汪前
- 作品数：4 被引量：15H指数：2
- 供职机构：南京工业大学生物与制药工程学院更多>>
- 发文基金：江苏省“青蓝工程”基金国家自然科学基金预研项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 酶法合成γ－D－谷氨酰－L－色氨酸的方法
- 本发明涉及一种酶法合成γ－D－谷氨酰－L－色氨酸的方法，先将γ－谷氨酰转肽酶加入到由L－色氨酸8～50mmol/L和γ－D－谷氨酰胺5～35mmol/L组成的底物溶液中，在8小时以内，通过γ－谷氨酰转肽酶的转肽反应制备γ...
- 姚忠汪前荀志金徐虹韦萍
- 文献传递
- γ-谷氨酰转肽酶的酶学性质及其转肽反应机制被引量：13
- 2008年
- γ–谷氨酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase,GGT)能专一地催化γ-谷氨酰基的转移,在γ-谷氨酰基类衍生物的合成方面具有重要的应用价值。今利用Bacillus subtilis NX-2发酵生产GGT,上清液中的GGT经硫酸铵沉淀后,以DEAE Sepharose FF和Source15Q两步离子交换进行纯化。以γ-D-Gln-L-Trp(SCV-07)为目的产物,研究了GGT的基本酶学性质,确定了其最适反应温度为40℃,最适pH值10.0,供体/受体浓度为5:7,最适反应时间为4h,产物转化率可高达42%。结合反应进程曲线,分析了GGT的作用机制,并通过实验证实了GGT不仅具有转肽活性,还可催化产物的不可逆水解,这是导致产物回收率下降的关键原因。经测定得到GGT的转肽反应米氏常数(Km)为5.08mmol·L-1,最大反应速率(rmax)为0.034mmol·(min·L)-1;对γ-D-Gln-L-Trp的水解反应米氏常数(Km’)为2.267mmol·L-1,最大反应速率(rmax’)为0.012mmol·(min·L)-1。
- 汪前姚忠荀志金徐晓滢徐虹韦萍
- 关键词：Γ-谷氨酰转肽酶纯化
- 酶法制备γ-D-glutamyl-L-tryptophan的动力学模型被引量：5
- 2008年
- 以酶法合成γ-D-glutamyl-L-tryptophan(γ-D-Glu-L-Trp)为研究体系,采用D-谷氨酰胺为γ-谷氨酰基供体,L-色氨酸为受体,测定得到了转肽反应的米氏常数(Km)为5.11mmol.L-1,催化常数(Kcat)为3.92mmol.min-1,γ-D-Glu-L-Trp的水解反应米氏常数(K′m)为2.31mmol.L-1,催化常数(K′cat)为1.46mmol.min-1。采用顺序反应机制建立了酶法制备γ-D-Glu-L-Trp的过程动力学模型,并进行了参数优化。经验证,所建模型可准确预测该体系中的反应进程,模型数值解与实验值的平均相对误差小于5%。
- 汪前姚忠吴明刚荀志金周治徐虹韦萍
- 关键词：Γ-谷氨酰转肽酶动力学模型
- 酶法合成γ-D-谷氨酰-L-色氨酸及其反应动力学研究
- γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase，GGT)可将谷氨酰基从酰基供体催化转移至相应的氨基酸或二肽上，形成新的含γ-肽键的化合物。目前，利用GGT制备系列谷氨酰基化合物的研究已成为国内外生物催...
- 汪前
- 关键词：反应动力学酶学性质抗结核药物
