- D38R突变对细菌视紫红质光循环后半程M态和N态的影响
- 2006年
- 用重叠PCR的方法,定点突变细菌视紫红质(bacteriorhodopsin,BR),克隆到单突变体BRD96N和双突变体BRD38R/D96N的基因,同源转化盐沼盐杆菌(Halobacterium salinarium)L33(BR-),表达突变蛋白BRD96N和BRD38R/D96N.通过显微视频方法对突变BR的M态光致变色特性进行记录,BRD38R/D96N的M态寿命为5 s,约为BRD96N(M态寿命为3 s)的1.7倍.对突变体的激光共聚焦拉曼光谱测定发现,在BRD96N中,1 170 cm-1下移到1 171cm-1,1 258 cm-1上移到1 255 cm-1,而BRD38R/D96N中1 170 cm-1下移到1 173 cm-1;1 258 cm-1上移到1 252 cm-1,而且BRD38R/D96N与BRD96N相比,1 186 cm-1处的峰明显增强.近紫外区圆二色谱显示,两种突变体近紫外区的正负带虽然没有太大差别,但288 nm和290 nm处的极峰却差别显著.所有这些研究结果表明,细菌视紫红质Asp38(D38)突变为Arg(R)可以延长其光循环后半程M态和N态的寿命.
- 王友亮金卫华曹军卫姚保利雷铭
- 关键词:细菌视紫红质重叠PCR光循环
- BR分子突变体O640中间态及质子泵功能的研究
- 细菌视紫红质(bacteriorhodopsin,BR)分子吸收光能后,形成一系列的中间态, 包括K,L,M,N,O。其中O态经光照出现含P和Q态的一个分支,称为分支光循环。分支光循环及其中间态P和Q为BR蛋白用于3D存...
- 金卫华宋景娇王友亮钟声张悦曹军卫胡坤生
- 文献传递
- 细菌视紫红质多突变体结构变化与中间态寿命的研究
- 金卫华
- 关键词:细菌视紫红质突变体共振拉曼光谱PVA
- 细菌视紫红质多位点突变基因和蛋白质及制备方法和应用
- 本发明公开了一种细菌视紫红质多位点突变基因和蛋白质及制备方法和应用,其特征是SEQ ID No.1所示的核苷酸和SEQ ID No.2所示的氨基酸序列,步骤是A.bop基因的定点突变的引物设计,B.bop<Sub>G61...
- 曹军卫金卫华
- 文献传递
- 细菌视紫红质多重突变体结构变化及其中间态的寿命
- 2007年
- 采用基因定点突变的方法,构建了细菌视紫红质(Bacteriorhodopsin,BR)的3种突变体蛋白,即单突变体BRE194Q、三突变体BRI119T/T121S/A126T和四突变体BRI119T/T121S/A126T/E194Q.测定了突变体和野生型BR在水溶液和聚乙烯醇(PVA)膜中的紫外-可见吸收光谱和拉曼光谱,采用显微视频录像技术记录了PVA膜中野生型和3个突变体样品的M态寿命.与野生型BR相比较,在水溶液中,单突变体的可见吸收光谱的最大吸收峰发生了轻微红移,三突变体和四突变体的最大吸收峰则分别发生了11.0和12.0 nm的明显蓝移.在PVA膜中,3个突变体BR的可见吸收光谱的最大吸收峰均发生蓝移,四突变体BR的最大吸收峰为557 nm,蓝移达15.0 nm.四突变体BR在水溶液中的共振拉曼光谱不仅表现有与M态特征相关的1567和1573 cm-1谱带,还有L态特征带1334 cm-1及N态特征带1200,1328,1530和1549 cm-1.在PVA膜中的样品与在水溶液中的比较,四突变体共振拉曼光谱的1334和1549 cm-1带消失,同时1187 cm-1带的强度下降.显微视频录像技术记录的PVA膜中样品的M态寿命表明,野生型BR的M态寿命最短,单突变体的M态寿命小于1.0 s,三突变体的寿命为3.0 s,四突变体的寿命为2.0 s.
- 金卫华曹军卫王友亮熊贵光姚保利雷铭
- 关键词:细菌视紫红质突变体共振拉曼光谱聚乙烯醇
- 细菌视紫红质多突变体的构建及其功能研究
- 采用基因定点突变的方法,构建了细菌视紫红质(BR)的三种突变体蛋白,单突变BRE194Q、三突变BRI119T/T121S/A126T和四突变BRI1119/T121S/A126T/E194Q,测定了突变体和野生型BR(...
- 金卫华曹军卫姚保利雷铭
- 关键词:细菌视紫红质突变体共振拉曼光谱PVA
- 文献传递
- 细菌视紫红质多位点突变基因和蛋白质及制备方法和应用
- 本发明公开了一种细菌视紫红质多位点突变基因和蛋白质及制备方法和应用,其特征是SEQ ID No.1所示的核苷酸和SEQ ID No.2所示的氨基酸序列,步骤是A.bop基因的定点突变的引物设计,B.bop<Sub>G61...
- 曹军卫金卫华
- 文献传递