王萍
- 作品数：45 被引量：158H指数：7
- 供职机构：中国人民解放军第一军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 110例癫痫患者24hAEEG临床应用报告被引量：11
- 1997年
- 目的对１１０例癫痫患者的２４ｈ动态脑电图（ＡＥＥＧ）的应用价值进行了初步探讨。方法使用英国的ＯｘｆｏｒｄＭｅｄｉｌｏｇ９２００型８导磁带记录仪进行２４ｈ描记后作离线回放分析，并与普通ＥＥＧ相比较。结果１１０例中ＡＥＥＧ异常６２例（５６．４％），９８例中ＥＥＧ发现异常３２例（３２．７％）。ＥＥＧ正常而ＡＥＥＧ异常３０例，ＥＥＧ异常而ＡＥＥＧ正常９例。结论ＡＥＥＧ明显优于ＥＥＧ，但有时ＡＥＥＧ也不能捕获到间歇期的发作波。分析ＡＥＥＧ记录必需注意将睡眠Ⅰ、Ⅱ期出现的高幅顶尖波、纺锤波与痫样波区分开来，以免导致错误诊断。ＡＥＥＧ对颞叶和额叶底面的致痫灶反应较差，需补做特殊电极的ＥＥＧ，如蝶骨电极。
- 黄涛林丽珍侯光男王萍
- 关键词：癫痫脑电图动态脑电图
- 恶性疟原虫海南株（FCC1/HN）谷氨酸脱氢酶基因的克隆及序列分析
- ＜正＞ 以检测疟原虫特异性抗原为基础的免疫学方法,由于操作简便、快速、结果易于判定,日益受到人们的重视并显示出良好的应用前景,目前疟原虫相对特异的富组氨酸蛋白Ⅱ（HRP Ⅱ）和乳酸脱氢酶（LDH）正被应用于疟疾的诊断。研...
- 李林海李明吴英松王萍
- 文献传递
- HBV多表位复合基因在NS-1细胞的表达
- 2003年
- 目的 研究HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因在哺乳动物细胞NS - 1内的表达。方法 PCR扩增HBc 1～ 72aa及 93～ 1 83aa编码序列并合成HBV多表位复合基因 ,定向克隆至pcDNA3 .1 (+)。经双酶切及核苷酸序列测定等方法筛选阳性克隆。阳性质粒以Lipofectamine介导转染NS - 1细胞 ,通过ELISA及间接免疫荧光等方法检测细胞表达产物。结果 双酶切及测序结果证实阳性质粒正确克隆了约 890bp的HBc与HBV多表位复合基因的杂合基因。重组子成功转染NS - 1细胞并表达HBc-Mep融合蛋白。 结论 HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因在哺乳动物细胞NS - 1内正确表达目的蛋白。为研究pHBc -Mep作为DNA疫苗的免疫活性奠定基础。
- 田泽维董文其王萍吴英松李林海李明黄建生
- 关键词：HBVHBC细胞转染CELL
- 抗恶性疟HRP-11单链抗体的筛选和鉴定(英文)
- 2000年
- 目的 研究开发简便、快速和有效的疟疾诊断技术。方法 利用噬菌体抗体库技术 ,在构建抗恶性疟原虫红内期噬菌体抗体库的基础上 ,经 3轮“吸附 -洗脱 -扩增”的富集反应后 ,筛选抗HRPII阳性克隆株并进行可溶性诱导表达 ,最后用ELISA和Westernblot等进行鉴定。结果 筛选出 6株抗HRPII阳性克隆株 ,表达的单链抗体Mr 为 310 0 0左右 ,能与HRPII抗原起特异性结合反应。
- 徐伟文董文其李明毕惠祥陈白虹王萍
- 关键词：噬菌体抗体库单链抗体恶性疟
- 恶性疟原虫FCC1/HN株新抗原表达序列标记位(ESTs)的获得
- 1999年
- 目的： 以筛选恶性疟原虫ＦＣＣ１／ＨＮ 株λｇｔ１１ ｃＤＮＡ 表达文库所获得的强阳性克隆作基础， 对上述强阳性克隆的ｃＤＮＡ 插入片段进行ＤＮＡ 序列测定， 阐明相对应的新表达序列标签 （ＥＳＴｓ）， 作为发现新抗原基因的线索。方法：以ｃＤＮＡ 表达文库接头的较长链作ＰＣＲ引物、扩增ｃＤＮＡ 插入片段，将扩增产物克隆入Ｍ１３ ｍ ｐ１８测序载体， 进行部分ＤＮＡ 序列测定、编辑， 将之在ＧｅｎＢａｎｋ 中进行ＤＮＡ 序列同源性搜索比较和分析。结果： 获得１ 个Ｃ０３ 序列为已知恶性疟原虫热休克蛋白７０－２ 基因片段， 发现５ 个新的具有抗原意义的恶性疟原虫表达序列标记位 （ＥＳＴｓ）。结论： 这５ 个新的恶性疟原虫表达序列标记位为发现新的恶性疟原虫抗原基因奠定了基础。
- 阎宗合谢毅李明王萍王燕妮毕惠祥李英杰
- 关键词：恶性疟原虫抗原CDNA
- 超量献血员脑干听觉和视觉诱发电位的分析
- 1999年
- 为了解超量献血（每年献血超过５Ｌ）［１］对献血员脑电生理功能的影响，我们从１９９７年７月～１９９８年２月对３０例超量献血员进行听觉诱发电位（ＢＡＥＰ）和视觉诱发电位（ＶＥＰ）检测，现将结果分析如下。１资料与方法献血员组：３０例，男１８例，女１２例，年...
- 林丽珍黄涛王萍
- 关键词：听觉诱发电位视觉诱发电位
- 人胰岛素样生长因子-1基因的克隆及其表达被引量：8
- 2002年
- 目的获得大量高纯度、具有生物学活性的人胰岛素样生长因子 1(hIGF 1) ,构建hIGF 1原核表达载体 ,并进行表达与纯化。方法以pUCIGF质粒为模板 ,PCR扩增了hIGF 1基因。经适当酶切后 ,构建表达载体pRSET IGF ,转入大肠杆菌BL2 1(DE3)进行表达 ,并经阴离子交换色谱、疏水色谱和凝胶过滤纯化。结果带有重组质粒pRSET IGF的大肠杆菌经IPTG诱导后 ,以可溶性形式表达 7.8kD大小的蛋白 ,其表达量占菌体总蛋白量的10 %～ 2 0 % ,纯化后目的蛋白纯度达 95 %以上 ,Western印迹表明重组蛋白具有hIGF 1抗原活性。结论构建了pRSET IGF重组质粒 ,并成功地在大肠杆菌中获得可溶性表达 。
- 吴岚晓李明王萍陈白虹
- 关键词：胰岛素样生长因子-1基因克隆原核表达基因工程药物
- 以HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因真核表达载体的构建被引量：6
- 2002年
- 目的 构建以HBVHBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因真核表达质粒 ,以探讨HBV基因免疫的新途径。方法 PCR扩增HBc第 1～ 72aa及 93～ 183aa编码序列并定向克隆至pcDNA3.1的NheⅠ /XhoⅠ位点 ,构建真核表达载体pHBcdM。合成HBV多表位基因并插入HBc原脊区基因位点 ,构建HBc Mep融合基因真核表达质粒。经PCR、酶切及序列测定等方法筛选阳性质粒。结果 双酶切及测序结果证实阳性质粒正确克隆了约 885bp、编码HBc与HBV多表位的复合基因。结论 成功构建了以HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因真核表达载体pHBc Mep ,为研究pHBc Mep作为DNA疫苗的免疫活性奠定基础。
- 田泽维董文其李明王萍黄建生
- 关键词：HBVDNA疫苗
- 恶性疟原虫云南株丝氨酸重复抗原部分基因的克隆和序列分析
- 1998年
- 用ＰＣＲ方法特异性扩增ＳＥＲＡ基因片段，并将该基因片段克隆于Ｍ１３噬菌体，用双脱氧链末端终止法进行测序，应用ＰＣＧＥＮＥ软件对该基因序列进行了分析，结果显示该基因片段长度为４５３ｂｐ，Ａ＋Ｔ／Ｇ＋Ｃ为２．６∶１，符合恶性疟原虫结构基因的特点。同源性分析显示该基因在不同虫株间高度保守，我国ＰＦＤ－３／ＹＮ虫株ＳＥＲＡ基因片段仅与Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３（巴西）株及Ｓ１６（塞内加尔）株在第６６７位氨基酸有不同，与ＦＣＲ３（冈比亚）、ＦＣＢＲ（哥化比亚）、及Ｓ１４、Ｓ１５（塞内加尔）等其它虫株ＳＥＲＡ基因序列完全一致。抗原表位预测分析显示该多肽Ｎ端和Ｃ端可能有抗原表位存在。
- 肖建华李明毕惠祥王萍李英杰
- 关键词：恶性疟原虫基因序列
- 重组人胰岛素样生长因子-1分离纯化工艺的建立被引量：5
- 2002年
- 目的 建立重组人胰岛素样生长因子 1(rhIGF 1)大肠杆菌表达后的高效分离纯化工艺 ,以便获得高纯度的重组蛋白。方法 已构建好的表达载体转化大肠杆菌BL2 1,经IPTG诱导进行表达。将离心收集到的菌体用超声破壁 ,破壁菌液离心分离 ,收集上清液 ,进行阴离子交换层析、疏水层析和分子筛纯化 ,得到最终纯品。蛋白纯度用SDS PAGE鉴定 ,ELISA法检测rhIGF 1含量 ,检测纯化后重组蛋白的生物学活性。结果 用大肠杆菌BL2 1表达rhIGF 1以可溶性形式存在胞浆中 ,经 3步柱层析纯化后 ,可获得高纯度的rhIGF 1(纯度 >98% )。该蛋白在体外具有良好的促NIH3 T3 细胞增殖作用。结论 建立了rhIGF 1分离纯化工艺 ,其工艺流程可获得具有生物学活性的高纯度rhIGF 1,为产业化及临床应用奠定基础。
- 吴岚晓李明陈白虹王萍秦煜
- 关键词：胰岛素样生长因子-1纯化糖尿病
