宫庆龙
- 作品数：11 被引量：25H指数：3
- 供职机构：吉林农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金吉林省教育厅科研项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 水貂阿留申病病毒研究进展
- 2023年
- 水貂阿留申病(Aleutian mink disease,AMD)是由水貂阿留申病病毒(Aleutian mink disease virus,AMDV)引起的水貂的重要传染性疾病之一,深入开展对AMDV的研究对于该病的防控有重要意义。AMDV基因组全长约为4.8 kb,主要编码2种结构蛋白和3种非结构蛋白,它们在病毒复制、增殖及致病过程中发挥重要作用。AMDV的复制依赖于代谢活跃的细胞,对于幼貂,病毒感染肺泡Ⅱ型细胞会造成急性致死性肺炎,感染巨噬细胞则会引起成年水貂患高丙种球蛋白血症和免疫复合物介导的肾小球肾炎等慢性进行性疾病。笔者从AMDV侵入细胞的受体途径、诱导细胞凋亡途径及病毒复制等方面对其致病机理进行阐述。AMDV在全世界范围内广泛流行,现有的检测方法主要分为血清学诊断方法和分子生物学诊断方法。目前,尚未开发出安全有效的针对AMDV的商品化疫苗,随着生物学技术的快速发展,在灭活疫苗、DNA疫苗和亚单位疫苗的研制上有所进展;抗病毒的新方法,如筛选AMDV耐受貂,提高水貂免疫力和靶向适配体技术为AMD的防控提供了新思路。文章从AMDV编码蛋白功能、病毒细胞嗜性与复制、临床表现与致病机制、诊断方法及防治措施等方面对近年来国内外AMDV的研究进展进行总结,旨在为AMDV安全有效疫苗和防治药物的研发提供参考。
- 汪婷婷马青霞刘宏莹许立慧刘莹玉宫庆龙李健明时坤冷雪杜锐
- 关键词：细胞嗜性致病机制
- 水貂阿留申病毒研究进展被引量：1
- 2020年
- 水貂阿留申病(Aleutian mink disease,AMD)是由水貂阿留申病毒(Aleutian mink disease virus,AMDV)引起的一种慢性、进行性传染病,是危害世界养貂业的重要疫病之一。由于AMDV具有抗体依赖性增强作用和特殊的致病机制,目前尚未开发出有效的疫苗。本文从AMDV的起源、遗传进化、宿主范围、传播途径和病毒的复制机制等几方面对AMDV的研究现状进行探讨,为今后AMD的致病机制及防控的研究提供参考。
- 葛桂阳李东丽徐宁栾美慧郜艳雪刘艺宫庆龙麻宝艺盛陈艳孙志博冷雪杜锐
- 关键词：细小病毒水貂阿留申病毒遗传进化
- 血吸虫成虫抗宿主凝血机制研究进展被引量：2
- 2016年
- 血吸虫对宿主初级凝血、次级凝血、血管内皮功能存在干扰作用,对纤维蛋白溶解存在刺激活化作用,说明血吸虫的寄生伴随着复杂的抗凝血机制。本文介绍了国内外有关血吸虫抗宿主凝血机制研究方面的进展,为血吸虫抗体药物及新型生物学抗血栓药物或溶栓药物的研究提供理论依据。
- 宫庆龙王春凤杨桂连
- 关键词：血吸虫抗凝血血小板纤维蛋白溶解
- CRISPR/Cas9技术在动物病毒和疫苗研究中的应用
- 2023年
- CRISPR/Cas9技术是一种用于基因编辑和基因修饰的生物技术,旨在精确地修改目标基因组。作为第3代基因编辑技术之一,CRISPR/Cas9技术具有许多优势,如成本低、效率高和操作简单等。目前,CRISPR/Cas9技术在病毒学领域被广泛应用,可用于了解病毒的发病机制和基因治疗等。综述CRISPR/Cas9技术及其在动物病毒学研究和疫苗开发中的应用,并探讨基于CRISPR/Cas9的基因编辑技术的未来前景和局限性,为动物病毒学研究和疫苗的开发提供新的思路和方向。
- 许立慧刘莹玉崔珍珍范新莹胡婷婷王晓琳梁健宫庆龙李健明李健明冷雪时坤
- 关键词：动物病毒疫苗
- 猪伪狂犬病病毒变异株在国内的研究进展被引量：13
- 2020年
- 猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)引起的猪病毒性传染病。免疫接种疫苗是防控伪狂犬病的有效途径之一,但是近年来在我国很多地区的伪狂犬病疫苗免疫猪群中接连暴发了新的伪狂犬病疫情,主要原因是由于伪狂犬病病毒发生了新的变异,新的PRV流行变异株与传统的PRV相比抗原性已发生较大变化。本文从PRV的特征、PRV变异株流行情况、PRV变异株主要毒力蛋白及其遗传变异、PRV变异株疫苗的研制及PRV感染的防控等方面进行阐述,旨在为PRV流行变异株的防控提供参考。
- 徐宁栾美慧郜艳雪葛桂阳李东丽刘艺宫庆龙冷雪杜锐
- 关键词：猪伪狂犬病病毒变异株疫苗
- 猪伪狂犬病毒的分离鉴定及其部分毒力基因序列遗传变异分析被引量：4
- 2021年
- 为了解吉林省猪伪狂犬病毒(PRV)的遗传变异情况,本研究将采集自吉林省疑似发生猪伪狂犬病的临床样品,通过细胞传代、PCR检测和测序分析进行病毒分离鉴定。TCID50法测定分离毒株的病毒滴度,通过家兔感染试验测定分离毒株对家兔的致病性。对TK、gB、gC、gD和gE基因进行PCR扩增和测序,分析其遗传变异情况。结果表明,临床样品经PK15细胞传代后,有3份样品出现细胞病变,经PCR鉴定和测序分析表明,分离获得3株PRV,分别命名为PRV JL03、JL12和JL15株。通过PK15细胞测定分离毒株的病毒滴度分别为10^(6.5)、10^(6.5)和10^(7.5)TCID50/mL。6只家兔分别接种3株分离毒株(10^(3.5)TCID50/只)后均表现为体温升高、注射部位奇痒和四肢麻痹等症状,且于病毒接种后3~4 d全部死亡。3株分离病毒TK、gB、gC、gD和gE基因推导氨基酸序列分析结果表明,与参考毒株相比,分离株TK基因未发生氨基酸变异;gB、gC、gD和gE基因部分位点发生氨基酸缺失、插入或突变,其中gE基因在第48和496位分别存在1个天冬氨酸的插入,与国内报道的流行毒株变异特征一致。遗传进化树分析结果表明,3株分离毒株TK、gB、gC、gD和gE基因与国内2012年以后分离的参考毒株JS-2012和ZJ01等的上述基因均表现出较高的同源性,说明毒株间亲缘关系较近,位于同一分支;与国外分离毒株NIA3和Becker等亲缘关系较远,位于不同的分支;而与国内早期流行的毒株SC和Ea等亲缘关系介于二者之间。本研究成功分离鉴定了3株PRV变异株,分离毒株对家兔具有较强的致病性,该结果为吉林省PRV流行病学研究提供了新的数据,并为相关后续研究奠定基础。
- 徐宁葛桂阳李东丽刘艺宫庆龙麻宝艺盛陈艳时坤李健明冷雪杜锐
- 关键词：猪伪狂犬病毒遗传变异分析
- 水貂阿留申病毒感染过程中主要分子蛋白作用机理研究进展
- 2019年
- 水貂阿留申病(Aleutian mink disease,AMD)是由AMD病毒(AMDV)感染水貂引起的自身免疫系统功能紊乱,并引发自身免疫的慢性、传染性疾病,在全球范围的水貂养殖国家造成了重大的经济损失[1-2]。由于其特殊的致病机制和抗体依赖性增强作用(ADE)[3-4],尚无预防该病的商业疫苗。目前主要通过检疫淘汰病貂来净化貂厂,但该方法无法从根本上杜绝该病的发生发展。因此国内外对AMDV致病机制进行了大量研究,结果表明AMDV中参与ADE的结构蛋白、负责调控病毒复制的非结构蛋白及宿主的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspases)在致病机制中具有重要作用。本文对AMDV感染过程中各主要分子蛋白的相关调控进行阐述,以期为AMDV的致病机理以及进一步研究和防治AMD奠定理论基础。
- 栾美慧李健明时坤刘艺徐宁郜艳雪宫庆龙孙志博冷雪杜锐
- 关键词：水貂阿留申病毒非结构蛋白致病机制自身免疫病毒复制水貂养殖
- 水貂圆环病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用
- 2024年
- 为快速检测水貂圆环病毒(MiCV),本试验根据MiCV Cap基因序列设计合成特异性引物,建立了水貂圆环病毒SYBR Green II实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法在模板浓度为1.0×10^(6)~1.0×10^(1) copies/μL范围内呈良好线性关系,相关系数为0.9983。本试验建立的检测方法对水貂阿留申病毒、猪圆环病毒2型、水貂肠炎病毒、犬瘟热病毒和猪伪狂犬病毒进行检测均无特异性扩增,批内和批间CV均小于2%,对重组阳性质粒的检测下限为1.0×10^(1) copies/μL,比普通PCR的敏感度高100倍,对阳性样品DNA的检测下限为2.38×10^(-2) pg/μL,比普通PCR的敏感度高1000倍。应用该方法对吉林省部分毛皮动物养殖场的水貂、狐狸、貉和环境样品进行检测,结果其阳性率分别为57.23%、48.42%、39.71%和68.48%。上述结果表明,本研究建立的实时荧光定量PCR检测方法具有良好的灵敏性、特异性和重复性,为MiCV的诊断及流行病学调查提供技术支持。
- 盛陈艳麻宝艺李健明宫庆龙刘菲时坤孙志博刘艺冷雪杜锐
- 水貂阿留申病毒诱导CrFK细胞凋亡信号通路的研究被引量：3
- 2021年
- 本实验室前期研究表明水貂阿留申病毒(AMDV)G株感染猫肾细胞(CrFK)可以引起其凋亡,为研究AMDV在体外通过何种途径诱导CrFK细胞的凋亡,本实验采用MOI 1的AMDV G株感染CrFK细胞,于感染后不同时间(2 h、12 h、24 h、36 h、48 h和60 h,下同)通过分光光度法检测试剂盒检测Caspase-8、Caspase-9的活性;利用western blot检测Caspase-8和Caspase-9蛋白的表达情况。采用Caspase-8和Caspase-9抑制剂处理CrFK细胞后感染AMDV G株,于不同时间检测Caspase-3的活性。于AMDV G株感染CrFK细胞后不同时间,利用荧光定量PCR检测细胞中死亡受体通路分子Caspase-8、Fas、FasL和线粒体通路分子Caspase-9、Bax、Bcl-2、Cyt C以及凋亡执行因子Caspase-3的mRNA转录水平;采用JC-10线粒体膜电位试剂盒检测各时间点细胞线粒体膜电位的去极化情况。结果显示,AMDV G株感染CrFK细胞后不同时间Caspase-8的活性均无明显变化,而Caspase-9的活性则随感染时间的延长而明显增强;western blot结果显示,Caspase-8蛋白的表达不受影响,而Caspase-9在AMDV感染后12 h被切割活化。Caspase-3活性的检测结果显示,抑制CrFK细胞中Caspase-8的活性后再感染AMDV,Caspase-3的活性逐渐增强,而抑制细胞中Caspase-9的活性后再感染AMDV,则Caspase-3的活性无明显变化,即抑制了Caspase-9再感染AMDV并不能诱导细胞凋亡;荧光定量PCR结果显示,AMDV感染CrFK细胞后不同时间Caspase-8、Fas、FasL基因的转录水平均无明显变化,而Caspase-9、Caspase-3、Cyt C基因mRNA转录水平及Bax/Bcl-2的比值则随感染时间的延长而逐渐升高。线粒体膜电位结果显示,AMDV感染的CrFK细胞线粒体膜电位下降,发生了明显去极化现象,表现为细胞发生了凋亡。综上,本研究首次证实AMDV G株感染CrFK细胞后激活了线粒体途径的细胞凋亡执行分子Caspase-3及线粒体通路相关基因Bax、Bcl-2、Caspase-9和Cyt C,并未激活死亡受体通路相关分子,AMDV G株是通�
- 葛桂阳栾美慧宫庆龙刘艺李东丽麻宝艺盛陈艳时坤李健明冷雪杜锐
- 关键词：水貂阿留申病毒凋亡信号通路
- 中药有效成分对动物疫苗的免疫佐剂效果及相关机理研究进展被引量：3
- 2023年
- 佐剂作为疫苗的重要组成部分,其自身的安全性及对疫苗的免疫增强效果受到广泛重视。动物疫苗佐剂种类较多,包括铝佐剂、油乳佐剂和脂质体佐剂等。但由于可应用的佐剂有限,疫苗的需求量增大,因此寻求更加安全有效的疫苗佐剂成为新的研究热潮。中药具有易获取、毒性低和免疫活性强等特点,有潜力成为新型疫苗佐剂。笔者对中药有效成分的佐剂活性、联合疫苗后的免疫调节效果及作用机制进行综述,阐明中药有效成分作为动物疫苗佐剂的可能性及研究进展,为新型佐剂的研制提供理论依据。
- 刘宏莹王婧瑜崔珍珍马青霞汪婷婷李健明时坤时坤杜锐宫庆龙
- 关键词：中药动物疫苗佐剂
