李婷
- 作品数：8 被引量：22H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学检验医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 过表达HepaCAM联合谷氨酰胺剥夺抑制前列腺癌细胞的增殖
- 2020年
- 该研究旨在探讨过表达肝细胞黏附分子(hepatocyte cell adhesion molecule,HepaCAM)联合谷氨酰胺(glutamine,Gln)剥夺对前列腺癌(prostae cancer,PCa)细胞谷氨酰胺代谢及增殖的影响。采用Ad-HepaCAM腺病毒感染前列腺癌细胞株PC3、LNCaP。克隆形成实验及MTT实验检测细胞的克隆形成率及增殖活性。qRT-PCR、Western blot分别检测PC3、LNCaP细胞中谷氨酰胺酶(glutaminase,GLS)、溶质载体家族I成员V(solute carrier family 1 member 5,SLC1A5)、MYC癌基因家族(可编码c-MYC蛋白分子)以及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达情况。结果显示,单独过表达HepaCAM与剥夺Gln均可抑制PC3、LNCaP细胞的增殖能力,两者联用效果更佳。qRT-PCR和Western blot显示,与对照组(+Gln组)相比,剥夺谷氨酰胺组(-Gln组)细胞中的GLS、SLC1A5、MYC表达呈应激抵抗式上调,过表达HepaCAM后上述基因表达重新受到抑制。该实验证明,过表达HepaCAM与Gln剥夺联用可更显著地抑制前列腺癌的增殖能力,同时,过表达HepaCAM可在一定程度上抑制前列腺癌细胞的谷氨酰胺代谢重编程。
- 何镇廷李婷范佳鑫袁鸿玲郑永波吴小候罗春丽
- 关键词：前列腺癌增殖
- miR-29c促进前列腺癌PC3细胞凋亡被引量：5
- 2017年
- 目的研究miR-29c对前列腺癌PC3细胞凋亡的影响及其机制。方法以人正常前列腺上皮细胞系(RWPE-1)为对照,检测前列腺癌PC3细胞系中miR-29c、血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)的表达;免疫荧光(IF)检测p-VEGFR2在细胞中的定位;miR-29c过表达腺病毒感染PC3,real-time PCR检测miR-29c及VEGF的表达;Western blot检测VEGF、t-VEGFR2、p-VEGFR2、BAX和Bcl-2的表达;hoechst 33258染色法检测PC3细胞凋亡;流式细胞计量术(FCM)检测PC3细胞早期凋亡率。结果与RWPE-1相比,PC3细胞miR-29c表达降低,VEGF及VEGFR2表达升高(P<0.001);与对照组相比,miR-29c过表达组VEGF、p-VEGFR2及Bcl-2的表达显著降低(P<0.001),BAX的表达显著升高(P<0.001),细胞凋亡与早期凋亡率显著增加(P<0.001)。结论重新表达miR-29c可以显著抑制VEGF/VEGFR2信号通路并促进PC3细胞凋亡。
- 刘南京李婷赵燕郝燕妮吴小候罗春丽
- 关键词：前列腺癌血管内皮生长因子血管内皮生长因子受体细胞凋亡
- HepaCAM联合藏红花素抑制前列腺癌细胞PC3迁移活性的研究被引量：3
- 2018年
- 为研究肝细胞黏附分子（hepatocyte cell adhesion molecule,hepa CAM）联合藏红花素（crocin）对前列腺癌（prostate cancer,PCa）细胞PC3上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）及侵袭转移的影响,采用细胞免疫荧光观察迁移相关蛋白的表达情况;划痕实验检测细胞侵袭转移能力;Transwell实验检测细胞体外迁移能力;实时荧光定量PCR、Western blotting检测EMT相关分子及基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase 2,MMP-2）和MMP-9的表达变化。实验显示,hepaCAM过表达腺病毒与藏红花素均可有效抑制PC3细胞的侵袭转移（p〈0.01）,两者联用比单独应用效果更加明显（p〈0.01）。Q-PCR显示,过表达hepaCAM联合藏红花素组与单独处理组相比,MMP-2、MMP-9及波形蛋白（vimentin,VIM）mRNA表达水平下调更显著（p〈0.01）;E-钙粘蛋白（E-cadherin,E-CA）m RNA水平上调更加明显（p〈0.01）。Western blotting显示,与过表达hepa CAM组或藏红花素组相比,两者联用组MMP-2、MMP-9、VIM蛋白表达量明显降低（p〈0.01）,同时E-CA蛋白水平上调更加明显（p〈0.01）。因此得出以下结论,hepaCAM过表达腺病毒联合藏红花素可显著抑制PC3细胞的侵袭转移,作用机制或与EMT和MMPs的表达有关。
- 李婷吕长坤刘南京郝燕妮吴小候罗春丽
- 关键词：藏红花素前列腺癌
- Sh-PLCε提高IL-2治疗肾癌疗效的研究被引量：1
- 2019年
- 该实验旨在探讨磷脂酰肌醇特异性磷脂酶Cε(phospholipase Cε,PLCε)是否在白介素2(interleukin 2,IL-2)治疗肾癌的过程中发挥一定的作用。采用sh-PLCε慢病毒转染肾癌细胞株786-o。MTT法检测IL-2处理肾癌细胞最适浓度,使用最适浓度IL-2处理细胞。流式细胞术检测细胞凋亡。DAPI染色观察细胞中凋亡小体。q-PCR、Western blot检测Fas/FasL以及Fas下游相关分子在基因水平以及蛋白水平的表达变化。将肿瘤细胞与淋巴细胞进行共培养,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果显示,敲低PLCε后,Fas/FasL表达降低,而IL-2处理后,会逆转这种效果。检测Fas下游相关通路后发现,IL-2处理阴性对照(negative control,NC)组后,Fas下游凋亡抑制信号通路FADD/cFlip/Traf2启动,IL-2处理sh-PLCε组后,Fas下游凋亡信号通路FADD/Caspase8/Caspase3启动。共培养实验后流式细胞术结果显示,IL-2处理与sh-PLCε联用组细胞凋亡比例最高。该实验证明,sh-PLCε可以通过启动Fas下游凋亡信号通路,抑制凋亡抑制信号通路来提高IL-2治疗肾癌的疗效。
- 杨锦潇段李梅范佳鑫李婷范砚茹袁鸿玲吴小侯罗春丽
- 关键词：肾癌FAS/FASLIL-2免疫逃逸
- shPLCε通过下调CDC25A抑制T24细胞的瓦伯格效应被引量：4
- 2018年
- 目的：探讨shPLCε对膀胱癌T24细胞瓦伯格效应的影响及其相关机制。方法：（1）慢病毒感染T24细胞,葡萄糖测定试剂盒和乳酸测试盒分别检测细胞葡萄糖利用和乳酸生成情况;q-PCR、Western blot分别检测PLCε、CDC25A及瓦伯格效应相关分子的表达。（2）转染sh CDC25A质粒,q-PCR、Western blot检测CDC25A的表达;Western blot检测瓦伯格效应相关分子的表达情况。结果：（1）慢病毒干扰PLCε后,T24细胞利用葡萄糖和生成乳酸的能力降低,同时下调CDC25A、PKM2、GLUT1、LDHA的表达。（2）干扰CDC25A的表达后可抑制PKM2、GLUT1、LDHA的表达。结论：shPLCε通过下调关键分子CDC25A的表达抑制膀胱癌T24细胞的瓦伯格效应,从而为膀胱癌的治疗提供了新思路。
- 郝燕妮李婷范佳鑫李罗牛凌芳欧俐苹吴小候罗春丽
- 关键词：CDC25A膀胱癌
- 急性脑梗死患者血清排斥性导向分子a与软脑膜侧支状态不良的关系被引量：1
- 2022年
- 目的:研究急性脑梗死患者血清排斥性导向分子a(repulsive guidance molecule a,RGMa)与软脑膜侧支状态的关系。方法:纳入急性大脑中动脉闭塞性缺血性卒中患者96例,同时纳入健康对照者33例。根据区域软脑膜侧支循环评分将患者分为软脑膜侧支循环状态(leptomeningeal collateral status,LMCs)不良组和LMCs良好组。酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清RGMa水平。多因素logistic回归分析患者发生LMCs不良的独立预测因子,受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC曲线)分析RGMa预测LMCs的准确性。结果:LMCs不良的患者血清RGMa水平[5588.8(4247.9,10311.5)pg/mL]较LMCs良好组[3103.9(2096.5,3970.2)pg/mL]及健康对照组[3528.6(2801.2,5328.5)pg/mL]明显升高(均P<0.05)。ROC曲线分析RGMa蛋白预测LMCs不良的最佳切点为4197.745 pg/mL,灵敏度和特异度分别为76.5%和80.0%。logistic回归分析示RGMa蛋白≥4197.745 pg/mL是软脑膜侧支受损的独立预测因子(OR=0.119,95%CI=0.030~0.469,P=0.002)。结论:血清RGMa水平是急性脑梗死发生LMCs不良的独立预测因子。
- 吴绮思李婷张磊秦新月
- miR-145通过下调PLCε抑制膀胱癌EMT和迁移及其机制研究被引量：10
- 2017年
- 目的:探讨miR-145调控PLCε对膀胱癌细胞T24上皮间质转化(EMT)和迁移的影响及可能的分子机制。方法:(1)腺病毒感染T24细胞,划痕实验和Transwell检测细胞的迁移能力;RTPCR、Western blot分别检测PLCε及EMT相关分子的表达;为探究其分子机制,Western blot检测GSK-3β磷酸化(Ser9位点)和Snail的表达情况。(2)利用生物信息学技术预测可能调控PLCε的miRNA,结合文献报道的膀胱癌microRNA表达谱结果筛选出miR-145;转染miR-145 mimics至T24,q PCR检测miR-145、PLCε的表达,Western blot检测PLCε的表达。(3)转染miR-145 mimics,Western blot检测EMT相关分子及p-GSK-3β、Snail;划痕实验、Transwell检测过表达miR-145后细胞的迁移能力。结果:(1)干扰PLCε表达能显著抑制细胞的迁移,同时,使T24细胞中E-cadherin表达上调,N-cadherin和Vimentin表达下调;干扰PLCε后,GSK-3β磷酸化(Ser9位点)水平下降,Snail表达降低。(2)转染miR-145 mimics可使T24细胞中miR-145表达增高,且明显抑制T24细胞中PLCε的表达。(3)在T24中过表达miR-145,细胞迁移能力显著下降,EMT标志分子的表达情况与沉默PLCε结果一致。同时,与阴性对照组相比,转染miR-145 mimics组p-GSK-3β和Snail表达显著减少。结论:PLCε通过GSK-3β/Snail信号通路促进膀胱癌细胞T24发生EMT及迁移,miR-145可以逆转PLCε诱导膀胱癌EMT的发生,从而阻止膀胱癌细胞的迁移。
- 赵燕郝燕妮刘南京李婷吴小候罗春丽
- 关键词：MIR-145膀胱癌上皮间质转化迁移
- PLCε通过GLS/p-mTOR途径促进膀胱癌细胞T24生存
- 2020年
- 谷氨酰胺对于细胞的代谢和生长十分重要,也是血液中含量最丰富的氨基酸,且肿瘤的代谢特征之一就是谷氨酰胺成瘾。该研究探讨磷脂酰肌醇特异性磷脂酶PLC epsilon(phospholipase C epsilon,PLCε)是否通过谷氨酰胺酶(glutaminase,GLS),调节膀胱癌细胞T24自噬,促进膀胱癌细胞生存。首先通过数据库Su Multi-cancer Statistics、Sanchez-Carbayo Bladder 2和细胞实验分析PLCε在膀胱癌中表达情况。结果表明,PLCε在膀胱癌中高表达。并通过LV-shPLCε转染膀胱癌细胞T24后,q-PCR和Western blot检测PLCε在膀胱癌细胞T24中的表达情况以及对凋亡和自噬的影响,同时免疫荧光检测细胞内自噬斑点(LC3)的变化。结果显示,敲低PLCε后,Caspase-3/Caspase-8/LC3-Ⅱ表达增加,p62表达降低;流式细胞术结果显示凋亡率增高;免疫荧光发现自噬斑点LC3均增多;GLS和p-mTOR的表达受到抑制。在shPLCε组中添加过表达GLS质粒后,p-mTOR和p62表达增加,LC3-Ⅱ表达降低并且免疫荧光自噬斑点LC3减少;加入敲低GLS质粒后出现相反结果。该研究得出,PLCε通过GLS/p-mTOR抑制膀胱癌细胞T24自噬,促进膀胱癌细胞T24的生存。
- 袁鸿玲范佳鑫杨锦潇李婷何镇廷吴小候陈琪欧俐苹罗春丽
- 关键词：膀胱癌自噬
