崔志刚
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
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- 小麦花药愈伤组织基因枪遗传转化方法
- 本发明公开了一种小麦花药愈伤组织基因枪遗传转化方法，包括如下步骤：花药愈伤组织诱导；高渗培养；基因枪轰击转化；恢复培养；分化筛选培养；壮苗、生根培养；染色体加倍；分子检测并筛选。与传统的体细胞愈伤组织基因抢转化相比，本发...
- 陈耀锋史勇陈鑫李春莲任慧莉崔志刚权军利白延红
- 有机添加物对矮败小麦F_1可育株花药培养及花培苗越夏的影响被引量：7
- 2010年
- 【目的】探讨有机添加物对矮败小麦F1可育株花药培养特性的影响,研究其花粉植株越夏方法。【方法】应用单因子试验,分析水解酪蛋白、谷氨酰胺和生物素3种有机添加物对矮败小麦F1可育株可育株花药培养特性的影响,比较不同基因型矮败小麦F1可育株花药愈伤组织诱导率、绿苗分化率,研究多效唑对矮败小麦F1可育株花粉植株越夏的影响。【结果】在一定质量浓度范围内,水解酪蛋白、谷氨酰胺和生物素对矮败小麦F1可育株花药愈伤组织的诱导都有一定正向促进作用,在其最适质量浓度(水解酪蛋白500 mg/L、谷氨酰胺5.0 mg/L和生物素2.0 mg/L)时,矮败小麦F1可育株花药愈伤组织的诱导率分别较对照提高了47.07%,22.48%和55.27%;基因型对矮败小麦F1可育株花药愈伤组织诱导和绿苗再分化有重要影响,矮败小麦与小偃22、101、西农213 3个小麦品种(系)杂交F1可育株花药愈伤组织诱导率分别为5.49%,4.73%和5.85%,三者之间差异均达极显著水平。矮败×小偃22愈伤组织的绿苗分化率明显高于矮败小麦与101、西农213杂交F1代2个供试材料,达到了13.70%。在添加多效唑和连续继代培养条件下,成功地进行了矮败小麦F1花粉植株越夏,证明在越夏培养过程中,4.0 mg/L多效唑表现出的延缓生长作用较3.0 mg/L更好,并未见有毒害作用。【结论】添加500 mg/L水解酪蛋白、5.0 mg/L谷氨酰胺和2.0 mg/L生物素,能使矮败小麦F1可育株花药愈伤组织的诱导率较对照有明显提高;添加多效唑和连续继代培养可使矮败小麦F1花粉植株成功越夏,获得生长健壮、移栽成活率高的花培苗。
- 史勇白延红陈耀锋李春莲崔志刚安娜李晓飞
- 关键词：矮败小麦花药培养有机添加物
- 根癌农杆菌介导的芪合酶基因转化烟草遗传体系的优化被引量：5
- 2010年
- 【目的】研究根癌农杆菌介导的芪合酶基因转化烟草遗传体系的优化条件。【方法】以＂中烟99＂叶片为受体,采用根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens,GV3101）介导法,将芪合酶基因导入烟草基因组,并对其遗传体系进行了优化,对筛选获得的转基因烟草植株进行检测。【结果】根癌农杆菌介导的芪合酶基因遗传转化的最佳条件为：将预培养2 d的烟草外植体,用稀释10倍的GV3101菌株菌液（OD600=0.6）浸染8 min后,共培养3 d,然后转入含卡那霉素（Km）50 mg/L和羧苄青霉素（Cb）500 mg/L的筛选分化培养基上诱导分化,待抗性芽长到2～3 cm后,转入含Km 50 mg/L和Cb 500 mg/L的筛选生根培养基上进行筛选,在以上最佳遗传转化条件下,初步筛选到54株转化体,经PCR和RT-PCR检测获得25株转化烟草植株。【结论】经卡那霉素筛选、PCR、RT-PCR检测后,初步证明芪合酶基因已被整合到烟草基因组中,并可以正常转录。
- 安娜陈耀锋崔志刚白延红
- 关键词：芪合酶基因烟草根癌农杆菌
- 小麦花药愈伤组织基因枪遗传转化方法
- 本发明公开了一种小麦花药愈伤组织基因枪遗传转化方法，包括如下步骤：花药愈伤组织诱导；高渗培养；基因枪轰击转化；恢复培养；分化筛选培养；壮苗、生根培养；染色体加倍；分子检测并筛选。与传统的体细胞愈伤组织基因抢转化相比，本发...
- 陈耀锋史勇陈鑫李春莲任慧莉崔志刚权军利白延红
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