赖丹
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：广东工业大学轻工化工学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：化学工程医药卫生理学更多>>
- 邻苯二甲酸二丁酯人工抗原的制备及免疫鉴定被引量：2
- 2016年
- 【目的】制备并鉴定1种新型邻苯二甲酸二丁酯人工抗原。【方法】以4-硝基邻苯二甲酸为原料,经过酯化、还原生成4-氨基邻苯二甲酸二丁酯(DBAP),DBAP再与戊二酸酐反应,衍生生成4-戊二酸单酰邻苯二甲酸二丁酯(DBCP)。将合成的半抗原衍生物DBCP通过活性酯法与牛血清蛋白(BSA)或卵清蛋白(OVA)偶联,得到人工抗原。通过免疫新西兰大白兔获得抗血清,经间接竞争酶联免疫法(ic ELISA)检测抗体特异性。【结果】经质谱、氢核磁共振谱图鉴定,半抗原衍生物合成成功,经紫外光谱、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫试验证实偶联成功,并计算得出DBCP与载体蛋白BSA和OVA的结合比分别为11∶1和17∶1。经ic ELISA法检测,兔1和兔2的血清效价均达到1∶128 000,IC50分别为301和308 ng·m L-1,反应特异性较好。【结论】半抗原衍生物的合成是方便、安全的。邻苯二甲酸人工抗原的成功制备使获得DBP多克隆抗体以及建立DBP免疫分析方法成为可能。
- 郑盛武赖丹赵肃清
- 关键词：邻苯二甲酸二丁酯人工抗原光谱
- 邻苯二甲酸二丁酯多克隆抗体的制备及其免疫分析研究
- 邻苯二甲酸二丁酯(DBP)(Fig.1)是一种重要的环境荷尔蒙物质,是塑化剂的一种,能使男性精子数量减少,生殖能力下降,影响婴幼儿健康成长,导致儿童性早熟。它主要用于塑料、橡胶、化妆品以及香料、印染、涂料等行业。由于国家...
- 赖丹郑盛武赵肃清
- 关键词：邻苯二甲酸二丁酯人工抗原抗体免疫酶联免疫法
- 文献传递
- 4种邻苯二甲酸酯塑化剂人工抗原的合成及免疫检测被引量：5
- 2016年
- 以4-硝基邻苯二甲酸为原料,衍生合成4种结构类似物,并分别通过重氮化法和活泼酯法与载体蛋白牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)和卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)偶联制得人工抗原。利用紫外光谱扫描和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electroporesis,SDS-PAGE)检测鉴定人工抗原,并用4种与BSA偶联的人工抗原作免疫原免疫新西兰大白兔。利用酶联免疫吸附实验(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)检测抗体灵敏度和特异性。经紫外光谱和SDS-PAGE证实人工抗原偶联成功,经免疫分析法检测抗体效价,4-氨基邻苯二甲酸二丁酯-BSA(dibutyl 4-aminophthalate-BSA,DBAP-BSA)抗体效价达到1∶64 000,4-戊二单酰邻苯二甲酸二丁酯-BSA(dibutyl 4-carboxylphthalte-BSA,DBCP-BSA)、4-氨基邻苯二甲酸二异丁酯-BSA(diisobutyl 4-aminophthalate-BSA,Di BAP-BSA)和4-氨基邻苯二甲酸二环己酯-BSA(dicyclohexyl 4-aminophthalate-BSA,DCHAP-BSA)抗体效价均达到1∶128 000。DBAP-BSA、DBCP-BSA、Di BAP-BSA和DCHAP-BSA分别对邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)、DBP、邻苯二甲酸二异丁酯(diisobutyl phthalate,Di BP)和邻苯二甲酸二环己酯(dicyclohexyl phthalate,DCHP)4种抗体的IC50值为0.305、0.268、0.104、0.247μg/m L。四者之间交叉反应率低,反应特异性较好。
- 赖丹郑盛武赵肃清
- 关键词：邻苯二甲酸酯人工抗原抗体
