张宇航
- 作品数：6 被引量：14H指数：3
- 供职机构：湖南农业大学动物医学院更多>>
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- 地西他滨对猪圆环病毒2型的体外抑制作用
- 2023年
- 猪圆环病毒2型(PCV2)作为无囊膜单股负链环状DNA病毒,能引起感染猪的免疫抑制,是猪圆环病毒相关疾病的主要病原体,广泛传播于世界各地,给全球养猪业造成了巨大损失。为探究地西他滨(DAC)对PCV2增殖的影响及其作用机制。本研究构建了感染PCV2的PK-15细胞模型,使用CCK-8法检测DAC对PK-15细胞的细胞毒性,进而使用荧光定量PCR、间接免疫荧光和Western blot检测DAC对PCV2增殖水平的影响;通过间接免疫荧光法标记5甲基胞嘧啶表征DAC对细胞基因组DNA全局甲基化的影响;通过RNA干扰技术在PK-15细胞中沉默DAC的作用靶点DNA甲基转移酶1(Dnmt1),进一步探究DAC抑制PCV2增殖的作用机理。结果显示,DAC在20μmol·L^(-1)时才具有轻微的细胞毒性,并在浓度为10μmol·L^(-1)时即表现出明显的抗PCV2活性,可以抑制不同时间的PCV2增殖。DAC处理细胞后能显著降低PK-15细胞基因组DNA的甲基化,并诱导Ⅰ型干扰素(Ⅰ-IFN)和干扰素刺激基因(ISGs)的表达。沉默DAC的作用靶点Dnmt1能显著抑制PCV2的增殖,且同样诱导I-IFN和ISGs的表达。本研究证实DAC能够有效抑制PCV2的增殖,且发现DAC能促进I-IFN和ISGs的表达并抑制DNA的甲基化,推测DAC抗PCV2病毒的功能与I-IFN和ISGs的表达上调有关,提示DAC具备开发成PCV2临床抗病毒药物的潜力,还揭示Dnmt1是激活宿主固有免疫抗病毒通路的潜在靶点,为新的PCV2抗病毒药物研发提供理论依据。
- 范锦全张宇航唐午阳赵欣宇李丕顺郑晓峰
- 关键词：地西他滨猪圆环病毒抗病毒固有免疫
- 猪传染性胸膜肺炎研究进展被引量：6
- 2019年
- 猪传染性胸膜肺炎是由猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)感染引起的以急性出血和慢性纤维素性胸膜肺炎为特征的一种高度传染性疾病,可引起患猪大量死亡,为养猪业的三大呼吸道疾病之一。流行病学研究发现猪传染性胸膜肺炎多呈混合感染,且有一些非典型菌株流行。除毒素外,蛋白酶、尿酶、黏附素、APP的糖基化系统、双组分系统CpxA/CpxR等也参与致病的过程。另外, App的脂多糖(LPS)可使宿主肺部的细胞产生大量的致炎细胞因子,参与肺部炎症的形成。病原与呼吸道上皮细胞吸附的表面分子、新致病因子特别是引起细胞因子暴发的病原分子的鉴定及其诱导的免疫力,将为组合疫苗的研制提供基础。研究APP感染与宿主免疫状况的关系将为免疫调节剂的筛选提供依据。文章对近年来该病的流行情况、发病机制和疫苗研究进展进行了综述,旨在为该病的防治和未来的研究方向提供参考。
- 张宇航黄复深
- 关键词：猪传染性胸膜肺炎胸膜肺炎放线杆菌发病机理疫苗
- 猪胸膜炎放线杆菌重组外膜蛋白LOLA诱导小鼠产生免疫保护力的研究被引量：4
- 2020年
- 为筛选出具有广谱抗猪传染性胸膜肺炎作用的疫苗候选分子,本研究利用PCR技术从血清1型猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(App)基因组克隆外膜蛋白(Omp)lola基因。经生物信息学分析显示,App lola基因由633 bp组成,编码210个氨基酸,不同的血清型之间具有很高的同源性。将App lola克隆至pET-32a(+),转化大肠杆菌,表达重组蛋白rLOLA。取4周龄小鼠60只,随机分为6组,分别于0、2、4周经皮下免疫:弗氏不完全佐剂(IFA)+10μg rLOLA(低剂量组)、IFA+30μg rLOLA(中剂量组)、IFA+50μg rLOLA(高剂量组)、30μg rLOLA(rLOLA组)、IFA(对照组)和生理盐水(对照组)。ELISA检测结果显示,第3次免疫接种后相较于对照组(IFA组和生理盐水组),实验组小鼠血清IgG水平均明显升高,尤以高剂量组小鼠(IFA+50μg rLOLA)更显著(p<0.01)。于第3次免疫后2周,利用10×LD50 App对小鼠腹腔注射攻毒,5 d后对照组小鼠全部死亡,30μg rLOLA、IFA+50μg rLOLA、IFA+30μg rLOLA、IFA+10μg rLOLA免疫组小鼠存活率分别为20%、40%、20%和10%。上述结果表明,IFA+rLOLA可以诱导部分抗App攻击感染的免疫保护作用。本研究为进一步研究广谱抗猪传染性胸膜肺炎疫苗积累了基础资料。
- 张宇航张雨龙杨婷婷黄复深
- 关键词：小鼠
- 地西他滨对猪圆环病毒2型的体外抑制作用
- 引言/目的猪圆环病毒2型(PCV2)作为无囊膜单股负链环状DNA病毒,能引起感染猪只的免疫抑制,是猪圆环病毒相关疾病的主要病原体,广泛传播于世界各地,给全球养猪业造成了巨大损失。为探究地西他滨(DAC)对PCV2增殖的影...
- 范锦全张宇航唐午阳赵欣宇李丕顺郑晓峰
- 关键词：地西他滨猪圆环病毒抗病毒固有免疫
