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王子龙

作品数:6 被引量:10H指数:2
供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
发文基金:国家科技支撑计划国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
相关领域:农业科学更多>>

文献类型

  • 5篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 6篇农业科学

主题

  • 6篇病毒
  • 3篇疫病
  • 2篇蛋白
  • 2篇圆环病毒
  • 2篇兽疫
  • 2篇重组新城疫病...
  • 2篇猪圆环病毒
  • 2篇猪圆环病毒2...
  • 2篇小反刍兽疫
  • 2篇新城疫
  • 2篇新城疫病
  • 2篇新城疫病毒
  • 2篇反刍
  • 2篇反刍兽
  • 2篇CAP蛋白
  • 1篇痘病
  • 1篇痘病毒
  • 1篇羊痘
  • 1篇羊痘病
  • 1篇羊痘病毒

机构

  • 5篇中国农业科学...
  • 3篇河北农业大学

作者

  • 6篇王子龙
  • 5篇步志高
  • 3篇陈伟业
  • 3篇李翠翠
  • 2篇葛金英
  • 2篇于桂梅
  • 2篇张家林
  • 1篇陈曦
  • 1篇孙继国
  • 1篇王云鹤
  • 1篇孙一瑞
  • 1篇周微微

传媒

  • 5篇中国预防兽医...

年份

  • 1篇2016
  • 3篇2015
  • 2篇2014
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
用于山羊痘病毒载体的强痘病毒启动子筛选被引量:2
2015年
为提高重组山羊痘病毒(GPV)中外源基因的表达水平及筛选强转录效力的启动子,本研究选择桑灯蛾昆虫痘病毒42K启动子(42K)、痘病毒合成晚期441启动子(SL441)、痘病毒合成晚期454启动子(SL454)、牛痘病毒(VV)早晚期P7.5启动子(P7.5)、VV晚期P11启动子(P11)、VV H6启动子(H6)、VV合成早晚期启动子(E/L)及人工优化早晚期启动子(LEO)8种启动子,并在其下游插入萤火虫荧光素酶(Fluc)报告基因,分别构建了启动子效力检测重组质粒。并分别将其转染于预感染GPV的DF-1(鸡)、LT(绵羊)、BHK-21(仓鼠)和Vero(猴)4种动物源细胞中,以表达海肾荧光素酶(Rluc)的p RL-TK为内参质粒,24 h后检测荧光素酶活性。结果表明,在LT细胞中,SL441转录效力最强;在DF-1细胞中,LEO转录效力最强,为其他启动子的1.19-14.46倍;在Vero细胞中,H6和SL441的转录效力较强,达到其他启动子的1.21-11.24倍;在BHK-21中,H6启动子的转录效力也显著强于其它启动子。本实验最终确定了GPV在4种动物源细胞中转录效力强的启动子,该研究结果为进一步提高以GPV为载体疫苗的免疫效力奠定了基础。
谢梅梅李翠翠张家林王子龙陈伟业步志高
关键词:启动子山羊痘病毒荧光素酶
稳定表达山羊SLAM受体的BHK-21细胞系的建立及应用被引量:3
2015年
信号淋巴激活分子(SLAM)又称为CD150,是小反刍兽疫病毒(PPRV)和犬瘟热病毒(CDV)等麻疹病毒属病毒感染淋巴细胞的主要受体,在病毒侵入细胞中发挥重要作用。为建立稳定表达山羊SLAM(g SLAM)的真核细胞系,本研究将人工合成的g SLAM基因克隆至真核表达质粒p IRESpuro3中,并在该基因的3'端引入Flag标签序列作为分子标记,构建了重组质粒p IRES3-g SLAM。将该重组质粒转染BHK-21细胞,经嘌呤霉素加压筛选及采用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组PPRV病毒(r PPRV/GFP)感染鉴定后,筛选到稳定表达g SLAM基因的细胞系。r PPRV/GFP感染和western blot鉴定表明,无论是否有嘌呤霉素压力的存在,该细胞系在传代至第20代,仍能稳定表达g SLAM蛋白。由于g SLAM氨基酸序列与犬的同源性较高,以表达GFP重组CDV强毒株(r CDV/GFP)感染该细胞系,病毒可以感染且能形成明显的细胞病变,表明该细胞系可用于CDV强毒分离和致弱机制等相关研究。
张家林李翠翠谢梅梅王子龙陈伟业步志高
关键词:BHK-21细胞小反刍兽疫犬瘟热病毒分离
狂犬病病毒糖蛋白跨膜区和膜内区的替换对其生物学特性的影响被引量:1
2015年
为研究表达狂犬病病毒(RV)糖蛋白(G)重组新城疫病毒(r L-RVG)中RV G跨膜区(TM)及膜内区(CT)对RV G蛋白表达、病毒蚀斑的形成以及免疫原性的影响,本研究采用新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)的TM和CT替换G蛋白的相应部分,构建出表达RV嵌合G蛋白(RVGTC)的重组NDV(r L-RVGTC)。激光共聚焦和western blot检测结果显示,r L-RVG和r L-RVGTC在BHK-21细胞中RVG表达量无显著差异;而且r L-RVG与r L-RVGTC在鸡胚中的病毒增殖滴度也无显著差异。但间接免疫荧光结果表明,r L-RVGTC在BHK-21细胞中丧失RV或r L-RVG形成病毒蚀斑的能力。并且以5×107半数鸡胚感染量(EID50)的r L-RVG和r L-RVGTC分别免疫小鼠后,r L-RVGTC诱导产生的RV中和抗体的滴度显著低于r L-RVG诱导的滴度。本实验结果显示TM和CT对RV G的病毒蚀斑形成及其免疫原性是必不可少的。
于桂梅周微微祖述龙王子龙陈曦葛金英步志高
关键词:狂犬病病毒G蛋白F蛋白跨膜区
表达猪圆环病毒2型Cap蛋白重组新城疫病毒的构建及其生物学特性的研究
猪圆环病毒2型(PCV2)属于圆环病毒科、圆环病毒属,是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、皮炎肾病综合征(PDNS)和母猪繁殖障碍等症状的主要病原物,所有这些症状被统称为猪圆环病毒相关病(PCVAD)。自1991...
王子龙
关键词:猪圆环病毒2型CAP蛋白生物学特性重组新城疫病毒免疫效果
文献传递
稳定表达小反刍兽疫病毒N蛋白的CHO细胞系的建立及表达产物的抗原性鉴定被引量:2
2016年
为制备具有天然抗原活性的小反刍兽疫病毒(PPRV)核衣壳(N)蛋白,本研究建立了稳定表达PPRV N蛋白的真核细胞系。首先,将去除核定位信号(NLS)编码序列并且在其5'端引入组织纤维蛋白溶酶原抗原信号肽(tPA SP)编码序列的PPRV N基因克隆至真核表达质粒pCAGG-neo中,构建了重组质粒pCAGG-N△NLS/his。并将其转染于CHO细胞中,经G418压力培养并采用间接免疫荧光试验(IFA)及western blot试验筛选鉴定,获得稳定表达PPRV N蛋白的细胞系。通过IFA及western blot试验鉴定His标签表明该细胞系传代至22代仍能够稳定表达PPRV N蛋白。最后通过western blot等试验表明该蛋白能够与绵羊抗PPRV多克隆抗体反应,进一步表明该细胞系表达的PPRV N蛋白具有天然的N蛋白抗原性,为PPRV病原学诊断等相关研究奠定了基础。
李翠翠孙一瑞王子龙陈伟业步志高
关键词:小反刍兽疫核衣壳蛋白CHO细胞细胞系
重组新城疫病毒表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的研究被引量:2
2014年
为构建表达猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白(Cap)的重组新城疫病毒(NDV),本研究利用NDV La Sota弱毒疫苗株为活病毒载体,通过反向遗传操作系统构建出表达PCV2 Cap的重组病毒(r La-PCV2/Cap),以及表达删除核定位信号(NLS)的Cap(CapΔ41)的重组病毒(r La-PCV2/CapΔ41),并对外源蛋白的表达效果进行了检测。通过间接免疫荧光试验证明,两种重组病毒感染的BHK-21细胞中,PCV2 Cap蛋白以及删除NLS的CapΔ41蛋白均获得正确表达;其中,完整的Cap蛋白定位于核内,而删除NLS的CapΔ41蛋白则定位于胞浆中,本研究结果为研究新型PCV2疫苗奠定基础。
王子龙葛金英王云鹤于桂梅孙继国步志高
关键词:猪圆环病毒2型重组新城疫病毒CAP蛋白核定位信号
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