朱少明 作品数:9 被引量:60 H指数:5 供职机构: 武汉大学人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
精索静脉曲张大鼠睾丸自噬对生精细胞的影响 被引量:6 2020年 目的:研究精索静脉曲张(VC)大鼠模型中睾丸不同水平自噬对生精细胞凋亡的影响. 方法:雄性SD大鼠54只随机分为6组:空白对照组、雷帕霉素对照组、氯喹对照组各6只,VC组、VC+雷帕霉素组、VC+氯喹组各12只.采用HE染色观察睾丸、附睾组织形态学变化,并对睾丸及附睾中精子形成情况进行评分,TUNEL染色检测生精细胞凋亡指数(AI),Western印迹检测LC3、p62、Bax、Bcl-2的表达. 结果:空白对照组、雷帕霉素对照组、氯喹对照组大鼠睾丸及附睾组织均未发生明显形态学变化,精子形成情况评分及AI亦无显著差异(P>0.05);VC组大鼠睾丸及附睾组织发生明显病理损伤,精子形成情况评分显著降低(P<0.01),AI显著升高(P<0.01),但VC+雷帕霉素组较VC组明显改善,而VC+氯喹组较VC组轻度加重.此外,与空白对照组比较,VC组自噬相关蛋白LC3(包括LC3-Ⅱ/LC3-I的比值)和促凋亡蛋白Bax表达显著增加(P<0.01),抑凋亡蛋白Bcl-2表达则显著降低(P<0.01);且VC+雷帕霉素组LC3与Bcl-2表达显著高于VC组(P<0.01),p62和Bax表达则显著低于VC组(P<0.01);而VC+氯喹组LC3与Bcl-2表达显著低于VC组(P<0.01),p62和Bax的表达则显著高于VC组(P<0.01). 结论:VC可诱导大鼠睾丸自噬和生精细胞凋亡,上调自噬可抑制生精细胞凋亡,阻滞自噬则可促进生精细胞凋亡. 吴承 朱少明 程帆 周向军 余伟民 饶婷 李浩勇 宁金卓 夏煜琦 朱澄村关键词:精索静脉曲张 自噬 睾丸 生精细胞 组蛋白甲基转移酶和去甲基化酶在膀胱癌发生发展中的作用研究进展 被引量:1 2022年 膀胱癌发病机制复杂,同时又是基因突变最频繁的人类癌症之一。近年研究表明,表观遗传学调控在膀胱癌的发生发展中具有重要作用,与组蛋白甲基化修饰相关的组蛋白甲基转移酶和组蛋白去甲基化酶是其中重要的环节。组蛋白甲基转移酶和组蛋白去甲基化酶的高频突变及异常表达改变了核小体的原子结构,导致细胞基因表达模式发生变化,通过促进或抑制各种效应蛋白募集,调控广泛的上下游信号通路促进上皮间充质转化,赋予干细胞表型和影响肿瘤免疫等,对膀胱癌的增殖、迁移和侵袭等恶性生物学行为产生影响,直接参与膀胱癌的发生发展过程。 邢基 朱少明 赵胜 林方优 程帆关键词:膀胱癌 表观遗传学 组蛋白甲基化 组蛋白甲基转移酶 组蛋白去甲基化酶 肾后性梗阻致肾纤维化机制研究进展 被引量:4 2019年 肾纤维化是指各种原因引起正常肾组织结构破坏,被纤维组织取代的病理过程,主要表现为细胞外基质沉积,可引起肾功能减退或肾功能衰竭。急、慢性肾后性梗阻是肾功能损伤及肾纤维化的常见病因。肾后性梗阻致肾纤维化是多种因素共同作用的结果,可能涉及肾组织缺氧微环境,炎症介质释放及炎症细胞浸润,肾间质细胞活化及促纤维化因子释放等。本文就肾后性梗阻致肾纤维化机制的研究进展作一综述。 朱少明 程帆 吴承 张左关键词:肾纤维化 炎症介质 精索静脉曲张致男性不育的研究进展 被引量:18 2017年 精索静脉曲张(VC)是引起男性不育的重要因素,其形成的因素常与解剖因素和精索静脉先天发育异常相关。曲张的精索静脉导致精索静脉抗返流作用减弱或消失,静脉血返流进入睾丸,对睾丸引起一系列的损害,最终导致不育。引起不育的机制尚未完全清楚,可能与睾丸局部温度升高、睾丸组织缺氧、氧化应激、肾上腺及肾脏代谢产物返流入睾丸、睾丸激素分泌的异常、免疫异常等相关。精索静脉曲张的诊断主要是通过临床表现、影像学检查、实验室检测等。对于精索静脉曲张的治疗,以手术治疗为主,不同的手术方式各有利弊。本文对VC致男性不育的研究进展作一综述。 朱少明 程帆关键词:精索静脉曲张 男性不育 缺氧 氧化应激 三七总皂苷通过调控Hippo-YAP信号通路对膀胱癌细胞生物学行为的影响 被引量:6 2020年 目的观察三七总皂苷(PNS)对人膀胱癌T24细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响,并探讨其诱导凋亡的机制。方法2019年9月至2020年7月,选取人膀胱癌T24细胞株(购自中国科学院上海生命科学研究院)作为研究对象。将T24细胞分为对照组(加PBS)、实验组(低浓度组100 mg/L、高浓度组200 mg/L),检测其被不同浓度的PNS处理12、24、48 h后的细胞活力;在经过PNS(100、200 mg/L)处理48 h后,使用细胞划痕实验、Transwell评估处理后T24细胞迁移、侵袭能力的变化,通过流式细胞仪检测干预后T24细胞凋亡状况,利用蛋白质印迹法(Western blot)法检测T24细胞在处理后活化的半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和Hippo信号通路关键蛋白TEA结构域转录子1(TEAD1)、Yes协同蛋白1(YAP1)和大肿瘤抑制基因1(LATS1)的表达水平。组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果PNS处理48 h后,实验组细胞增殖活力显著低于对照组[(63.28±5.81)%、(39.38±3.34)%比(103.00±3.30)%,F=126.045,P<0.05];细胞划痕实验提示PNS处理后,实验组膀胱癌T24细胞系的迁移率显著降低[(25.99±2.25)%、(9.79±0.44)%比(52.50±2.29)%,F=398.345,P<0.05];Transwell结果说明PNS(100、200 mg/L)能够显著减弱T24细胞株的侵袭性[(249.67±28.01)、(152.67±7.64)个比(397±30.12)个,F=77.856,P<0.05];流式细胞仪结果显示,PNS(100、200 mg/L)处理48 h后,实验组细胞凋亡率[(9.55±0.39)%、(15.08±0.94)%]相对于对照组[(6.86±0.68)%]明显升高(F=105.821,P<0.05);Western blot结果表明,实验组中抗凋亡蛋白bcl-2(0.43±0.06、0.17±0.04比0.80±0.08)和Hippo信号通路中TEAD1(0.38±0.05、0.17±0.04比0.62±0.06)和YAP1(0.40±0.04、0.23±0.06比0.53±0.02)等蛋白的表达量显著降低,而cleaved Caspase-3(0.39±0.04、0.50±0.03比0.24±0.02)、LATS1(0.51±0.07、0.73±0.04比0.28±0.05)的表达明显上调(F=87.713、55.109、38.325、53 黄晨 程帆 朱少明 周向军 阮远 饶婷 张云龙 许磊 余伟民关键词:三七总皂苷 膀胱癌 精索静脉曲张大鼠睾丸细胞自噬的初步研究 被引量:9 2017年 目的初步研究自噬在精索静脉曲张大鼠模型中的表达改变和可能的理论意义,及初步探讨自噬和凋亡的可能关系,为精索静脉曲张致不育机制的研究提供新的方向。方法取SD雄性大鼠40只,分为正常对照组、VC组(VC造模组)、VC手术组(VC+手术治疗组)、假手术组,每组10只。正常对照组不做任何处理,VC组和VC手术组行造模,假手术组打开腹腔但不做任何处理,第30天时对VC手术组行左侧精索静脉高位结扎手术治疗。第60天时对所有组大鼠行左侧睾丸切除术。对睾丸组织行HE染色、TUNEL染色,透射电镜观察用于睾丸生精小管上皮细胞自噬体;Western-blot、RT-PCR检测LC3-Ⅱ和Beclin1含量变化。结果透射电镜观察正常对照组和假手术组生精小管上皮细胞中较少见自噬体和自噬溶酶体,VC组和VC手术组中自噬体、自噬溶酶体明显增多。Western-blot及RT-PCR检测示,Beclin-1和LC3-Ⅱ/Ⅰ在VC组和VC手术组中表达明显高于正常对照组和假手术组。结论 VC可致大鼠睾丸生精小管上皮细胞中自噬体表达增多的现象,并且初步探讨自噬与凋亡呈正相关的关系。对VC睾丸细胞自噬的研究,可能进一步为VC的临床治疗提供新的靶点和理论依据。 朱少明 余伟民 饶婷 阮远 李浩勇 杨潇 宁金卓 袁润 赵胜 程帆关键词:自噬 精索静脉曲张 透射电镜 膀胱癌中TFAP2C的表达及预后相关性分析 被引量:1 2022年 目的:应用生物信息学方法和实验验证确定转录因子TFAP2C在人类膀胱癌中的作用。方法:通过TCGA、Oncomine、GEPIA、The Human Protein Altas和Kaplan-Meier Plotter等数据库获得膀胱癌患者TFAP2C的转录信息和生存数据,分析TFAP2C在膀胱癌组织中的表达水平及与预后的关系。在si-TFAP2C转染膀胱癌5637细胞后,利用CCK8和划痕实验检验TFAP2C在膀胱癌细胞中的作用。用STRING数据库构建蛋白互作网络,用R软件对网络中的基因进行GO和KEGG富集分析,通过R软件将TFAP2C在TCGA膀胱癌样本中的表达情况进行GSEA富集分析并作免疫细胞浸润相关性分析。结果:TFAP2C在膀胱癌组织中高表达,且其高表达预示着膀胱癌患者的总体生存率较差(P<0.05)。划痕和CCK8实验证明了TFAP2C可促进膀胱癌细胞的增殖和迁移(P<0.05)。GSEA结果显示,TFAP2C的高表达样本富集于蛋白质分泌、有丝分裂纺锤体、PI3K/AKT/mTOR信号通路和mTORC1信号通路(FDR<0.1,|NES|>1,P<0.05)。KEGG信号通路分析显示:TFAP2C与相关基因主要通路富集于ErbB信号通路、EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性和膀胱癌等(P<0.05)。GO功能富集分析显示:TFAP2C与相关基因的生物学过程主要富集于转录共激活因子活性、转录辅助调节因子活性和表皮生长因子受体结合等(P<0.05)。结论:TFAP2C在膀胱癌中起促癌作用,表达水平上调和预后不良有关,TFAP2C可能是判断膀胱癌预后的生物标志物。 陈康 邢基 朱少明 张云龙 程帆关键词:膀胱癌 生物信息学 数据库 预后 自噬及其在肾纤维化中的作用研究进展 被引量:3 2019年 自噬是细胞在应激条件下通过溶酶体途径对自身组分进行分解代谢和循环利用的过程,是细胞的一种适应性反应和保护机制,并且与许多生物学过程和疾病密切相关。在进行性肾脏疾病中,肾纤维化是终末期肾衰竭的共同途径。最近研究表明,转化生长因子β1(TGF-β1)作为一种多效细胞因子和肾纤维化的中枢介质可调节自噬,而自噬可调节肾纤维化的许多关键途径,如肾小管间质纤维化。深入认识自噬的分子机制和信号通路,及其在进行性肾纤维化中的作用,可能为肾纤维化找到潜在的有效治疗靶点。 吴承 朱少明 程帆关键词:自噬 肾纤维化 转化生长因子Β1 精索静脉曲张致不育机制的研究进展 被引量:14 2017年 精索静脉曲张(VC)是引起男性不育的常见病因,长时间及程度重的VC可以引起睾丸组织细胞损害,导致生精细胞本身及生精坏境的破坏,造成精子质和量的改变,从而造成不育。但VC引起不育的确切机制目前尚不清楚。其机制有很多假说,该文对近年来炎症、氧化应激、凋亡、血睾屏障和免疫异常、内分泌变化、血管活性物质毒性作用、相关分子变化等与不育关系的研究进展,进行了综述。 朱少明 程帆关键词:精索静脉曲张 凋亡 分子机制