构中的作用越来越重要。本文就X射线测定蛋白质晶体空间结构的技术进展进行综述,介绍了其原理和发展,简述了同步辐射和X射线自由电子激光的研究现状,为理解用X射线测定蛋白质结构的机制,从原子水平上了解生命物质奠定基础,并提出今后X射线光源的发展趋势。
- 熊强丁立新姜晓燕丁库克
- 宫颈癌辐射敏感性相关基因的研究进展被引量：3
- 2017年
- 宫颈癌治疗以手术切除辅以放化疗作为首选治疗方法,但是上述治疗手段创伤较大,不良反应也较严重,甚至可能剥夺年轻患者的生育功能。近年来随着分子生物学的发展,研究者试图从基因水平寻找对辐射敏感的放疗靶点,以最高效的杀灭肿瘤,同时最大限度地保护正常组织,从而提高放疗效果,减少放疗副作用。本文主要就宫颈癌辐射敏感性相关的多种基因及其表达产物展开综述,为研究放疗抵抗的分子机制,预测宫颈癌放射治疗预后效果奠定基础,并为肿瘤的放疗增敏治疗提供新思路。
- 丁立新赵现哲姜晓燕丁库克
- 关键词：宫颈癌基因
- 一种核医学受检者周围辐射剂量率确定方法及系统
- 本发明实施例公开了一种核医学受检者周围辐射剂量率确定方法及系统。该方法包括：获取受检者的人体模型参数以及目标图像的灰度值；目标图像包括受检者的PET/CT图像或PET图像；使用周围辐射剂量率时空分布预测模型，根据受检者的...
- 丁库克岳海振何鑫雨丁立新林琳唐小哲刘瑶陈园生武云云姜晓燕尚兵
- 文献传递
- 人Cdc25B基因启动子报告基因载体的构建及转录活性分析被引量：4
- 2018年
- 目的构建人细胞分裂周期25家族蛋白B(Cdc25B)基因启动子(promoter)荧光素酶报告基因载体p GL3-Cdc25B-promoter,并检测其转录活性。方法应用欧洲启动子在线数据库(EPD)获得人Cdc25B基因5'端非编码区处包含转录起始位点在内的-2000^+100的DNA序列。以正常人全血基因组DNA为模板,利用PCR扩增该序列,并插入到p GL3-Basic荧光素酶报告基因载体上。通过设计不同引物,进一步构建系列缺失体,共获得7个不同长度启动子序列的报告基因载体。将其与内参质粒pRL-TK瞬时共转染He La细胞,通过双荧光素酶报告基因活性测定实验检测不同缺失体的转录活性。利用定点突变及RNA干扰(RNAi)探究预测的转录因子对Cdc25B转录活性的影响。结果构建的人Cdc25B基因启动子荧光素酶报告基因载体p GL3-Cdc25B-promoter经酶切鉴定及测序结果比对完全正确,将其转染He La细胞后,检测到荧光素酶高表达(P<0.05)。启动子系列缺失分析显示-160^-53片段包含基本核心启动子,与生物信息学的预测结果一致。定点突变及RNA干扰显示NF-YB转录因子对Cdc25B起正调控作用。结论成功构建了7个具有转录活性的人Cdc25B启动子缺失片段,确定了NF-YB是Cdc25B转录的一个重要调控因子,为进一步将其用于抗肿瘤药物的筛选与评价奠定了基础。
- 丁立新赵现哲姜晓燕刘晓丹周平坤丁库克
- 关键词：启动子转录因子碱基序列聚合酶链反应
- 外界刺激下肿瘤细胞中早反应基因5相关生物学功能的研究进展
- 2018年
- 早反应基因5(IER5)属于早期反应基因,因其在多种肿瘤细胞中均发挥着抑制肿瘤细胞增殖的作用而受到广泛关注。在受到外界刺激(热压力、血清、电离辐射等)时,肿瘤细胞内的IER5会过表达从而使细胞作出一系列应激性反应如G2期周期阻滞和凋亡等。在临床放化疗中IER5的表达量可以作为一种潜在的肿瘤放化疗后诱导细胞凋亡的生物标记物,并和肿瘤组织大小相关,对今后放化疗方案的改进具有重要的指导意义。
- 赵现哲丁立新刘晓丹周平坤姜晓燕丁库克
- 关键词：凋亡生物标记物
- 利用微生物吸附放射性核素的研究现状被引量：1
- 2017年
- 随着现代生物技术的发展,微生物吸附技术越来越受到广泛关注。利用细菌、真菌、藻类等生物体吸附放射性核素治理放射性核素污染,是一种较为新颖的方法,该方法的研究可为实际应用提供理论基础。微生物吸附核素研究相比传统工艺,其效率更高、更环保,具有更大的应用潜能。本文回顾了微生物吸附的发展历史、吸附机制、影响因素及模拟过程等方面的研究,并在此基础上提出了一些见解和看法,为今后这方面的研究提供参考。
- 丁立新解志红姜晓燕丁库克
- 关键词：微生物放射性核素动力学模型
- IER5在放射损伤HeLa细胞中对Cdc25B基因的转录调控机制研究
- 目的:IER5（Immediate early response 5）作于慢动力早期反应基因家族中的一员,其广泛存在于人体各组织脏器中,且在消化系统、生殖系统及泌尿系统肿瘤组织中较癌旁组织呈现较高表达,IER5的表达可能...
- 丁立新
- 关键词：CDC25B转录调控宫颈癌
- 文献传递
