甲型流感病毒宿主范围决定因素的研究进展 2023年 流感是由流感病毒所引起的一类急性呼吸道疾病。流感病毒分为4种类型:A(甲)、B(乙)、C(丙)和D(丁)。其中甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)的宿主范围极广,除了家禽、鸟类以外,IAV还能感染马、猪、海豹、水貂、老虎、犬、猫等哺乳动物以及人类[1]。IAV基因组编码10种必需蛋白,分别为聚合酶碱性蛋白2(PB2)、聚合酶碱性蛋白1(PB1)、聚合酶酸性蛋白(PA)、血凝素(HA)、核蛋白(NP)、神经氨酸酶(NA)、基质蛋白(M1)、膜蛋白(M2)、非结构蛋白1(NS1)以及非结构蛋白2(NS2),此外其还编码多种附件蛋白,包括PB1-F2蛋白、PA-X蛋白等。 张晓芮 汤思淇 朱大帷 李海玲 冯亚莉 徐艺娜 苏超凡 冷昊钰 王永涛 张月美 太晓春 张莹关键词:甲型流感病毒 急性呼吸道疾病 基质蛋白 宿主范围 聚合酶 碱性蛋白 欧亚类禽H1N1猪流感病毒研究进展 被引量:6 2022年 猪作为“流感病毒的混合容器”可以感染不同亚型的流感病毒,其中H1N1亚型在猪群中最为流行。可分为欧亚类禽H1N1猪流感病毒(Eurasian avian-like H1N1,EA H1N1)、经典猪流感病毒(Classical swine H1N1,CS H1N1)和2009年大流行H1N1病毒(2009 Pandemic H1N1,2009/H1N1)等。EA H1N1猪流感病毒自出现后便开始在欧洲和亚洲地区的猪群中快速传播,逐渐取代了当时流行的CS H1N1猪流感病毒。部分地区存在不同亚型的猪流感病毒或不同基因型的EA H1N1猪流感病毒共同传播的现象,特别是当2009/H1N1猪流感病毒出现后,为其重组提供了更多可选择的基因片段,增加了其发生重组的概率,其中G4基因型的EA H1N1猪流感病毒在哺乳动物中可表达出更强的适应性,成为优势基因型。通过氨基酸位点的突变,EA H1N1猪流感病毒实现了自身的进化,如病毒复制效率提高、毒力增强、突破物种屏障传播或耐药性的产生等,使现阶段针对其防治的手段受到牵制,多种因素共同奠定了其在传播中的主要地位,具有造成下一次流感大流行的潜力。阐明了EA H1N1猪流感病毒能够在传播过程中占据主导地位的原因,指出现阶段防治手段的局限性,并指出在以后的研究中应重点关注其在不断突破物种屏障传播时,通过基因片段的重组和关键氨基酸位点的突变而获得的适应性优势,以期为EA H1N1猪流感病毒的进一步研究提供相应的依据。 李海玲 张世伟 冯亚莉 冷昊钰 吕嘉铭 徐艺娜 苏超凡 汤思淇 王永涛 张莹关键词:突变 一种基于RT-LAMP与CRISPR技术的猪流感和蓝耳病检测试剂盒与应用 本发明公开了一种基于RT‑LAMP与CRISPR技术的猪流感和蓝耳病检测试剂盒与应用,属于兽医学领域。本发明的检测试剂盒包括RT‑LAMP引物对、Cas12a蛋白、Cas13a蛋白、PRRSV crRNA、SIV crR... 张莹 冯亚莉 赵史宇辰 汤思淇一种同时检测野鸟流感与西尼罗病毒的胶体金试纸条及其检测方法 本发明公开了一种同时检测野鸟流感与西尼罗病毒的胶体金试纸条及其检测方法,涉及生物检测技术的技术领域。所述试纸条包括底板(7),所述底板(7)上中间位置设置反应垫(3),所述反应垫(3)一端依次设置结合垫(2)和样品垫(1... 张莹 冯亚莉 张世伟 李海玲病毒检测方法研究进展 被引量:2 2023年 随着病毒的不断变异和传播,病毒检测方法的研究也在不断发展和深化,在病毒性疾病暴发时,及时、准确地检测病毒变得尤为重要。传统的病毒检测方法包括病毒分离鉴定、PCR和ELISA等,但这些方法都存在操作繁琐、检测时间长、灵敏度低等问题。近年来,一些新兴技术和优化的方法被应用于各类病毒的检测,带来了更加准确和高效的病毒检测,如基于微滴式数字PCR的病毒检测,其灵敏度可高出实时荧光定量PCR约16倍;基于基因测序技术的病毒检测方法越来越受到关注,其不仅可以检出病毒种类、数量,还能直接准确地获取病毒基因序列,甚至能够发现新病毒。此外,基于CRISPR/Cas、生物传感器、流式细胞术等检测技术在病毒检测领域也受到了广泛应用。虽然这些新技术在特异性和灵敏度等方面存在显著优势,但仍然面对一些考验,如检测成本较高、需要实验室环境等,这些问题限制了病毒检测技术的普及和推广。因此,未来的研究重点将聚焦于提高检测的准确性、实用性并降低成本,研发出更加完善的病毒检测技术。作者将优化后及新兴的检测技术与传统检测技术相对比,并总结其优缺点,以期为病毒检测、病毒性疾病防控提供参考依据。 赵史宇辰 汤思淇 冯亚莉 张莹关键词:核酸检测 免疫学检测 生物传感器 一种基于RAA与CRISPR技术的犬、猫细小病毒试剂盒及检测方法 本发明公开了一种基于RAA与CRISPR技术的犬、猫细小病毒试剂盒及检测方法,属于兽医学领域。本发明的一种用于检测犬、猫细小病毒的试剂盒,包括RAA扩增引物对、Cas12a蛋白、crRNA和ssDNA探针DNA‑FAM。... 张莹 冯亚莉 任晨洋 曾涛疣鼻天鹅TLR4基因克隆及生物信息学分析 2023年 【目的】克隆疣鼻天鹅Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)基因,并对其编码蛋白进行生物信息学分析,为进一步探索疣鼻天鹅TLR4蛋白抗病原微生物免疫机制提供重要参考依据。【方法】利用PCR扩增并克隆疣鼻天鹅TLR4基因CDS序列,应用NCBI-BLAST、Mega-X软件进行序列比对并构建系统进化树;利用ProtParam、SWISS-MODEL等软件预测TLR4基因编码蛋白的结构、功能及与宿主蛋白的相互作用关系,并进行GO功能和KEGG通路富集分析。【结果】试验成功克隆疣鼻天鹅TLR4基因CDS区序列,全长2550 bp,已提交至NCBI,登录号为:OP908241。疣鼻天鹅TLR4基因CDS区序列中存在79个稀有密码子,其中含6段连续稀有密码子,编码849个氨基酸,与灰雁和鸿雁相似度较高,亲缘关系最近。TLR4蛋白的跨膜结构域位于第647―667位氨基酸处,N-端包含由36个氨基酸组成的信号肽,信号肽切割位点在第36―37位氨基酸之间,置信度为67.85%,含有10个N-糖基化位点和85个磷酸化位点,是亲水性蛋白,主要存在于细胞质中,与人TLR4蛋白有相似的三级结构,相似率为45.48%。TLR4蛋白共存在10个主要互作蛋白,富集得到96个GO功能条目和7条KEGG通路,其中GO功能条目包括物种间相互作用、免疫反应、应激反应、信号转导等;KEGG通路包括甲型流感、单纯疱疹病毒Ⅰ型感染及沙门氏菌感染等。【结论】疣鼻天鹅TLR4基因与灰雁和鸿雁亲缘关系最近,有明显的密码子种属选择性,含有6段连续稀有密码子,其蛋白存在跨膜结构域和信号肽,并与天然免疫应答、信号转导和应激反应密切相关。 于鑫 胡玉苗 李芳兵 杨亚东 赵金 冯亚莉 张莹关键词:克隆 一种基于RT-RAA与CRISPR技术的罗非鱼湖病毒检测试剂盒与应用 本发明公开了一种基于RT‑RAA与CRISPR技术的罗非鱼湖病毒检测试剂盒与应用,属于兽医学领域。本发明的用于检测罗非鱼湖病毒的试剂盒,包括RT‑RAA引物对、Cas12a蛋白和crRNA。所述RT‑RAA引物对包括如S... 张莹 冯亚莉 任晨洋 曾涛甲型流感病毒与宿主蛋白相互作用对病毒复制周期的影响 2023年 甲型流感病毒(Influenza A virus,IAV)是一种通过消化道、呼吸道等途径传播且危害严重的人畜共患病原体。目前,接种疫苗仍是预防流感最有效的方法,但流感病毒极易发生基因重组和变异从而产生新型流感病毒,导致动物体无法获得对流感病毒的持久免疫力,为疫苗的研制带来困难。对病毒与宿主因子之间的相互作用进行研究,可以为筛选出与病毒蛋白存在相互作用的宿主因子并深入研究其具体机制提供资料。因此,文章对IAV与宿主蛋白相互作用,这些相互作用促进病毒繁殖与复制的分子机制及激发宿主防御机制的研究进展进行了综述,以期为深入理解IAV感染的分子机制及机体的抗病毒机制提供参考。 王瑶琦 汤思淇 李海玲 冯亚莉 徐艺娜 苏超凡 冷昊钰 王永涛 张月美 太晓春 张莹关键词:甲型流感病毒 相互作用 宿主防御 新型疫苗佐剂研究进展 被引量:12 2023年 佐剂是增强和调节疫苗抗原免疫反应的免疫刺激物,与抗原一起使用能产生更强的免疫反应。佐剂能激活机体的天然免疫系统,当佐剂和抗原同时或预先注射到机体内,可改变抗原的形态并延长抗原在体内的滞留时间,促进单核吞噬细胞对抗原的递呈能力及刺激淋巴细胞增殖分化,从而增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答类型。佐剂的发展史长达一百多年,目前使用最广泛的疫苗佐剂是铝佐剂,传统的灭活疫苗在很大程度上依靠以铝盐为主的复合物作为主要佐剂。但近年来,随着基因工程技术和生物技术的飞速发展,重组疫苗、基因工程载体疫苗、核酸疫苗等新型疫苗逐步被开发出来,这些新型疫苗与传统疫苗相比往往存在免疫应答能力差等问题,早期的抗原不纯导致传统的铝盐佐剂已无法满足需要。为解决新型疫苗免疫原性差的问题,科研人员致力于开发广谱且高效的新型疫苗佐剂用来增强新型疫苗的作用。新型疫苗佐剂种类繁多,功能各不相同且机制较为复杂,可分为新型油乳佐剂、脂质体佐剂、CpG寡核苷酸佐剂、细胞因子佐剂、纳米佐剂、多糖佐剂及复合系统类佐剂等。笔者对疫苗佐剂的发展史、作用机制及新型疫苗佐剂的分类进行分析和评述,以期为新型疫苗佐剂的研制及开发提供参考。 韩冰 汤思淇 朱大帷 李海玲 冯亚莉 苏超凡 徐艺娜 冷昊钰 王永涛 张月美 太晓春 张莹关键词:疫苗佐剂 新型佐剂 免疫