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一种检测布鲁菌的LAMP核酸试纸条试剂盒及其应用: 本发明公开一种检测布鲁菌的LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下：首先配制LAMP反应体系，包含1倍反应缓冲液、链置换DNA...; 陈金顶常艳勾红潮邓洁汝王佳莹裴晶晶赵明秋; 文献传递

念珠菌病的流行病学新动态及防控措施被引量：7: 2011年; 念珠菌是一种条件致病菌,在自然界广泛存在,是人和动物的常住型寄生菌。在正常情况下,不会使机体发病。但在机体某些生理、病理因素影响下,会使感染菌的数量增多、毒力增强,在机体抵抗力/免疫力降低时,人畜就会发病。近年来,人类在医疗过程中大量使用抗生素、免疫抑制剂及皮质类固醇激素,以及医疗导管等高新技术的应用,导致念珠菌病呈明显上升趋势。本文对念珠菌病的病原学、流行情况、以及该病在人类和禽类的发病和防控方面进行了概述。; 赵明秋沈海燕潘文王佳莹李银光常艳; 关键词：念珠菌流行病学病原学防控措施

牛布鲁氏菌重组菌株S19-Δbp26-BL及其制备方法与应用: 本发明公开一种牛布鲁氏菌重组菌株S19-Δbp26-BL及其制备方法与应用。本发明以牛布鲁氏菌S19基因组DNA为模板，得到bp26基因的上游同源臂，BLS基因、L7/L12基因和bp26基因的下游同源臂；将前述基因片段...; 陈金顶王佳莹常艳赵明秋吴云燕; 文献传递

一种检测布鲁菌的LAMP核酸试纸条试剂盒及其应用: 本发明公开一种检测布鲁菌的LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下：首先配制LAMP反应体系，包含1倍反应缓冲液、链置换DNA...; 陈金顶常艳勾红潮邓洁汝王佳莹裴晶晶赵明秋; 文献传递

细菌耐药性产生的原因、机制及防治措施被引量：46: 2011年; 20世纪40年代青霉素的问世将人类带入了抗生素时代,抗感染治疗由此进入了新纪元,感染性疾病的病死率大大降低。半个世纪以来,人类一直把抗菌药物作为抗感染治疗最有力的武器。然而随着抗菌药物的广泛应用,感染性疾病的治疗又遇到了新的挑战——细菌对抗生素产生了耐药性,而此种耐药性表现为抗菌药物使用得越多耐药性亦变得越严重。目前已发现某些细菌对现有的几乎全部抗菌药物产生耐药,超级细菌的出现使人类有可能再次回到面临感染而无药可医的困境,控制细菌耐药性的增长已成为医学界乃至全人类的当务之急。正在逐渐建立自己的细菌耐药监测网络,监测细菌耐药的流行状况和规律,研究细菌产生耐药性的机制。; 赵明秋沈海燕潘文王佳莹李银光常艳; 关键词：细菌耐药性

牛布鲁氏菌重组菌株S19-Δbp26-BL及其制备方法与应用: 本发明公开一种牛布鲁氏菌重组菌株S19-Δbp26-BL及其制备方法与应用。本发明以牛布鲁氏菌S19基因组DNA为模板，得到bp26基因的上游同源臂，BLS基因、L7/L12基因和bp26基因的下游同源臂；将前述基因片段...; 陈金顶王佳莹常艳赵明秋吴云燕; 文献传递

布鲁氏菌bp26基因缺失株的构建被引量：17: 2011年; 选择含有反向筛选基因sacB标记的pRE112质粒为自杀载体,利用等位基因交换的方法成功敲除了布鲁氏菌弱毒疫苗S19株、S2株、M5株的bp26基因,构建了具有非抗性基因标记的缺失株S19-Δbp26、S2-Δbp26、M5-Δbp26。将构建的重组自杀质粒pRE-Δbp26(缺失了bp26基因的681个碱基)电转化入布鲁氏菌后,经过5μg/mL氯霉素筛选单交换子和70g/L蔗糖筛选同源重组双交换子,用菌落PCR及DNA测序的方法进行验证。结果表明,bp26基因的缺失改造成功,连续传20代后菌落PCR及DNA测序的结果显示突变株具有遗传稳定性。以pRE112自杀质粒为基础构建无抗性基因标记的布鲁氏菌缺失株为布鲁氏菌的基因功能研究奠定了基础,同时Δbp26缺失株的构建可为新型布鲁氏菌疫苗的研制奠定基础。; 潘文王佳莹赵明秋琚春梅易琳常艳虞红娇陈金顶; 关键词：布鲁氏菌基因缺失株

猪瘟病毒C株截短E2基因在大肠杆菌中表达及免疫原性初步检测被引量：4: 2014年; 本试验利用PCR技术,扩增得到猪瘟病毒(CSFV)C株E2基因的主要抗原片段A/D区549bp,将其酶切纯化后,与已酶切纯化的pET-32a进行16℃过夜连接,转化大肠杆菌BL21。从转化成功的氨苄培养板挑取合适菌落进行PCR,挑取目的条带正确的菌落加至LB培养基进行过夜培养后送测序。将测序正确的菌液划板,挑菌培养并用IPTG进行诱导表达。得到的蛋白进行SDS-PAGE,在约39ku位置有蛋白条带。将蛋白纯化后,分别利用自制兔抗CSFV阳性血清及临床检测阳性的猪抗CSFV阳性血清进行Western blotting检测,可见在39ku处有单一条带,表明表达的蛋白具有免疫原性。本试验结果为下一步ELSIA试剂盒的组装奠定基础,方便对猪场免疫猪群猪瘟抗体水平进行监控。; 郑仲华李东升姚俊庸常艳勾红潮刘文俊赵明秋毛晶丹陈金顶; 关键词：截短表达

布鲁菌bp26基因的表达与bp26-间接ELISA抗体检测试剂盒的研制被引量：1: 2013年; 为了研制布鲁菌bp26-间接ELISA抗体检测试剂盒,将布鲁菌bp26基因克隆至原核表达载体pET-32a(+),重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,以纯化后的重组蛋白bp26包被酶标板,优化ELISA反应条件,组装试剂盒。SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,重组蛋白分子质量约为41ku,经IPTG诱导后高效表达,且具有良好的免疫原性;优化试验确定重组抗原最佳包被浓度为3.6μg/mL,血清样本的阳性临界值为0.370;特异性试验结果表明,重组蛋白与牛结核菌、副猪嗜血杆菌、链球菌等多种病原体的阳性血清均无交叉反应;敏感性试验结果表明,血清稀释至1∶12800时,仍检测为阳性;该试剂盒的批内、批间变异系数均小于10%;用该试剂盒检测241份临床牛血清样本,并与试管凝集试验(SAT)检测结果比较,两者符合率为97.1%。原核表达的布鲁菌bp26具有良好的免疫原性,研制的布鲁菌bp26-间接ELISA抗体检测试剂盒敏感性、特异性和重复性较好,可为布鲁菌基因缺失标记疫苗的应用提供配套的血清学诊断方法。; 常艳王佳莹吴云燕郑仲华李东升陈金顶; 关键词：布鲁菌原核表达间接ELISA

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常艳