徐俊锋 作品数:126 被引量:306 H指数:10 供职机构: 浙江省农业科学院 更多>> 发文基金: 浙江省自然科学基金 国家自然科学基金 浙江省公益性技术应用研究计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 医药卫生 更多>>
转g10-epsps基因耐除草剂大豆ZUTS-33转化体特异性检测方法的建立 被引量:2 2020年 转g 10-epsps基因耐除草剂大豆ZUTS-33是由浙江大学研发的耐除草剂大豆品系,目前已进入生产性试验阶段。到目前为止尚无文献报道对该转基因新品种的检测方法,因此亟需建立精准的定量检测方法为农业转基因生物安全管理提供技术支持。根据耐除草剂大豆ZUTS-33品系外源基因插入位点特异序列设计引物和TaqMan探针,利用优化的实时荧光定量PCR检测方法评价该引物对和探针的特异性、准确度、精确度和重复性,并确定此检测方法的检测极限(limit of detection,LOD)和定量极限(limit of quantity,LOQ)。实验结果显示,研究所建立的转基因大豆ZUTS-33转化体特异性实时荧光定量PCR检测方法具有高度的品系鉴定特异性,准确度、精确度均符合要求,重复性较好,且检测方法的LOD达到20拷贝,LOQ达到40拷贝。研究结果为转g 10-epsps基因耐除草剂大豆ZUTS-33的身份识别和检测监测提供了有效的方法。 缪青梅 赵杨 徐晓丽 徐俊锋 汪小福 陈笑芸关键词:转基因大豆 实时荧光定量PCR 肉类及肉制品中动物源性成分鉴别方法研究进展 被引量:10 2020年 肉类掺假问题直接影响着人类健康、公共卫生安全以及社会稳定等方面,成为当今食品安全热点话题之一,因此,高效、精确的肉类及肉制品中动物源性成分的检测鉴定势在必行。基于此,主要介绍了对于动物源性成分检测及鉴别的不同研究方法,分析了利弊,并对后续肉类及肉制品中动物源性成分的鉴别方法的研发方向进行了展望,以期为此领域提供资料性参考。 纪艺 陈笑芸 丁霖 汪小福 彭城 徐晓丽 徐俊锋关键词:ELISA 近红外光谱 基因组编辑技术及其检测鉴定方法研究进展 被引量:1 2019年 基因编辑技术指能够对目标基因进行编辑,实现对特定DNA片段的敲除、加入等技术。目前,该技术主要包括锌指蛋白系统、转录激活因子样效应核酸酶系统和成簇的规律间隔短回文重复序列系统,基本原理都是通过序列特异性核酸酶特异切割DNA靶位点,产生DNA双链断裂,诱导DNA的损伤修复机制,从而实现对指定基因组的定向编辑。本文概述了3种基因编辑技术的原理,对它们的优缺点进行比较,并阐述了CRISPR基因编辑技术在动物和植物育种中的应用,以及基于CRISPR技术的DNA分子检测新方法的建立和应用。其次,阐述了对CRISPR等基因编辑产品筛选和检测鉴定的方法,比较了几种筛选方法的检测周期、灵敏性、人工成本等。最后,对基因编辑技术的发展前景进行了展望。 丁霖 彭城 殷海军 陈笑芸 徐俊锋 李玥莹一种基于ddPCR检测CRISPR/Cas诱导的基因突变和基因编辑频率的方法 本发明提供了一种基于ddPCR检测CRISPR/Cas诱导的基因突变和基因编辑频率的方法。所述方法包括根据CRISPR/Cas靶序列的突变位置,设计一对变异位点特异性PCR扩增引物和变异位点特异性探针,以及一对内源参考基... 彭城 徐俊锋 丁霖 陈笑芸 汪小福文献传递 肉制品中是否掺杂有鸡肉的RPA-MNAzyme检测方法 本发明公开了肉制品中是否掺杂有鸡肉的RPA‑MNAzyme检测方法。本发明首先提供了用于扩增鸡Cytb基因的RPA引物以及用于特异性识别RPA扩增鸡Cytb基因产物的多组分核酸酶;在此基础上,本发明建立了一种肉制品中是否... 汪小福 徐俊锋 彭城 陈笑芸 徐晓丽 魏巍 杨蕾沙门氏菌特征显色液体培养基、其制备方法及沙门氏菌快速检测方法 本发明涉及食品微生物安全监测领域,公开了沙门氏菌特征显色液体培养基、其制备方法及沙门氏菌快速检测方法。沙门氏菌特征显色液体培养基的主要成分是:胰蛋白胨、酵母粉、氯化钠、氯化锂、去氧胆酸钠、磷酸氢二钾、组合抑制剂、组合促进... 张巧艳 周育 徐俊锋文献传递 美国转基因产品的管理模式 被引量:4 2011年 从转基因管理机构及其责任、管理方式、管理依据等方面对美国的转基因管理状况进行了详细的分析阐述。美国转基因产品安全管理着重于上市前的安全评价,对安全评价的每一过程进行详细记录以增加其可追溯性,对销售中的转基因食品没有规定强制性标识法规。 厉建萌 刘信 沈平 宋贵文 赵欣 徐俊锋关键词:转基因产品 一种用于检测转基因大豆g10evo-epsps基因的数字PCR方法 本申请涉及生物检测技术领域,尤其涉及一种用于转基因大豆g10evo‑epsps基因检测的数字PCR方法。该方法包括如下的步骤:1)提取转基因大豆基因组DNA;2)在微滴生成卡中加入PCR体系和微滴生成油生成微滴,将生成的... 陈笑芸 徐晓丽 纪艺 寿惠霞 王鹏飞 缪青梅 汪小福 徐俊锋文献传递 不同植物DNA条形码对铁皮石斛鉴定能力的评价 被引量:7 2021年 为选择适合准确鉴定铁皮石斛的DNA条形码,以25份铁皮石斛样品和10份其他不同种类石斛为实验材料,利用目前常用的9条植物DNA条形码(ITS2、nad1、matK、ycbL、psbK-psbI、trnL-trnF、trnG-trnS、rbcL和trnH-psbA)对这些石斛材料进行分子鉴定。结果显示,9条DNA条形码的扩增率和测序成功率均很高,通用性很强。其中,rbcL与trnH-psbA的种内最大遗传距离大于种间最小遗传距离,不符合条形码的基本要求,其余条形码遗传距离均符合种内最大遗传距离小于种间最小遗传距离的要求。种间变异顺序为ITS2>trnL-trnF>trnG-trnS>psbK-psbI>ycf1b>matK>nad1,其中ITS2的进化速率最快,变异率最高(25.1%)。ITS2和trnL-trnF对本实验中石斛材料的分辨率达到90.1%,建议ITS2+trnL-trnF作为铁皮石斛种质资源鉴定的DNA条形码。本研究为利用DNA条形码技术鉴别铁皮石斛及其近源种石斛提供了参考和分子依据。 陈文强 汪小福 陈笑芸 彭城 徐俊锋 蔡健关键词:铁皮石斛 DNA条形码 分子鉴定 一种CRISPR/SpRY的检测体系及其检测基因突变的方法 本发明提供了一种CRISPR/SpRY的检测体系及其检测基因突变的方法,属于基因编辑技术领域。所述检测体系包括以下含量的成分:0.5ng/μL SpRY蛋白2~3μL和650ng/μL sgRNA2.5~3.5μL。本发... 彭城 徐俊锋 苏志勋 汪小福 陈笑芸 丁霖 鲁宇文