采用RACE-PCR方法,从鲢(Hypophthalmichthys molitrix)头肾SMARTcDNA中获得了679 bp IL-8 cDNA序列。结果显示:该序列包含169 bp的5′非编码区,213 bp 3′端非编码区和297 bp的开放阅读框;鲢IL-8的开放阅读框编码98个氨基酸残基,其中包含构成两对二硫键的4个保守半胱氨酸。RT-PCR结果显示鲢:IL-8 mRNA主要在胰、肝脏和头肾中表达。将鲢IL-8不含信号肽的成熟多肽克隆到原核融合表达载体pQE30上,转入大肠杆菌M15内进行表达,经SDS-PAGE电泳后显示,重组融合蛋白在分子量约11kD处有一明显表达带,与预期计算的分子量大小相一致。
肿瘤坏死因子（TNF）是一种炎症细胞因子，在非特异性免疫系统中发挥着重要作用。TNF由单核细胞或巨噬细胞产生，能直接造成肿瘤细胞的死亡，并参与机体炎症和免疫应答的调节。用RACE（rapid amplification of cDNA ends）-PCR方法，从鲢总RNA反转录产物中获得了1254 bp TNF cDNA全序列。该序列包含394bp的5’端非编码区，398 bp的3’端非编码区和462bp的开放阅读框。鲢TNF的开放阅读框编码239个氨基酸，其中包含构成一对二硫键的2个保守半胱氨酸。同时利用RT-PCR技术，对该基因在鲢鱼体内不同组织之间的表达差异进行了分析研究，结果表明鲢TNF mRNA主要在脑、鳃和头肾中表达，肠和脾中有少量表达，而在肝中几乎没有表达。
T淋巴细胞激活蛋白家族2(the linker for activator of T-cells family member 2,LAT2)蛋白是一个跨膜转接蛋白(transmembrane adaptor proteins,TRAPs),具有多个酪氨酸磷酸化位点和支架功能,可捕获细胞内下游转接蛋白和效应蛋白,发挥生物学作用。LAT2在白细胞中呈现“表达二分法”,参与白细胞的成熟分化和免疫应答。LAT2的差异性表达与白细胞的分化成熟,髓性白血病的类型和药物敏感度以及肿瘤的预后有关。本文就LAT2的基因克隆和表达、蛋白结构和功能及其在细胞中的作用以及可能机制进行综述。
