赵明亮
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
- 供职机构：武警医学院附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种可用于500μm脑片的高分辨率细胞内标记技术被引量：3
- 2007年
- 目的建立简便高效的、与脑片盲法膜片钳记录相结合的生物胞素细胞内标记染色方法。方法制备大鼠听皮层脑片(500μm),采用盲法脑片膜片钳全细胞记录,泳入生物胞素(0.2%)对记录细胞进行标记,经组织化学显色和甘油封片后,沿显微镜Z轴,每隔30μm拍摄一帧显微数码图像,利用Adobe Photoshop软件对神经元进行三维重建。结果标记的神经元层次清楚,可在光镜下分辨出胞体、轴树突分支、棘突等细微结构,而且非特异性背景染色浅;不需要进行厚脑片的二次切片即可对神经元进行三维重建。结论本方法简便易行,结果可靠,分辨率高,而且对设备要求不高。
- 赵明亮刘国龙隋建峰阮怀珍熊鹰
- 关键词：脑片膜片钳术免疫组织化学
- 大鼠初级听皮层神经元内在电生理学特性和突触传递功能的发育变化及听觉剥夺的影响
- 视觉和躯体感觉的研究发现，早期的尤其是关键期内的感觉经验活动对于丘脑皮层回路的发育必不可少，关键期后，神经回路的重组很难再被诱导。N-甲基-D-天冬氨酸(N-mehyl-D-aspartate，NMDA)受体被公认在中枢...
- 赵明亮
- 关键词：听觉剥夺电生理学形态学膜片钳
- 文献传递
- 听觉系统抑制性神经回路的活动依赖性组构被引量：4
- 2006年
- 最近的研究发现,哺乳动物听觉系统中抑制性神经回路的成熟和优化依赖于自发性和经验性的神经活动,神经活动对于抑制性突触的亚细胞定位、抑制性神经回路的拓扑组构,以及耳优势带的形成均至关重要。这些研究可能揭示了脑发育过程中抑制性神经回路构建的一般规律和细胞机制。
- 赵明亮熊鹰
- 关键词：听觉神经回路
- 睡眠剥夺对大鼠空间学习记忆的影响及其LTP机制的研究被引量：8
- 2006年
- 目的研究长时间睡眠剥夺对大鼠空间学习记忆及NMDA受体介导的LTP的影响。方法采用侧脑室注射PCPA(15μg/kg,1次/d,连续5 d)和阿托品(15μg/kg,从第8天开始注射,1次/d,连用2 d)制作大鼠睡眠剥夺模型,于注药的第2天起同步连续采集8 d脑电(EEG)、肌电(EMG)、眼电(EOG)对睡眠剥夺模型进行鉴定,Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆,以脑片盲法膜片钳全细胞技术记录兴奋性突触后电流(EPSCs)观察海马CA1区锥体细胞由NMDA受体介导的LTP变化。结果睡眠剥夺组与对照组相比觉醒(W ak ing)明显延长,慢波睡眠(SW S),快波睡眠(PS),总睡眠时间(TST)明显减少(P<0.01)。在水迷宫实验中睡眠剥夺组大鼠的逃避潜伏期延长,穿过原平台位置次数和在原平台象限探索时间百分率下降(P<0.05),睡眠剥夺组大鼠海马脑片CA1区锥体细胞由NMDA受体介导的LTP诱出率,非常显著低于对照组(P<0.01)。结论侧脑室注射PCPA与阿托品导致的睡眠剥夺显著的影响了大鼠空间学习记忆能力其机制与NMDA受体介导的LTP有关。
- 刘国龙赵明亮万子兵宋文强隋建峰熊鹰
- 关键词：睡眠剥夺学习记忆LTP空间记忆阿托品
- 听皮层-内侧膝状体突触传递的长时程增强及其突触前机制的研究被引量：2
- 2006年
- 目的研究大鼠听皮层(AC)-内侧膝状体(MGB)突触传递的长时程增强(long-termpotentiation,LTP)及其突触前机制。方法刺激听辐射纤维,采用脑片膜片钳全细胞技术在MGB分离和记录兴奋性突触后电流(EPSCs);诱导LTP,并观察谷氨酸受体阻断剂对LTP的影响;采用配对脉冲实验对LTP的发生机制进行探讨。结果①AC-MGB突触的兴奋性传递主要由NMDA和AMAP/kainate受体介导,可在MGB成功诱导出LTP;②应用AP-5或KYN阻断突触后神经元的去极化后仍然可在MGB成功诱导出LTP;但用无Ca2+的ACSF替代正常ACSF后,在MGB难以诱导出LTP。③AC-MGB突触传递的LTP伴随着配对脉冲比率(paired-pulseratio,PPR)的下降。结论AC-MGB突触传递存在LTP机制,其诱导过程不依赖于突触后NMDA受体,但依赖于细胞外Ca2+的浓度;LTP的发生与突触前兴奋性神经递质释放概率增加有关。
- 赵明亮刘国龙万子兵隋建峰阮怀珍熊鹰
- 关键词：内侧膝状体听皮层长时程增强膜片钳
- 胚胎干细胞向胰岛素分泌细胞分化的体外诱导被引量：4
- 2006年
- 目的探讨胚胎干细胞向胰岛素分泌细胞分化诱导的途径和方法,为阐明胰岛β-细胞的发育机制和糖尿病的细胞移植治疗奠定基础。方法将传统的多步诱导法改良为两步诱导法,将胚胎干细胞诱导为胰岛素分泌细胞,并与传统的多步法进行比较。结果经过两步诱导,胚胎干细胞被诱导成了胰岛素分泌细胞,越过了先将胚胎干细胞诱导为神经前体细胞,再进一步诱导为胰岛素分泌细胞的传统模式,使诱导时间缩短,诱导方法简化,所得胰岛素分泌细胞数量与传统方法所得相当。结论多阶段和两阶段诱导均可将胚胎干细胞诱导为胰岛素分泌细胞。
- 周光纪屈纪富徐海伟阮怀珍杨丽唐军赵明亮李达兵
- 关键词：胚胎干细胞分化胰岛素分泌细胞
- 听觉皮质-丘脑兴奋性突触传递的盲法膜片钳研究
- 2005年
- 目的:制备包含大鼠听皮质与内侧膝状体及两者间功能联系的脑片,采用盲法膜片钳全细胞记录技术,对听皮质-内侧膝状体兴奋性突触传递的生理和药理学特性进行实验观察。方法:实验于2004-04/06在第三军医大学基础部生理学教研室完成。实验动物选择出生后7～15d健康SD大鼠21只,制备与水平方向呈15°的600μm的内侧膝状体脑片,采用膜片钳全细胞记录。电极内液成分及其浓度(mmol/L)为:甲磺酸铯120、氯化镁2、羟乙基哌嗪乙磺酸10、乙二醇双(2-氨基乙醚)四乙酸0.5、三磷酸腺苷2、QX-3142;灌流液中常规加入γ-氨基丁酸A受体拮抗剂荷包牡丹碱(10μmol/L)。获得内侧膝状体神经元全细胞模式后,在电流钳或电压钳模式下,双极钨丝刺激听皮质颗粒下层(Ⅴ～Ⅵ层),给予时程为100μs的方波刺激,在内侧膝状体分离记录兴奋性突触后电位和兴奋性突触后电流;观察N-甲基-D-天冬氨酸受体阻断剂D,L-2-氨基-5磷酸基戊酸(50μmol/L)和α-氨基羟甲基恶唑丙酸受体拮抗剂氰基-2-硝基喹啉-2,3-二酮(20μmol/L)对兴奋性突触后电流的影响。结果:①观察15例内侧膝状体神经元对皮层刺激的反应,其平均膜静息电位为(49±13.5)mV,膜输入阻抗为(432±109)MΩ。电流钳模式下,刺激听皮质,可在80%(12/15)的内侧膝状体神经元记录到兴奋性突触后电位,其幅度与刺激强度在一定范围内呈正相关,在3例记录中采用了不含QX-314的电极内液,可以观察到当刺激达到阈值水平,在兴奋性突触后电位的波峰上爆发了动作电位。②选择电压钳模式;电压钳下,刺激听皮质后可在内侧膝状体神经元记录到兴奋性突触后电流,钳制电位为-70mV时,电流是内向的,加入氰基-2-硝基喹啉-2,3-二酮后,兴奋性突触后电流的幅度显著下降,进一步加入D,L-2-氨基-5磷酸基戊酸后,兴奋性突触后电流几乎完全消失。结论:600μm的旁水平位脑片包含了内侧�
- 赵明亮刘国龙周光纪李雪松熊鹰
- 关键词：听觉皮质膝状体膜片钳术
