田小雨
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
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- 内源性SO2/AAT体系下调参与血管紧张素Ⅱ所致小鼠心肌肥厚和心肌细胞自噬
- 陈清华张璐璐陈斯瑶黄娅茜武辉娟田小雨张春雨唐朝枢杜军保金红芳
- 内皮素-1对大鼠血管平滑肌细胞一氧化氮及硫化氢体系的影响被引量：7
- 2018年
- 目的探讨不同浓度内皮素-1（ET-1）对大鼠血管平滑肌细胞（A7r5细胞株）内源性一氧化氮（NO）及硫化氢（H2S）体系的影响。方法将A7r5细胞分为对照组和实验组，在实验组中分别加入浓度为10－8～10－6 mol/L的ET-1，对照组加入等体积的无菌磷酸盐缓冲液（PBS），48 h后分别应用NO和H2S探针原位检测A7r5细胞中NO及H2S水平，分别采用NO测定试剂盒和敏感硫电极法检测细胞上清中NO及H2S水平，应用Western blot法检测A7r5细胞中诱导型一氧化氮合酶（NOS2）、内皮型一氧化氮合酶（NOS3）、胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）、胱硫醚-β-合成酶（CBS）及细胞增殖核抗原（PCNA）的表达。结果10－8、10－7及10－6 mol/L ET-1处理的A7r5细胞内NO水平的相对荧光强度（0.078±0.080、0.075±0.002、0.056±0.009）均低于对照组（0.094±0.061），差异有统计学意义（F＝15.248，P〈0.05）；细胞上清中NO水平[（1.391±0.134） μmol/L、（1.219±0.280） μmol/L、（1.116±0.181） μmol/L]均明显低于对照组[（2.131±0.484） μmol/L]，差异有统计学意义（F＝20.833，P〈0.01）；NOS2 （0.457±0.097、0.462±0.116、0.438±0.180）明显低于对照组（0.721±0.222），差异有统计学意义（F＝6.196，P〈0.05）；NOS3蛋白表达差异无统计学意义（F＝2.669，P〉0.05）。10－8、10－7、10－6 mol/L ET-1组A7r5细胞内H2S水平的相对荧光强度（0.063±0.002、0.056±0.008、0.042±0.009）低于对照组（0.082±0.006），差异有统计学意义（F＝16.297，P〈0.01）；细胞上清中H2S水平[（19.961±3.428） μmol/L、（17.516±5.144） μmol/L、（14.481±4.885） μmol/L]均明显低于对照组[（29.439±4.236） μmol/L]，差异有统计学意义（F＝12.518，P〈0.01）；CBS蛋白表达（0.359±0.096、0.270±0.038、0.174±0.051）均低于对照组（0.707±0.107），差异有统计学意义（F＝20.833，P〈0.01），CSE蛋白表达差异无统计学意义（F＝0
- 田小雨张清友黄娅茜张达汤新景金红芳杜军保唐朝枢孙燕
- 关键词：内皮素-1一氧化氮硫化氢血管平滑肌细胞
- 血管紧张素Ⅱ致心肌肥大小鼠模型中内源性二氧化硫体系的变化被引量：2
- 2017年
- 目的探讨在血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）致心肌肥大小鼠模型中内源性二氧化硫（SO2）体系的变化。方法将9周龄健康C57BL小鼠14只按随机数字表法随机分为对照组及Ang Ⅱ组，每组7只，在背部皮下分别植入预装9 g/L盐水和Ang Ⅱ的胶囊渗透压泵。给药2周后，断颈处死小鼠。检测2组小鼠全心质量/体质量（HW/BW）及左心质量/全心质量（LVW/HW），苏木精-伊红染色法（HE）染色，在光学显微镜下观察心肌细胞显微结构变化，免疫组织化学法检测心肌标志分子α肌球蛋白重链（α-MHC）表达，Western blot检测α-MHC及SO2生成酶天门冬氨酸氨基转移酶1（AAT1）及AAT2表达的变化，采用高效液相色谱荧光法及比色法分别检测左心室心肌SO2水平及AAT活性。结果与对照组相比，Ang Ⅱ组小鼠HW/BW及LVW/HW均显著增大（均P〈0.01）；心肌细胞面积及直径增大，细胞质α-MHC蛋白阳性表达减弱；Western blot结果显示α-MHC和AAT2表达均明显减少（均P〈0.05）；小鼠心肌SO2水平降低[（1.093±0.131） μmol/g蛋白比（0.737±0.233） μmol/g蛋白，P〈0.01]，AAT活性降低[（7.979±1.317） U/mg蛋白比（6.470±0.516） U/mg蛋白，P〈0.05]；小鼠LVW/HW与心肌SO2水平呈负相关（r＝－0.56，P〈0.05）。结论Ang Ⅱ诱导小鼠心肌肥大模型中，心肌组织内源性SO2/AAT2体系显著下调。
- 陈清华黄娅茜武辉娟田小雨张璐璐杜军保金红芳
- 关键词：心肌肥大二氧化硫
- 内皮素-1对血管平滑肌细胞二氧化硫、硫化氢及一氧化氮体系的影响及机制
- 目的：本研究探讨内皮素-1 (ET-1)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)细胞系A7r5细胞及原代细胞中内源性二氧化硫(SO2)、硫化氢(H2S)及一氧化氮(NO)体系的影响及机制。方法：第一部分：不同浓度ET-1对大鼠...
- 田小雨
- 关键词：内皮素-1一氧化氮硫化氢二氧化硫活性氧
- 内源性一氧化氮对血管内皮细胞超氧化物歧化酶1活性及细胞凋亡的影响被引量：3
- 2021年
- 目的探讨内源性一氧化氮(NO)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)超氧化物歧化酶1(SOD1)活性及内皮细胞凋亡的调节作用。方法以HUVECs为研究对象,采用内皮型一氧化氮合酶(eNOS)短发夹RNA(shRNA)慢病毒转染对内皮细胞eNOS进行敲低,HUVECs分为4组:空载体组(scramble)、转染eNOS shRNA组(eNOS shRNA)、转染eNOS shRNA+硝普钠(SNP)组(eNOS shRNA+SNP)及转染eNOS shRNA+SNP+三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP)组(eNOS shRNA+SNP+TCEP)。采用Western blot法检测eNOS蛋白表达和SOD1二聚体/单体蛋白表达,采用酶联免疫吸附法检测SOD酶活性,采用NO荧光探针法检测内皮细胞NO水平,采用二氢乙锭(DHE)检测内皮细胞超氧化物阴离子水平,采用原位末端转移酶标记技术检测内皮细胞凋亡情况。结果与空载体组相比,eNOS shRNA组中内源性NO水平(2.690±0.420比15.029±2.193,P<0.01)、eNOS蛋白表达(1.000±0.778比3.141±0.199,P<0.01)、SOD1二聚体/单体比例(4.6±1.0比7.6±2.0,P<0.05)和SOD活性[(0.432±0.254)Carmen′s unit/10^(4) cell比(1.000±0.116)Carmen′s unit/10^(4) cell,P<0.01]均显著降低,细胞内超氧阴离子水平(11.180±1.560比6.146±1.007,P<0.01)和HUVECs凋亡水平[75.0(55.0,100.0)%比0(0,0)%,P<0.01]均显著增加。与eNOS shRNA组相比,eNOS shRNA+SNP组中内源性NO含量(16.705±0.116比2.690±0.420,P<0.01)、SOD1二聚体/单体比例(7.3±2.0比4.6±1.0,P<0.05)和SOD活性[(0.737±0.060)Carmen′s unit/10^(4) cell比(0.432±0.254)Carmen′s unit/10^(4) cell,P<0.05]均显著增加,细胞内超氧阴离子水平(6.897±1.648比11.180±1.560,P<0.01)和HUVECs凋亡水平[0(0,0)%比75.0(55.0,100.0)%,P<0.01]均显著下降。与eNOS shRNA+SNP组相比,eNOS shRNA+SNP+TCEP组中SOD1二聚体/单体比例(4.4±0.9比7.3±2.0,P<0.05)和SOD活性[(0.214±0.084)Carmen′s unit/10^(4) cell比(0.737±0.060)Carmen′s unit/10^(4) cell,P<0.01]均显著降低,超氧阴离子水平(10.917±1.552比6.897±1.640,P<0.01)和HUVECs凋亡水平[63.6(55.0,90.0)%比0(0,0)%,P<0.01]均显
- 张再丰王秀丽张赏月田小雨张璐璐杜军保金红芳黄娅茜
- 关键词：内源性一氧化氮超氧化物歧化酶人脐静脉内皮细胞凋亡
