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电刺激诱导栉孔扇贝雌核发育的相关参数的筛选被引量：2: 2012年; 电刺激可诱导卵子雌核发育,但在海洋生物中尚无报道。为获得电刺激诱导栉孔扇贝雌核发育的最佳条件,采用正交设计的方法,分别研究了电场强度、电容、脉冲次数、卵子密度及缓冲液种类对诱导效果的影响。结果表明:(1)不同缓冲液的诱导效果差异不显著(P>0.05),但甘露醇缓冲液的诱导效果优于Zimmerman氏缓冲液和山梨醇缓冲液;最佳卵子密度为11.25×104个/mL,场强的最适范围为1.00～1.75kV/cm。最优电刺激诱导条件组合是:0.30mol/L甘露醇缓冲液,卵子密度11.25×104个/mL,脉冲强度1.20kV/cm,电容3μF,2次电脉冲。(2)应用优化后的电刺激参数诱导雌核发育,获得了最佳的诱导效果,得到的卵裂率为28.16%,胚胎存活率为98.37%。本研究首次成功应用电刺激法诱导了栉孔扇贝的雌核发育,并得到了单倍体胚胎,初步建立了栉孔扇贝中该诱导法的参数体系。; 商文聪赵泊淞陈亮孙妍张玲玲胡晓丽包振民; 关键词：栉孔扇贝雌核发育电刺激卵裂率胚胎存活率

栉孔扇贝BAC文库的构建及质量评价: 2013年; 本研究构建了栉孔扇贝3个BAC文库，分别为BamHI文库，HindⅢ文库和Sau3AI，其中BamHI文库包含34560个克隆，平均插入片段为98kb，未发现空载；HindⅢ文库包含132480个克隆，平均插入片段为106kb，空载率为1．67％；Sau3AI文库包含23040个克隆，平均插入片段为53kb，空载率为3．33％。3个文库总共由190080个克隆组成，平均插入片段为98kb，覆盖栉孔扇贝基因组的15．4倍。通过对随机挑选BAC克隆100代的继代培养，未发现插入片段的丢失或重排现象，说明所构建的BAC文库是稳定的。将所有克隆进行超级池及二级池的构建，筛选了3个基因及遗传图谱上的7个微卫星标记，阳性克隆数在6～18之间，表明这3个文库可以在目的基因或标记的筛选、物理图谱的构建及大规模基因组的测序中发挥重要作用。; 赵柏淞程洁陈亮于娜黄晓婷包振民; 关键词：栉孔扇贝 BAC文库基因组

人工诱导栉孔扇贝雌核发育胚胎的SNP标记分析被引量：2: 2014年; 利用紫外线照射灭活的同源精子，激活栉孔扇贝（Chlamys farreri）卵子分裂，获得雌核发育胚胎，流式细胞仪检测胚胎细胞平均单倍体率为82．5％。对获得的胚胎进行全基因组扩增，获得足量的基因分型模板，利用高分辨率溶解曲线（HRM）技术对其进行96个单核苷酸多态性（SNP）位点分型。结果显示，诱导雌核发育胚胎的位点检出率为96．27％，其中99．06％的位点分型结果与相应雌性亲本相符；单个胚胎中只表现一种等位形式的位点占91．67％～96．88％，平均为94．81％，较雌性亲本的纯合位点比例（64．25％）明显提高。本研究利用灭活同源精子诱导获得栉孔扇贝雌核发育胚胎，并利用单个胚胎的全基因组扩增产物进行基因位点分析，为扇贝人工诱导雌核发育个体的早期多基因位点检测和评价提供参考。; 陈亮赵柏淞李玲商文聪胡晓丽包振民; 关键词：栉孔扇贝雌核发育全基因组扩增单核苷酸多态性

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陈亮