田洪成
- 作品数：15 被引量：34H指数：4
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- α-硫辛酸对小鼠卵巢颗粒细胞氧化应激损伤和凋亡的影响被引量：4
- 2016年
- 目的探讨α-硫辛酸对小鼠颗粒细胞培养过程中抗氧化水平和抗凋亡水平的影响。方法收集经PMSG处理的小鼠卵巢颗粒细胞,经原代培养24h后,添加终浓度为100μmol/L的α-硫辛酸继续培养24h,测定氧化水平SOD、MDA和GSH-Px参数,评价抗氧化能力,采用Trizol法提取各组细胞的RNA,进行RT-PCR法检测α-硫辛酸对caspase-3和caspase-9基因的表达情况的影响,同时利用细胞免疫荧光和ELISA法检测caspase-3和caspase-9蛋白表达,并分析α-硫辛酸降低细胞凋亡的作用。结果分离培养的小鼠卵巢颗粒细胞α-硫辛酸添加后,SOD和GSH-Px活性升高,MDA含量降低(P<0.05);经过RT-PCR扩增技术获得长度为180bp的特异性caspase-3产物,获得长度为152bp的特异性caspase-9产物,α-硫辛酸添加可显著性降低caspase-3和caspase-9mRNA的表达(P<0.05);免疫荧光细胞化学染色显示颗粒细胞caspase-3和caspase-9蛋白阳性染色定位于细胞胞质,分别呈现绿色荧光和红色荧光,细胞核呈蓝色荧光;ELISA结果显示α-硫辛酸添加后caspase-3和caspase-9酶活性显著下调(P<0.05)。结论小鼠颗粒细胞培养过程中添加α-硫辛酸可明显改变细胞抗氧化能力,对卵巢颗粒细胞培养过程中的氧化应激诱导的细胞凋亡起到一定的保护作用。
- 马会明张永芳王蒙蒙李昕王永峰田洪成裴秀英王燕蓉
- 关键词：Α-硫辛酸氧化应激卵巢颗粒细胞小鼠
- 高温对小鼠生殖细胞的影响被引量：4
- 2015年
- 目的探讨热处理对小鼠睾丸生殖细胞的影响。方法雄性C57小鼠18只,随机分为对照组和热处理组,热处理组小鼠睾丸在43℃水浴中干预15min,于处理后1、7和14d统计分析小鼠睾丸的器官指数、HE染色方法观察结构形态、免疫组化方法检测精原干细胞的特异性标记物(PLZF),SCP-3阳性的生殖细胞的定位及细胞数量的变化。结果热处理后第1d热处理组与对照组睾丸器官指数比较差异无统计学意义(P>0.05),第7、14天热处理组均明显低于对照组(P均<0.05);HE染色可见,热处理组与对照组相比,热处理后第1天,生精细胞层数紊乱,细胞排列松散,散落在曲细精管中,第7天,曲细精管排列疏松,生精细胞明显减少,精子细胞及精子显著减少甚至消失,第14,小鼠睾丸曲细精管排列较为紧密,生精细胞数量增加,生精细胞层数增多;免疫组化可见,与对照组相比第1、7d热处理组SCP-3阳性的精母细胞明显减少,第14天精母细胞数量开始恢复,PLZF阳性的精原干细胞第1天热处理组有减少,第7天热处理组精原干细胞明显增多,第14d基本恢复正常。结论小鼠睾丸热处理所致生精障碍具有可复性。
- 田洪成马良宏马会明苏芹田稼马文智
- 关键词：睾丸生殖细胞
- PTEN、PIK3CA在前列腺癌组织中的表达及其临床意义被引量：2
- 2016年
- 目的探讨抑癌基因PTEN及癌基因PIK3CA在人前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学染色的方法检测40例前列腺癌和40例良性前列腺增生石蜡组织中PTEN蛋白和PIK3CA蛋白的表达水平;应用实时荧光定量PCR法及Western blot法检测15例新鲜前列腺癌组织和15例新鲜良性前列腺增生组织中PTEN和PIK3CA基因m RNA及蛋白的表达水平。结果 (1)免疫组化结果显示,PTEN蛋白在前列腺癌组中表达的阳性率(35.0%)低于良性前列腺增生组(90.0%)(P<0.01);前列腺癌组和良性前列腺增生组患者的PIK3CA蛋白表达阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)术前PSA水平<20 ng·m L-1、病理分级为G1+G2级、临床分期为Ⅱ期以及无远处转移的前列腺癌患者PTEN蛋白的阳性表达率更高(P<0.05),PTEN蛋白与前列腺癌术前PSA水平(r=-0.471)、病理分级(r=-0.313)、临床分期(r=-0.348)以及是否远处转移(r=-0.424)均呈负相关(P<0.05)。(3)实时荧光定量PCR和Western blot检测显示,良性前列腺增生组PTEN m RNA相对表达量和PTEN蛋白表达量均高于前列腺癌组(P<0.05);两组PIK3CA m RNA相对表达量和PIK3CA蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PTEN的低表达与前列腺癌的生物学行为密切相关,PTEN的表达水平对判断前列腺癌的分期及预后有重要的参考价值。
- 马良宏张强田洪成刘政李培军裴秀英王燕蓉
- 关键词：前列腺癌良性前列腺增生PTENPIK3CA
- 单次热应激处理对小鼠睾丸生精细胞的影响被引量：11
- 2016年
- 目的:探讨单次热应激对小鼠睾丸生精功能可复性研究。方法:C57雄性小鼠36只,随机按1、7、14 d各分为对照组(n=6)和热应激组(n=6)。热应激组和对照组小鼠下腹部分别在43℃和25℃水浴中干预15 min,于处理后1、7、14 d取材。计算睾丸器官指数,HE染色观察睾丸组织结构变化,免疫组化染色检测早幼粒白血病锌指蛋白(PLZF)和联会复合体蛋白3(SCP-3)在睾丸组织中的定位及表达,Western印迹检测PLZF蛋白表达水平。结果:热应激组小鼠睾丸器官指数明显低于对照组(P<0.01)。HE染色可见,热应激组与对照组相比,热应激后第1天生精细胞排列松散,散落在生精小管中;第7天生精小管萎缩,排列疏松,生精细胞明显减少;第14天生精小管排列较为紧密,生精细胞数量增加,生精细胞层数增多。与对照组相比第1、7天热应激组SCP-3标记的精母细胞明显减少,第14天精母细胞数量开始恢复。Western印迹检测结果显示,PLZF蛋白在热应激处理后1 d表达量显著降低(0.19±0.02 vs 0.64±0.03,P<0.01),第7、14天又迅速增加(0.77±0.02、0.77±0.02),且显著高于对照组(P<0.01)。结论:小鼠睾丸热应激处理后可致生精功能发生障碍,随着时间的推移,这种损伤具有可复性。
- 马文智田洪成马会明杨晓霞裴秀英王燕蓉马良宏
- 关键词：生精功能可复性
- PI3K抑制剂LY294002对前列腺癌PC-3细胞增殖与凋亡的影响
- 2016年
- 目的研究PI3K信号通路抑制剂2-（4-吗琳基）-8-苯基-4氢-1-苯并吡喃-4-酮（LY294002）对前列腺癌PC-3细胞增殖与凋亡的影响。方法将不同浓度的LY294002（20~40μmol/L）作用于体外培养的前列腺癌PC-3细胞24 h和48 h,用MTT比色法测定LY294002对前列腺癌细胞增殖的影响,流式细胞仪测定细胞凋亡情况,采用划痕实验及Transwell小室实验测定细胞侵袭和转移能力。结果不同浓度LY294002分别作用于PC-3细胞24 h、48 h,PC-3细胞存活率明显呈下降趋势,其中20μmol/L浓度下细胞存活率分别为（68±2）%、（45±1）%,40μmol/L浓度下细胞存活率分别为（48±2）%、（20±1）%。PC-3细胞经LY294002分别作用24 h、48 h后,细胞周期阻滞于G1期,G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,细胞有明显凋亡,并呈现时间和剂量依赖性（P〈0.05）,其侵袭和转移能力受到抑制。结论 LY294002可显著抑制体外培养的前列腺癌PC-3细胞生长增殖,诱导其凋亡,抑制其侵袭和转移能力。
- 马良宏强紫阳田洪成刘政李培军陈福宝裴秀英王燕蓉
- 关键词：前列腺癌磷脂酰肌醇3-激酶
- 环磷酰胺致大鼠膀胱黏膜P53/P21表达下调诱导膀胱肿瘤发生的研究被引量：1
- 2015年
- 目的探讨环磷酰胺(CTX)诱导膀胱肿瘤的机制。方法 SD大鼠12只,随机分为两组,处理组和对照组各6只。处理组大鼠给与环磷酰胺100mg/kg腹腔注射,对照组给与同等剂量的生理盐水腹腔注射;24h后取膀胱,采用HE染色观察形态结构的变化,采用免疫组织化学方法检测KI67、P53、P21的表达定位,采用Western blot的方法检测KI67、P53、P21的蛋白表达量,并进行数据统计。结果 CTX处理组膀胱出现明显的水肿、出血、粘连;HE染色可见,膀胱黏膜弯曲减少、肿胀,细胞排列疏松,膀胱黏膜呈现毛刺样改变;免疫组织化学染色可见KI67/P53/P21在膀胱黏膜上皮细胞表达;Western blot检测及数据统计可知,KI67蛋白在CTX组表达高于对照组(P<0.05);P53/P21蛋白表达在CTX组低于对照组(P<0.05)。结论环磷酰胺可降低膀胱黏膜P53/P21蛋白的表达,诱导膀胱肿瘤的发生。
- 田洪成马良宏马会明马文智马璐李苗苗李培军裴秀英王燕蓉
- 关键词：环磷酰胺P53P21膀胱肿瘤
- 热应激对生精细胞影响机制的研究进展被引量：3
- 2017年
- 精子的形成是一个极其复杂的过程,热应激引起生精障碍的因素又是多种多样,本文拟综述热应激诱导生精细胞凋亡、生精细胞DNA完整性的破坏、HSP在热应激诱导生精障碍中的作用以及热应激诱导生精细胞微环境变化,并展望今后的研究方向。
- 田洪成马志芳杨波陈予军马良宏马文智
- 关键词：精子形成热应激生精细胞
- 单次热应激对小鼠睾丸雄激素受体的影响被引量：3
- 2016年
- 目的探讨单次热应激对小鼠睾丸雄激素受体(AR)的影响。方法将6周龄C57雄性小鼠24只分为对照组(6只)和热应激处理组(18只)。小鼠睾丸热应激处理组给予单次43℃水浴,干预15 min,于1 d、7 d和14 d取睾丸,用免疫组织化学染色检测雄激素受体蛋白在睾丸组织中的定位及变化,蛋白印迹(Western Blot)检测睾丸中雄激素受体蛋白的表达,并进行统计学分析。结果免疫组织化学检测显示,AR定位在细胞的细胞核,在曲细精管的基底膜处以及间质细胞中表达,在第14天表达最强;Western blot检测显示,与对照组相比,热应激后雄激素受体蛋白的表达随着时间推移不断增多,且组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论小鼠睾丸经43℃水浴单次热应激15 min后,雄激素受体蛋白表达对生精细胞恢复有保护作用。
- 田洪成马良宏马会明杨晓霞耿芝马文智裴秀英王燕蓉
- 关键词：热应激小鼠睾丸雄激素受体
- 单次热应激对小鼠睾丸增殖细胞的影响被引量：2
- 2015年
- 目的明确单次热应激对小鼠睾丸增殖细胞的影响。方法 6周龄雄性C57小鼠36只,随机分为热处理组和对照组。小鼠热处理组单次43℃水浴,干预15 min,于1、7和14 d取材,HE染色观察睾丸结构形态,免疫组织化学染色检测增殖细胞定位及变化,Western Blot检测Ki67蛋白表达,并进行统计学分析。结果应激处理组生精小管排列疏松,曲细精管中细胞数量明显减少甚至消失,细胞散落在曲细精管中;免疫组化可见,增殖细胞呈现动态变化过程,单次热应激处理后1 d增殖细胞显著减少,第7、14天增殖细胞数量开始慢慢恢复;Western Blot可见KI-67表达量在热应激处理后7 d表达量显著降低,第14天表达量慢慢恢复,且各组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论小鼠睾丸经43℃水浴单次热应激15 min后,增殖细胞的动态恢复是后期精子生成的结构基础。
- 田洪成马文智马会明蒲静杨晓霞张永芳王永峰王蒙蒙李昕马良宏裴秀英王燕蓉
- 关键词：热应激睾丸增殖细胞
- 环磷酰胺致大鼠膀胱黏膜损伤及E-cadherin表达下调被引量：2
- 2016年
- 目的探讨E-cadherin在环磷酰胺处理后膀胱黏膜中的作用。方法 SD大鼠12只,随机分为处理组和对照组,处理组大鼠给与环磷酰胺100mg·kg^(-1)腹腔注射,对照组给与同等剂量的生理盐水腹腔注射,24h后取膀胱,观察形态变化,检测E-cadherin mRNA表达水平、表达量。结果肉眼观处理组膀胱出现明显的水肿、出血、粘连;HE染色可见,膀胱黏膜弯曲减少、肿胀,上皮细胞层次减少,上皮变薄,膀胱黏膜呈现毛刺样改变;免疫组化可见,E-cadherin只表达在膀胱黏膜,处理组表达低于对照组;Real-time PCR与Western blot结果可见,E-cadherin mRNA与蛋白的表达量处理组均低于对照组(P<0.05)。结论大鼠腹腔注射环磷酰胺致上皮细胞严重损伤,E-cadherin在膀胱黏膜中表达下调。
- 张强田洪成马会明马文智耿芝马良宏裴秀英王燕蓉李培军
- 关键词：环磷酰胺出血性膀胱炎E-CADHERIN下调
