高灿灿
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 供职机构：南京农业大学食品科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 检测乙酰微小杆菌的双重实时荧光定量聚合酶链式反应方法的建立被引量：2
- 2017年
- 以鲜切叶菜中的乙酰微小杆菌(Exiguobacterium acetylicum)为研究对象,建立定量检测E.acetylicum的双重实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)方法。以前期试验发掘到的微小杆菌(Exiguobacterium sp.)的特异性基因P401_RS0117025和E.acetylicum的特异性基因oxi_50582462为检测靶点,对其设计特异性探针,并对反应体系进行优化,以12株E.acetylicum为阳性对照,以4株微小杆菌属内其他种的菌株以及10株非微小杆菌的腐败菌/致病菌作为阴性对照,对建立的RT-PCR进行特异性检测;通过标准曲线的制备、灵敏度、可重复性来评价该方法的有效性。最后,应用该RT-PCR方法对不同贮藏日期鲜切叶菜中的E.acetylicum进行检测。结果表明:本研究设计的探针特异性良好;检测靶点P401_RS0117025与oxi_50582462的标准曲线的R2值分别为0.994和0.999,且重复性好;该方法的DNA检测限为1.629×10^(-7)ng/μL,纯菌菌落检测限为3.4 CFU/m L,并能对鲜切叶菜中的E.acetylicum进行灵敏检测。此外,还建立了"Ct(阈值)-Nt(菌体浓度)"的数量关系,能对供试样品中的E.acetylicum进行绝对定量。总之,本研究建立了准确、灵敏、高效检测食品中腐败菌E.acetylicum的RT-PCR定量方法,为食品货架期预测提供了理论依据。
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- 关键词：TAQMAN探针
- 鲜切小白菜和生菜不同贮藏温度下货架期预测模型的建立被引量：9
- 2016年
- 为研究鲜切小白菜和鲜切生菜在贮藏期间的品质变化,并预测其货架期,本文以鲜切小白菜和鲜切生菜为研究对象,对其贮藏期间的感官品质、细菌总数和大肠菌群数变化进行研究,并以细菌总数为自变量对低温与室温下鲜切小白菜和生菜货架期预测模型进行拟合。结果显示,在4℃与25℃下贮藏时间分别为10 d与3 d时,两种蔬菜的感官评价均大于5分,超过了消费者接受范围,细菌总数和大肠菌群数也在该贮藏时间时超出了标准规定范围,得出鲜切小白菜和鲜切生菜在4℃与25℃下的货架期终点分别为10 d与3 d;低温与室温下鲜切小白菜和鲜切生菜货架期预测模型拟合结果分别为:SL_(4℃)=ln{ln[5.096/(N_1-1.990)]}-1/0.279+7.452和SL_(25℃)=ln{ln[3.621/(N_1-3.651)]}-1/1.124+1.512;两个预测模型的偏差因子分别为0.979和1.001,准确因子分别为1.050和1.040,表明所建立的模型是有效的。
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- 关键词：鲜切生菜
- 食源性致病菌分子检测、生物膜控制及食品应用研究
- 食源性致病细菌是导致食源性疾病的首要原因,其中Salmonella、Escherichia coli O157∶H7和Listeria monocytogenes等是近年来引起食物中毒的主要致病菌,因此,建立致病菌快速检...
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