彭艳辉 作品数:23 被引量:70 H指数:5 供职机构: 郴州市第一人民医院 更多>> 发文基金: 湖南省高等学校科学研究项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
沉默UVRAG基因在二烯丙基二硫诱导K562细胞中caspase3的表达 被引量:1 2015年 目的:沉默UVRAG基因在DADS诱导K562细胞中观察caspase3的表达。方法:以K562细胞为细胞模型,将构建成功并筛选出最有效干扰抑制UVRAG基因的si RNA序列片段采用lipofectamine TM2000脂质体转染法转染白血病K562细胞,组别为:空白对照组,转染试剂组、阴性对照组,阳性对照组,转染24小时后,利用QT-PCR检测UVRAG m RNA的表达水平以此观察干扰效果,再以40 mg/LDADS处理转染试剂组12小时,采用蛋白印迹(Western Blotting)技术检测凋亡相关基因caspase3的表达。结果:QT-PCR显示:与空白组相比,UVRAG m RNA表达明显减少,表明沉默UVRAG基因成功;Western Blotting显示:DADS处理的干扰成功的K562细胞12小时后,检测到caspase3的蛋白表达水平下降。结论:沉默UVRAG基因能使白血病K562细胞中凋亡相关基因caspase3的蛋白表达水平下降,提示抑制UVRAG表达的同时也可能抑制DADS诱导K562细胞的凋亡。 肖艳芳 殷小成 彭艳辉 杨云华 罗永姣关键词:二烯丙基二硫 K562细胞 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 二烯丙基二硫上调Beclin1介导白血病K562细胞自噬性死亡的研究 被引量:4 2014年 目的:通过二烯丙基二硫诱导白血病K562细胞发生自噬性死亡,探讨其作用机制。方法:40 mg/LDADS作用K562细胞12小时后,透射电镜观察K562细胞超微结构,MDC染色荧光显微镜观察自噬泡及流式细胞仪定量检测自噬率,RT-PCR检测Beclin1mRNA的表达水平。结果:DADS作用后的K562细胞后,透射电镜可观察到胞质内出现大量自噬体;MDC染色荧光显微镜观察显示,K562细胞胞浆中的自噬泡明显增多,而空白组与溶媒组胞浆中的自噬泡很少;流式细胞术定量测定空白对照组、溶媒对照组、DADS药物组自噬率分别为(7.27±5.60)%、(7.10±5.13)%、(27.39±6.51)%(P<0.05);空白对照组为0.658±0.007,溶媒对照组为0.671±0.012,两者的Beclin1mRNA的表达强度无明显差异(P>0.05),DADS药物组为0.911±0.008,高于对照组(P<0.05)。结论:二烯丙基二硫可诱导白血病k562细胞发生自噬性死亡,其机制可能与Beclin1的上调有关。 胡贤娇 殷小成 王萍 彭艳辉 罗永姣关键词:二烯丙基二硫 BECLIN1 自噬性死亡 紫外线抵抗相关基因在二烯丙基二硫诱导人白血病K562细胞自噬中的作用 被引量:3 2014年 目的观察紫外线抵抗相关基因(UVRAG)在二烯丙基二硫(DADS)诱导白血病K562细胞自噬中的作用。方法以K562细胞为细胞模型,利用透射电镜观察细胞的超微结构自噬体的形成;采用吖啶橙染色和荧光显微镜观察酸性囊泡的形成以检测DADS诱导K562细胞自噬;RT-PCR检测自噬相关基因UVRAG mRNA的表达水平。结果透射电镜显示:与空白组和溶媒组比较,DADS(40 mg·L-1)处理组可观察到胞质内出现大量自噬体。吖啶橙染色荧光显微镜下可见到各DADS处理组K562细胞胞浆中的酸性囊泡较空白组和溶媒组明显增多。RT-PCR结果显示,DADS作用K562细胞12 h后,各DADS处理组UVRAG mRNA表达水平均高于空白组和溶媒组。结论 DADS能诱导K562细胞自噬,其机制可能与上调UVRAG mRNA表达有关。 王萍 殷小成 彭艳辉 胡贤娇 杨云华关键词:二烯丙基二硫 K562细胞 自噬 二烯丙基二硫对K562细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响 彭艳辉文献传递 利妥昔单抗联合扶正解毒方治疗儿童原发性免疫性血小板减少症的疗效及对患儿Th17/Treg细胞比例的影响 被引量:1 2021年 探究利妥昔单抗联合扶正解毒方对儿童原发性免疫性血小板减少症(ITP)治疗效果及对患儿Th17/Treg细胞比例的影响。研究发现利妥昔单抗+扶正解毒方治疗儿童原发性ITP,可纠正其Th17/Treg细胞比例,强化免疫调节作用,改善患儿免疫功能。 黄建勤 周云 彭珍 彭艳辉 蔡清明 阳睿关键词:原发性免疫性血小板减少症 利妥昔单抗 扶正解毒方 二烯丙基二硫诱导人白血病K562细胞凋亡及其对Bax、Bag-1表达的影响 被引量:3 2012年 目的:探讨二烯丙基二硫(Diallyl disulfide)诱导白血病K562细胞凋亡的作用及其机制。方法:采用吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色法观察细胞凋亡形态学变化;DNA琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯度带;RT-PCR法检测BAG-1、BAX基因的mRNA表达变化。结果:DADS可诱导K562细胞凋亡。其对K562细胞的凋亡效用与药物浓度、有明显依赖关系;DNA琼脂糖凝胶电泳示:40mg/LDADS作用K562细胞48小时后能够产生明显的梯形电泳图谱(DNA ladder):DADS作用48h后,BAX mRNA表达水平较对照组上调;BAG-1 mRNA较对照组下调(差异具有统计学意义,P<0.05)。结论:DADS能够诱导K562细胞凋亡,其凋亡机制可能与上调BAX,下调BAG-1有关。 赵谦 殷小成 彭艳辉关键词:二烯丙基二硫 K562细胞 凋亡 DADS上调K562细胞p21^(WAF1)表达对细胞生长阻抑和凋亡的实验研究 被引量:1 2012年 目的:探讨二烯丙基二硫(DADS)对体外培养的人白血病细胞系K562细胞生长阻抑和凋亡作用及机制。方法:采用MTT分析法检测细胞活性、流式细胞术分析细胞周期及凋亡率、免疫组化检测p21WAF1基因表达。结果:1).DADS在10mg/L~80 mg/L范围内,对K562细胞的抑制作用呈剂量-时间依赖效应;2).不同浓度DADS作用于K562细胞24h后,细胞周期发生了变化:DADS可以将K562细胞阻滞于G2/M期;3).DADS浓度在10mg/L~80mg/L时作用K562细胞24h后,凋亡率逐渐升高,有显著的统计学意义(P<0.05或P<0.01);4).用浓度分别为0mg/L,20mg/L,40mg/L,80mg/L处理K562细胞24h后,p21WAF1蛋白表达上调,有统计学意义(P<0.05或P<0.01),溶媒组和阴性对照组无差别(P>0.05)。结论:DADS有抑制K562细胞增殖和促进K562细胞凋亡的作用。其作用的可能机制与上调细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p21WAF1表达,从而诱使k562细胞阻滞于G2/M期有关。 殷小成 肖正香 彭艳辉 赵谦 阳声芝 刘群策关键词:DADS K562细胞 EBV相关性噬血细胞综合征患儿外周血Th17与Treg细胞的变化及意义 被引量:1 2019年 目的探讨EB病毒感染相关性噬血细胞综合征(hemophagocytic syndrome,HPS)患儿治疗前后外周血调节性T细胞与辅助T细胞17(Th17)的变化在HPS发生及治疗中的临床意义。方法选择本院2015年9月至2017年12月62例确诊为EBV相关性HPS患儿为治疗组,同时选取60例健康体检儿童为健康对照组。诱导缓解8周后评估疗效,抽取清晨空腹外周血提取单个核细胞(PBMC),分别采用流式细胞术检测各组外周血CD4^+T细胞Th17细胞和Treg细胞百分率,实时RT-PCR技术检测Th17表达孤核受体(RORγt)mRNA及Foxp3mRNA的表达。结果治疗组外周血CD4^+T细胞Th17细胞百分比和孤核受体(RORγt)mRNA水平明显高于健康对照组(P<0.01,P<0.01);HPS初治组外周血CD4^+Treg细胞和Foxp3蛋白mRNA表达水平明显低于健康对照组(P<0.01,P<0.01)。且治疗缓解组外周血CD4^+T细胞Th17细胞及RORγtmRNA水平较初治组下降(P<0.01,P<0.01),而外周血CD4^+Treg细胞百分比及Foxp3mRNA表达水平较初治时上升(P<0.05,P<0.05),结论EBV相关性HPS的发生发展与Th17细胞及Treg细胞变化有关,推测了Th17/Treg失衡参与了EBV相关性HPS的疾病发生、发展过程,且监测Th17细胞与调节性T细胞数目的动态变化对于疾病的转归预估有重大意义。 彭艳辉 邓莉莉 周云关键词:噬血细胞综合征 EB病毒感染 噬血细胞综合征患儿外周血辅助T细胞17与调节性T细胞的变化 被引量:7 2014年 目的探讨外周血调节性T细胞与辅助T细胞17(Th17)在噬血细胞综合征(HPS)患儿中的动态演变。方法选择32例HPS患儿为HPS组及30例健康儿童为健康对照组。采用实时荧光RT-PCR和流式细胞术分别从mRNA与蛋白水平检测外周血CD4+T细胞IL-17和Foxp3的表达。结果 HPS组外周血CD4+T细胞IL-17蛋白及mRNA表达水平显著高于健康对照组(P<0.05,P<0.01);HPS组外周血CD4+T细胞Foxp3蛋白及mRNA表达水平显著低于健康对照组(P<0.05,P<0.01)。结论 Th17及调节性T细胞的失衡与HPS的发生发展密切相关。 彭艳辉 殷小成关键词:噬血细胞综合征 T淋巴细胞 儿童 脾氨肽对急性淋巴细胞白血病患儿维持治疗期间免疫功能的影响 被引量:5 2019年 目的分析脾氨肽口服冻干粉治疗急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿维持治疗期间(完全缓解期)的临床疗效,为临床治疗提供参考。方法选择2015年7月至2018年1月郴州市第一人民医院北院儿童血液科维持治疗期间(均采用CCLG-2008方案化疗,处于完全缓解期)的ALL患儿86例,采用简单随机法将患儿分为对照组及观察组,每组43例。对照组仅做维持治疗(主要药物甲氨蝶呤、巯嘌呤、地塞米松片),观察组除了维持治疗外,每日口服脾氨肽冻干粉,治疗3个月后评估疗效,并比较两组患儿平均感染次数、使用抗生素平均天数、平均白细胞水平、免疫球蛋白水平及T淋巴细胞亚群CD4^+、CD8^+、CD4^+/CD8^+的变化。结果研究期间,观察组患儿感染例次为(1.67±0.78)次,较对照组的(2.67±1.06)次明显减少,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患儿使用抗生素的平均天数为(9.83±4.54) d,较对照组的(15.93±6.42) d明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患儿的平均白细胞水平为(3.31±0.66)×10~9/L,较对照组的(2.01±0.54)×10~9/L明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组患儿的IgG和IgA水平分别为(7.3±1.4) g/L和(2.6±0.5) g/L,均明显高于对照组的(5.6±1.3) g/L和(1.6±0.4) g/L,差异均有统计学意义(P<0.05),但IgM水平两组比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组患儿的CD4^+百分比和CD4^+/CD8^+比值分别为(42.55±4.65)%和1.70±0.32,均明显高于对照组的(34.18±1.22)%和0.89±0.20,而CD8^+数值为(31.23±4.55)%,明显低于对照组的(41.54±6.75)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论脾氨肽口服冻干粉辅助治疗可有效降低ALL患儿治疗期间感染次数,改善T淋巴细胞亚群构成,刺激骨髓增殖,减轻骨髓抑制程度,提高免疫功能,从而改善患儿的生活质量。 彭艳辉 邓莉莉 周云 彭珍 黄建勤关键词:脾氨肽 急性淋巴细胞白血病 免疫调节 白血病