李琳琳
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
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- ABIN1对μ阿片受体活性的抑制作用
- 目的 A20结合的核因子抑制蛋白(ABIN1蛋白)是通过细菌双杂交技术筛选得到的与MOR羧基端(C-端)有相互作用的蛋白.本研究在确定ABIN1蛋白与μ阿片受体(MOR)相互作用的基础上,明确ABIN1对MOR受体激动活...
- 周培岚赵钧如李玉蕾雍政俞纲李琳琳苏瑞斌宫泽辉
- P2X4受体拮抗剂的设计、筛选及其评价研究
- 神经病理性痛的治疗一直是困扰临床工作者的一大难题。目前的治疗药物主要有抗抑郁药、抗癫痫药、局麻药、阿片类、非类固醇类消炎药等，这些药物的疗效通常不令人满意且带来较多的副作用。因此，开发疗效确切且副作用较少的预防及治疗神经...
- 李琳琳
- 关键词：P2X4受体拮抗剂药物设计
- 小鼠源性ABIN1蛋白的抗体制备及功能验证
- 2013年
- 目的制备小鼠源性A20结合核因子κB活化抑制蛋白1(A20 binding inhibitor of NF-κB activation 1,mABIN1)的多克隆抗体并进行功能验证,利用该抗血清对大鼠脑区ABIN1的分布进行验证。方法利用mABIN1片段与钥孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)耦联得到的肽段为免疫原,免疫新西兰大耳白兔3次,共35 d,获得抗血清,分别用ELISA、蛋白免疫(Western)印迹和免疫组织荧光化学法对抗体的特异性进行验证;使用上述验证所得的特异性抗血清,通过Western印迹检测ABIN1在大鼠各脑区的分布;对所得到的特异性抗血清进行纯化。Western印迹证明,纯化后的抗体杂带较纯化前明显降低,但效价也有所下降。结果与结论成功制备了兔抗小鼠ABIN1抗血清并对抗血清进行纯化,经该抗血清首次验证ABIN1在大鼠嗅球、皮质、海马、纹状体、伏隔核、丘脑、下丘脑、小脑、脑干及脊髓等中枢神经系统不同部位均有广泛分布,为在动物体内进行ABIN1生物学功能研究提供了有利工具。
- 赵钧如李琳琳周培岚宫泽辉
- 关键词：抗体纯化
- 大鼠嘌呤能受体P2X_4稳定表达细胞系的建立及功能的验证被引量：1
- 2014年
- 目的建立大鼠嘌呤能受体P2X4(rP2X4)稳定表达细胞系,并对细胞系功能进行验证。方法构建绿色荧光蛋白rP2X4受体(pEGFP-N1-rP2X4)重组质粒,采用脂质体转染法将pEGFP-N1-rP2X4转染于人胚肾(HEK293)细胞,采用抗生素G418(1 g·L-1)压力筛选,qRT-PCR和Western蛋白质印迹法验证rP2X4受体的表达量。全细胞膜片钳技术检测稳定表达的rP2X4受体Ca2+电流。结果测序结果表明,pEGFP-N1-rP2X4重组质粒序列完全正确;采用脂质体法稳定转染HEK293细胞后,qRT-PCR和Western蛋白质印迹法结果表明,HEK293-pEGFP-N1-rP2X4稳定转染细胞系在连续传代25代后(1,3,5,10,15,20和25代)rP2X4受体均保持稳定表达;全细胞电流记录实验表明,嘌呤受体激动剂ATP 3.0μmol·L-1能激活HEK293-pEGFP-N1-rP2X4细胞上表达的rP2X4受体并产生特异性激活电流,且该电流能被非选择性P2X4受体拮抗剂三硝基苯酚(TNP)-ATP(30.0μmol·L-1)阻断。结论 HEK293-pEGFP-N1-rP2X4稳定转染细胞系上rP2X4受体表达稳定,激活后能产生特异性激活电流。该细胞系可用于rP2X4受体的药物筛选及其机制研究。
- 李琳琳周培岚苏瑞斌
- 关键词：HEK293细胞
- 嘌呤能受体P2X_4结构的研究进展被引量：1
- 2013年
- 近年研究发现,嘌呤能受体P2X4对生物体内的多种重要生命活动起到调节作用。ATP-门控阳离子通道受体P2X4是P2X受体家族中的一员,其主要表达在哺乳动物组织中。P2X4受体的结构分为3个部分,即胞外结构域、跨膜区和胞内N,C端。目前已经解出分辨率高达2.8的担尼鱼(斑马鱼)P2X4(zfP2X4)受体的晶体结构,为后续P2X4结构的研究奠定了基础,也为P2X4受体机制的研究提供了理论依据。本文对P2X4受体的结构进行综述,希望能够为新药的设计与发现提供理论依据。
- 李琳琳周培岚苏瑞斌
- 关键词：嘌呤能P2阳离子通道
