刘清桂
- 作品数：7 被引量：2H指数：1
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 移植细胞实现肝脏有效再殖的机制研究
- 2020年
- 细胞移植是目前代替原位肝移植治疗终末期肝脏疾病最具可行性的方法。然而由于细胞来源、移植细胞植入受体肝脏效率低、增殖缓慢等问题,极大地限制了细胞移植治疗方式在临床上的广泛应用。近年来,通过人为修饰改变移植细胞和宿主肝脏微环境和肝细胞的特性,使得移植细胞再殖肝脏取得了实质性的进展。本文主要综述目前已经成功实现肝脏再殖的研究成果,并探讨移植细胞在不同动物模型中再殖肝脏的潜在机制。
- 阎琛刘清桂陈佳佳孙宇杨桃朱海英陈费王敏君
- 关键词：细胞衰老
- 肝细胞多倍化的研究进展
- 2017年
- 多倍体肝细胞含有两组或两组以上的DNA染色体组,是哺乳动物成熟肝细胞的典型特征。肝细胞多倍化过程首次发生在出生后的肝脏发育过程中,主要由胰岛素-Akt信号通路调控的细胞质不完全分裂导致。随着年龄的增加,多倍体肝细胞的比例还会继续升高,老年小鼠和人肝脏中多倍体肝细胞比例可高达90%和40%。而当肝脏受到肝脏切除、毒性刺激和代谢过载以及氧化应激等病理损伤时,肝细胞多倍化现象会再次发生。但是,当衰老的多倍体肝细胞在年轻小鼠肝脏中发生增殖时,不仅可产生低倍体肝细胞,还可以逆转其衰老特征。生理和病理过程中多倍体肝细胞的生物学功能备受争议,一般认为与细胞的成熟和终末分化、细胞衰老以及疾病有着重要的关系。本文主要阐述正常生理发育和病理条件下多倍体肝细胞形成过程及潜在的生物学意义,以及多倍体肝细胞逆转对临床肝脏疾病研究的可能提示。
- 阎琛刘清桂陈佳佳孙宇韩进陈费朱海英王敏君
- 关键词：多倍化
- 下调SIRT6对肝癌干细胞干性维持的抑制作用被引量：1
- 2020年
- [目的]探讨抑制SIRT6表达在肝癌干细胞干性维持中的作用及潜在机制。[方法]在不同肝癌细胞系中构建肝癌干细胞模型(Lv-Pnanog-GFP),利用流式细胞术分选出不同来源的肝癌干细胞,采用蛋白免疫印迹(Western blot,WB)和免疫细胞化学(immunocytochemistry,ICC)技术检测SIRT6蛋白在肝癌干细胞中的表达水平;构建SIRT6慢病毒短发卡RNA感染载体(shSIRT6)感染肝癌干细胞,采用WB技术检测shSIRT6的干扰效率;采用实时定量反转录聚合酶链反应(real-time PCR)检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的干性基因(Nanog、OCT4、CD13、SOX2、EpCAM、CD44)mRNA的表达水平,ICC方法检测EpCAM蛋白的表达水平;采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)试剂盒和细胞增殖活力(CCK8)试剂盒检测抑制SIRT6表达后肝癌干细胞的增殖能力;采用克隆形成和成球实验检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的自我更新能力;利用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)试剂盒检测抑制SIRT6后肝癌干细胞的衰老水平。[结果]WB和ICC检测结果显示,Nanog阳性肝癌干细胞中SIRT6表达水平明显高于Nanog阴性肝癌细胞;real-time PCR检测结果显示,抑制SIRT6后,肝癌干细胞的干性基因(Nanog、OCT4、CD13、SOX2、EpCAM、CD44)mRNA表达水平降低。与real-time PCR结果一致,ICC结果也表明,抑制SIRT6后,干性标志物EpCAM的蛋白表达水平降低(P<0.01)。细胞增殖检测结果进一步显示,抑制SIRT6,肝癌干细胞的增殖水平降低(P<0.05)。克隆形成实验和细胞成球实验结果显示,抑制SIRT6导致肝癌干细胞的克隆形成能力和成球能力一致性降低(P<0.01)。SA-β-Gal活性检测结果显示,抑制SIRT6后,肝癌干细胞的SA-β-Gal活性显著性提高(P<0.01)。[结论]肝癌干细胞高表达SIRT6,通过抑制SIRT6表达可诱导肝癌干细胞发生衰老,导致其干性标志物表达水平下降,增殖能力降低,肝癌干细胞克隆形成和成球能力下降。
- 刘清桂苏静陈佳佳陈费杨桃向桂齐阳王敏君
- 关键词：组蛋白去乙酰化酶肝癌干细胞NANOG干细胞特性衰老
- 衰老个体中的组织干细胞
- 2017年
- 组织干细胞是组织器官稳态维持和损伤修复或再生的结构基础。伴随着年龄的增加,组织干细胞的数量、增殖和分化等功能及其所处微环境发生改变,从而使得老年个体再生修复功能降低或异常。此外,组织干细胞的衰老与老年个体衰老相关疾病的发生有着密切的关系。该文拟介绍几种目前比较明确的组织干细胞在老年个体中发生改变的基本特征及其发生机制,旨在为正确理解老年组织机能低下提供重要的理论基础,并希望能够建立有效可行的延缓或逆转组织干细胞衰老的途径以提高老年人群的生活质量。
- 刘清桂陈佳佳陈费王敏君胡以平
- 关键词：衰老
- 胚胎干细胞转染外源基因教学实验优化被引量：1
- 2017年
- 针对胚胎干细胞的培养和外源基因转染实验教学过程中,存在学生培养的胚胎干细胞状态较差、转染外源基因效率偏低等问题,通过实验探索,发现通过控制接种滋养层细胞的密度、悬浮转染代替传统贴壁转染的方法,可显著改善上述问题。该探索不仅优化了转染方法、提高了教学效果,也为学生培养科研能力奠定了基础。
- 陈费王敏君姚浩刘清桂胡以平
- 关键词：胚胎干细胞基因转染
- 一种Clusterin在肝硬化不同进展阶段的应用
- 本发明属于生物医药化学技术领域，公开了一种Clusterin在肝硬化不同进展阶段的应用，包括载脂蛋白Clusterin在制备肝硬化不同进程的生物学诊断试剂盒中的应用；载脂蛋白Clusterin在制备用于慢性肝病抗纤维化药...
- 王敏君陈费胡以平刘清桂
- 联体共生小鼠模型中肝细胞衰老逆转的研究
- 细胞衰老是指在DNA损伤、端粒酶活性丢失等内在因素和细胞间通讯改变、体液循环因子改变等外在条件的刺激下，细胞发生一系列形态结构的改变，导致细胞永久性退出分裂周期，无法发挥正常生理功能。而衰老细胞的累积会导致组织器官的衰老...
- 刘清桂
- 关键词：肝细胞细胞增殖脂质代谢
