周蕊
- 作品数:4 被引量:19H指数:2
- 供职机构:武汉大学基础医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- KSRP对肝癌HepG2细胞增殖、周期及凋亡的影响被引量:1
- 2022年
- 目的探讨KH型剪接调控蛋白(KSRP)对肝细胞癌(HCC)HepG2细胞增殖、周期以及凋亡的影响。方法使用GEO数据库探讨HCC患者的肿瘤组织及癌旁组织中KSRP的表达水平。实验分为3组:对照组、过表达组KSRP及敲低组shKSRP,使用慢病毒敲低或过表达KSRP,通过嘌呤霉素筛选敲低或过表达KSRP的稳定表达HepG2细胞系,Western blot检测HepG2中KSRP蛋白的表达水平;CCK-8法检测24h、48h、72h和96h时各组HepG2细胞增值率;采用流式细胞术和RNA-seq分别检测shKSRP以及对照组的HepG2细胞周期和抗原KI-67(MKI67)的表达;Annexin V-FITC/PI双染法检测shKSRP以及对照组的HepG2细胞凋亡情况。结果HCC患者癌组织中KSRP表达较癌旁组织升高(P<0.001);CCK-8法结果表明,敲低KSRP的HepG2细胞增殖明显减慢(P<0.01)。RNA-seq显示,KSRP敲低后可抑制MKI67基因的表达(P<0.05)。流式细胞术检测,KSRP敲低后,将HepG2细胞阻滞于S期(细胞周期),并可促使其凋亡,其凋亡率差异有统计学意义(P<0.05)。结论敲低KSRP可将HepG2细胞阻滞于S期,抑制细胞增殖,促进凋亡,这可能和下调KSRP与增殖相关基因MKI67的表达密切相关。
- 邱靓琳瞿利花单士刚李明轩周蕊
- 关键词:细胞周期细胞增殖
- 武汉市腹泻婴幼儿隐孢子虫感染的分子流行病学调查被引量:9
- 2017年
- 目的了解武汉市2岁以下婴幼儿腹泻患者的隐孢子虫感染状况,为预防隐孢子虫感染提供分子流行病学依据。方法采集2014年8月—2015年7月在湖北省人民医院和武汉大学中南医院就诊的2岁以下婴幼儿腹泻患者粪便,过滤沉淀后于2.5%重铬酸钾溶液中4℃保存;采用酚-氯仿法提取基因组DNA、18S rRNA巢式PCR(Nested-PCR)扩增技术检测隐孢子虫感染,并对阳性PCR产物测序;所获序列进行Blastn比对,应用MEGA软件采用邻接法构建系统进化树进行虫种鉴定。结果共收集到298份婴幼儿腹泻患者的粪便样本。经巢式PCR扩增技术检测,298份样品中有9份扩增出隐孢子虫阳性条带,阳性率为3.02%(9/298),其中1~2岁腹泻幼儿阳性率为5.93%(7/118),<1岁患儿的阳性率为1.11%(2/180),差异有统计学意义(χ~2=4.13,P<0.05)。9份阳性PCR产物经测序后与Gen Bank中的参照序列进行比对,结果显示7份样本为微小隐孢子虫感染,2份样本为微小隐孢子虫与人隐孢子虫混合感染。绘制种系发育进化树发现,9条SSU r RNA基因序列与已发表的微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)位于同一个进化支上。结论武汉地区婴幼儿腹泻患者中存在隐孢子虫感染,主要感染虫种为微小隐孢子虫。
- 刘晓洁毛铁波吴鹏周蕊
- 关键词:微小隐孢子虫婴幼儿腹泻巢式PCR分子流行病学
- 日本血吸虫可溶性虫卵抗原诱导肝纤维化相关miRNA的变化被引量:8
- 2017年
- 目的研究与肝纤维化相关miRNA(miR)在日本血吸虫可溶性虫卵抗原刺激小鼠肝细胞(AML12)后的表达情况,为阐明血吸虫感染导致肝纤维化的机制奠定基础。方法使用日本血吸虫可溶性虫卵抗原(Soluble egg antigens,SEA)刺激AML12后,采用定量PCR检测AML12中的miR-122、miR-182、miR-23b、miR-27b及KH型剪切调控蛋白(KHtype splicing regulatory protein,KSRP)的m NA水平,以Western blotting检测KSRP蛋白的表达变化;分别用anti-miR-27b、miR-27b precursor转染AML12后,以定量PCR和Western blotting检测AML12中KSRP的m NA和蛋白水平。结果经SEA刺激后,AML12中miR-182、miR-23b及miR-27b m RNA水平下降(P均<0.05),而细胞中miR-122 m RNA与KSRP的m RNA水平及蛋白表达水平均上调(P均<0.05)。此外,anti-miR-27b与miR-27b precursor转染组KSRP的m RNA水平均无明显变化,但anti-miR-27b组细胞中KSRP的蛋白表达增加,miR-27b precursor组KSRP的蛋白表达降低。结论SEA刺激AML12导致诸多与肝纤维化相关的miRNA及KSRP的表达发生变化,其中miR-27b可调控KSRP的表达,这为进一步研究血吸虫感染导致的肝纤维化的分子机制奠定了基础。
- 王欢卢雅静高彦茹王舒弘周蕊董惠芬
- 关键词:日本血吸虫肝纤维化MIRNA可溶性虫卵抗原肝细胞
- 固有免疫在微小隐孢子虫感染中的作用被引量:1
- 2017年
- 微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)是引起人类尤其是2岁以下婴幼儿腹泻的重要病原体。由于该病原体具有"微创"的特性,上皮细胞作为固有免疫的第一道屏障,在抵抗微小隐孢子虫感染中发挥着重要的作用。本文从上皮细胞分泌的效应分子、模式识别受体的激活、miRNA的调节、外泌体的释放以及补体系统等几个方面进行综述,以阐明固有免疫在抵抗微小隐孢子虫感染中的作用机制。
- 刘晓洁毛铁波周蕊
- 关键词:微小隐孢子虫上皮细胞固有免疫NF-ΚB信号通路