- GATA2与Smad4相互作用对TGFβ信号通路负调控的初步研究
- GATA2属于锌指类转录因子GATA家族成员之一。该蛋白广泛表达于造血干细胞/(HSCs/),参与调控HSCs增殖、分化与自我更新等生理功能。TGFβ信号通路是参与细胞生长、分化、增殖及肿瘤生成等多种生理病理学过程的重要...
- 蒋易楠
- 关键词：TGF-Β信号通路转录抑制慢病毒
- 文献传递
- GATA2分子RNAi慢病毒颗粒的包装制备及表达研究
- 2011年
- 目的制备GATA2分子慢病毒干涉颗粒,建立GA-TA2表达下调的K562稳定细胞系。方法采用第3代慢病毒包装系统,将携带特异性干涉GATA2的DNA序列克隆入穿梭质粒PsicoR中,转染K562细胞,Western blot法检测对内源性GATA2干涉效果。在脂质体介导下,siGATA2质粒同包装质粒plP1、plP2、pl/VSVG共同转染HEK 293T细胞,获得慢病毒干涉颗粒,感染K562细胞,检测干涉效果。结果构建的重组质粒经酶切,测序鉴定结果正确,并有干涉效果。该重组质粒与包装质粒共同转染HEK293T细胞,获得干涉慢病毒并利用该病毒建立稳定表达的siGATA2-K562细胞系,经Western blot鉴定,稳定细胞系的内源性GATA2表达下调。结论成功制备siGATA2干涉病毒颗粒并构建si-GATA2-K562稳定细胞系,为后续实验奠定基础。
- 蒋易楠李长燕詹轶群杨晓明汪思应
- 关键词：RNA干扰慢病毒属
