高军平 作品数:15 被引量:24 H指数:3 供职机构: 西南大学 更多>> 发文基金: 中国烟草总公司科技项目 中国烟草总公司科技重大专项 云南省烟草专卖局(公司)科技项目 更多>> 相关领域: 农业科学 轻工技术与工程 生物学 更多>>
基于CRISPR/Cas9技术的烟草NtDXR基因敲除及功能分析 为研究烟草5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(1-Deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,DXR)基因的表达模式和功能,从普通烟草(Nicotiana tabacum)品种红... 聂梦云 高军平 罗培 陈晓乐 易小慧 王根洪 夏庆友关键词:烟草 荧光定量PCR 基因敲除 烟草烟碱去甲基化酶基因CYP82E4的编辑失活载体及其应用 本发明涉及一种烟草烟碱去甲基化酶基因CYP82E4的编辑失活载体及其应用,所述编辑失活载体含有编辑CYP82E4的sgRNA,烟草烟碱去甲基化酶基因CYP82E4的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,将烟碱去甲基化酶... 王根洪 夏庆友 陈晓乐 赵萍 高军平文献传递 烟草烟碱去甲基化酶基因CYP82E4的编辑失活载体及其应用 本发明涉及一种烟草烟碱去甲基化酶基因CYP82E4的编辑失活载体及其应用,所述编辑失活载体含有编辑CYP82E4的sgRNA,烟草烟碱去甲基化酶基因CYP82E4的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,将烟碱去甲基化酶... 王根洪 夏庆友 陈晓乐 赵萍 高军平文献传递 基于CRISPR/Cas9技术的烟草NtDXR基因敲除及功能分析 被引量:12 2016年 为研究烟草5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(1-Deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,DXR)基因的表达模式和功能,从普通烟草(Nicotiana tabacum)品种红花大金元中克隆了NtDXR基因,并通过荧光定量PCR技术分析了NtDXR在红花大金元不同发育时期、不同组织中的表达模式。同时利用CRISPR/Cas9技术构建了NtDXR敲除载体,获得了DXR基因突变的植株。结果表明:NtDXR基因在花中的表达量最高,在雌蕊和叶中次之;利用CRISPR/Cas9系统定点敲除NtDXR基因后,检测目的基因靶位点序列发现有碱基的插入、缺失与置换,并且部分T_0代转基因阳性植株呈现白化表型,暗示NtDXR基因在烟草叶绿素等色素合成过程中起重要作用,推测NtDXR基因的突变能阻断烟草质体色素的合成。 聂梦云 高军平 罗培 陈晓乐 易小慧 王根洪 夏庆友关键词:烟草 荧光定量PCR 基因敲除 烟草NtMAPK基因克隆及激素诱导条件下的表达分析 被引量:1 2015年 促分裂素原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK)是植物体防御反应信号物质中的关键组分和植物应答逆境胁迫的重要信号分子。为了探索MAPK基因同源体在烟草中的功能,采用RT-PCR技术从烟草中克隆出了一个MAPK同源序列,命名为Nt MAPK。经氨基酸序列比对分析鉴定为栽培烟草MAPK家族的成员。系统发育分析显示,Nt MAPK与水稻的Os MPK2/Os MPK6进化关系最近,表明Nt MAPK可能具有与Os MPK6相似的功能,与植物体的抗病性相关。采用植物体防御反应相关的信号物质诱导,半定量分析结果显示在脱落酸(ABA)、茉莉酸甲酯(Me JA)和水杨酸(SA)诱导条件下该基因表达上调。 熊海军 张兴坦 吴向伟 高军平 谢小东 王根洪 夏庆友关键词:烟草 克隆 促进转烟草促早花基因NtFT5烟草生根的培养基及获得短周期烟草的方法 本发明公开了促进转烟草促早花基因NtFT5烟草生根的培养基及获得短周期烟草的方法,其生根培养基为含0.1mg/L的NAA、pH为5.6~5.8的1/2MS固体培养基,该培养基能够促进转烟草促早花基因NtFT5的烟草生根,... 王根洪 夏庆友 王佩 高军平 熊海军文献传递 基于CRISPR/Cas9技术的烟草NtDXR基因敲除及功能分析 为研究烟草5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(1-Deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,DXR)基因的表达模式和功能,从普通烟草(Nicotiana tabacum)品种红... 聂梦云 高军平 罗培 陈晓乐 易小慧 王根洪 夏庆友关键词:烟草 荧光定量PCR 基因敲除 烟草独脚金内酯转运蛋白NtPDR6及其干扰表达载体和应用 本发明公开了烟草独脚金内酯转运蛋白NtPDR6及其干扰表达载体和应用,烟草独脚金内酯转运蛋白NtPDR6的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示或SEQ ID NO.4所示氨基酸序列经取代、缺失或添加至少一个氨基酸,其编... 王根洪 夏庆友 谢小东 高军平 熊海军文献传递 基于CRISPR/Cas9技术的烟草NtDXR基因敲除及功能分析 为研究烟草5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶(1-Deoxy-D-xylulose-5-phosphate reductoisomerase,DXR)基因的表达模式和功能,从普通烟草(Nicotiana tabacum)品种红... 聂梦云 高军平 罗培 陈晓乐 易小慧 王根洪 夏庆友关键词:烟草 荧光定量PCR 基因敲除 文献传递 烟草周期蛋白依赖性激酶基因NtCDK8的克隆及生物信息学分析 被引量:1 2014年 为明确周期蛋白依赖性激酶(Cyclin-dependent protein kinases,CDKs)在烟草中的生物学功能,通过同源性搜索的方法获得了烟草周期蛋白依赖性激酶基因的EST序列。采用RT-PCR技术,从烟草栽培品种红花大金元中成功克隆出了周期蛋白依赖性激酶基因,并命名为NtCDK8。NtCDK8基因cDNA编码区全长为1422 bp,编码473个氨基酸。氨基酸序列同源性比对分析表明:NtCDK8蛋白与番茄、马铃薯、拟南芥周期蛋白依赖性激酶的相似性分别达到93.02%,94.08%和75.32%。蛋白结构预测分析显示NtCDK8具有丝氨酸/苏氨酸(Serine/Threonine)蛋白激酶结构域,可能通过促使下游蛋白中的丝氨酸或苏氨酸残基磷酸化,进而促使细胞外信号向细胞内传递;通过疏水性、信号肽及亚细胞定位预测综合分析表明,NtCDK8蛋白可能是一个在细胞核中发挥功能的亲水性蛋白。 吴向伟 王根洪 聂梦云 熊海军 高军平 谢小东 夏庆友关键词:烟草 周期蛋白依赖性激酶 基因克隆 生物信息学