周立民
- 作品数：10 被引量：5H指数：2
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省重点科技创新团队项目浙江省中医药科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生建筑科学更多>>
- Junctophilin 1在小鼠胚胎干细胞定向分化心肌细胞及大鼠胚胎心肌发生中的表征被引量：2
- 2012年
- 目的:评价膜连接蛋白Junctophilin 1(JP1)亚型在哺乳动物心肌发生过程中,基因转录和蛋白表达特征,为心肌发育生物学及心脏再生医学相关生命现象本质提供实验依据。方法:小鼠胚胎干(embryonic stem,ES)细胞相继制成单细胞悬液和悬滴,收集拟胚体转至培养皿中悬浮分化培养。每隔2 d收集细胞供分子生物学评价,并于心肌分化成熟期(第17天),免疫荧光成像原位检测JP1与心肌小节蛋白α-Actinin和Troponin-T是否呈共表达,流式细胞术定量确认JP1阳染率。另以大鼠胎心为研究对象,大鼠受精后第14天起,每隔2 d取胎心直至分娩新生鼠,供RT-PCR和免疫印迹实验用。结果:ES细胞分化过程中,JP1在基因转录层面全程表达,至第11天达高峰。蛋白层面呈一过性表达,在第9天达高峰,此后迅速下降,至分化培养第15天消失,分化成熟期未见表达。大鼠胎心表达趋势与ES细胞分化过程基本一致,但JP1蛋白表达持续在出生后。在分化终端,流式细胞术显示JP2和肌小节蛋白双染率达16.59%,而未见JP1阳染细胞。结论:JP1基因在小鼠ES细胞定向分化心肌细胞全程均有转录,但JP1仅在分化早期有一过性表达。大鼠胎心JP1表达趋势与ES细胞分化过程基本相一致。
- 梁星光吴博文张维晨周立民朱丹雁楼宜嘉
- 关键词：连接蛋白类定向分化大鼠胚胎
- 代谢型谷氨酸受体4在ES细胞体外分化为心肌细胞中的表达研究被引量：2
- 2012年
- 目的:探索代谢型谷氨酸受体4(metabotropic glutamate receptor 4,mGluR4)在小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES细胞)体外分化为心肌细胞中的表达情况。方法:采用悬滴培养法,体外诱导ES细胞分化为心肌细胞,分别以维甲酸(retinoic acid,RA)和溶剂二甲亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)作为阳性对照和阴性对照;利用免疫荧光法和流式细胞术,鉴定ES细胞衍生心肌细胞团中心肌特异性蛋白α-actinin/Troponin-T和mGluR4共表达情况;用Western Blot法,考察ES细胞定向分化为心肌细胞过程中mGluR4蛋白表达水平;同时观察了小鼠胚胎心脏发育过程中mGluR4基因和蛋白表达变化。结果:ES细胞及其分化来的早期心肌细胞团均表达mGluR4,随着心肌细胞逐渐成熟,mGluR4蛋白表达水平下调。流式细胞术结果显示,贴壁分化11 d的细胞团中mGluR4与心肌特异性蛋白Troponin-T共表达细胞比率仅为(3.00±1.00)%。同时,小鼠胚胎心脏发育过程中mGluR4基因和蛋白表达也呈下降趋势,直至成体小鼠心脏中不表达mGluR4蛋白。结论:ES细胞体外分化为心肌细胞过程中mGluR4有表达并呈下调趋势,与小鼠体内心脏发育过程中mGluR4表达情况基本一致。
- 郑蓓周立民赵青威张幸国朱丹雁
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞
- miR-126-Rac1/p67phox信号在淫羊藿苷促小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞中的关键作用研究
- 胚胎干(embryonic stem, ES)细胞是能在体外自我更新并具有多分化潜能的细胞,可分化为功能性心肌细胞,应用于心脏发育生理学、心脏病理学及新药发现等研究。本课题前期研究发现淫羊藿苷(icariin, ICA)...
- 周立民
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞RAC1胎肝激酶-1淫羊藿苷
- 文献传递
- 干细胞分化为睾丸间质细胞模型的构建及应用
- 本发明提供一种构建胚胎干细胞定向分化为睾丸间质细胞模型的方法，是将类固醇生成因子1和促黄体生成激素受体质粒共转染入ES细胞，然后用化合物或生长因子诱导ES细胞定向分化为睾丸间质细胞。本发明在细胞层面上对干细胞体外定向分化...
- 朱丹雁葛仁山楼宜嘉张莹莹周立民崔荣张翔南
- miR-126-Racl/p67phox信号在淫羊藿苷促小鼠胚胎干细胞分化为心肌细胞中的关键作用研究
- 胚胎干(embryonic stem，ES)细胞是能在体外自我更新并具有多分化潜能的细胞，可分化为功能性心肌细胞，应用于心脏发育生理学、心脏病理学及新药发现等研究。本课题前期研究发现淫羊藿苷（icariin，ICA）能够...
- 周立民
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞信号调控
- 心肌细胞蛋白质差异表达图谱的构建与应用
- 本发明提供药物诱导干细胞定向分化时蛋白质差异表达图谱的构建方法，具体构建了ICA诱导干细胞定向分化为心肌细胞的蛋白质差异表达图谱，通过建立药物诱导干细胞定向分化为心肌细胞模型，制备二维电泳蛋白质样品，双向凝胶电泳，图像采...
- 朱丹雁楼宜嘉李欢张翔南周立民梁星光
- 文献传递
- 干细胞分化为睾丸间质细胞模型的构建及应用
- 本发明提供一种构建胚胎干细胞定向分化为睾丸间质细胞模型的方法，是将类固醇生成因子1和促黄体生成激素受体质粒共转染入ES细胞，然后用化合物或生长因子诱导ES细胞定向分化为睾丸间质细胞。本发明在细胞层面上对干细胞体外定向分化...
- 朱丹雁葛仁山楼宜嘉张莹莹周立民崔荣张翔南
- 文献传递
- 谷氨酸受体5在胚胎干细胞定向分化为心肌细胞的用途
- 本发明提供以代谢型谷氨酸受体5为靶点，利用干细胞定向分化为心肌细胞模型，构建以mGluR5为调节靶点的筛选与评价模型，从而进行筛选和评价促进干细胞分化为心肌细胞的诱导分化剂或调节剂。本发明明确了mGluR5在胚胎干细胞分...
- 朱丹雁周立民崔荣张莹莹楼宜嘉张翔南梁星光
- 文献传递
- MIR--126--RACL/P67PHOX信号在淫羊藿苷促小鼠胚胎干细胞分化为心股细胞中的关键作用研究
- 周立民
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- 大型柱状构件耐火试验炉电液伺服加载系统研究
- 一直以来，火灾防控是人类的艰巨任务，建筑构件的耐火性能和承载能力是结构工程领域里的一个重点难题。本文以大型柱状构件耐火试验炉的电液伺服加载系统为研究对象，通过对系统存在的非线性性，复杂的干扰等特性的研究，建立了系统的数学...
- 周立民
- 关键词：电液伺服
- 文献传递
