郭军庆
- 作品数：21 被引量：74H指数：5
- 供职机构：河南省动物免疫学重点实验室更多>>
- 发文基金：浙江省科技攻关计划国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪圆环病毒1型和2型Rep蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化被引量：2
- 2007年
- 分别以猪圆环病毒1型基因组和重组质粒pCI-PCV2-ORF1为模板,利用PCR扩增了猪圆环病毒1型和2型的ORF1基因,随后克隆到pET-28a(+)和pET-32a(+)两种原核表达载体上。测序正确的重组质粒分别转化E.coli BL21(DE3),进行目的蛋白的诱导表达。SDS-PAGE和Western blot分析表明,猪圆环病毒1型和2型的ORF1均能在pET-28a和pET-32a中分别以重组蛋白His-Rep(40 Ku)和Trx-His-Rep(54 Ku)的形式表达。进一步纯化后测定重组蛋白的浓度,推算出猪圆环病毒1型和2型的His-Rep蛋白产量分别为34 mg/L菌液和14 mg/L菌液,Trx-His-Rep蛋白产量则为12 mg/L菌液和10 mg/L菌液。这些纯化的蛋白在Western blot中能够与猪抗猪圆环病毒2型阳性血清发生特异性反应,显示其具有良好的免疫学活性。本研究建立的猪圆环病毒重组Rep蛋白的原核表达系统及其纯化方法,为下一步开展Rep蛋白功能等相关研究奠定了基础。
- 李益飞申会刚商绍彬陈庆新郭军庆周继勇
- 关键词：REP蛋白纯化
- 牛FcγRⅠ(CD64)GST融合蛋白在大肠杆菌中的表达被引量：3
- 2005年
- 采用PCR技术从牛巨噬细胞cDNA文库中扩增了牛的高亲和力IgGFc受体FcγRⅠ,测序结果显示与已报道的牛FcγRⅠ序列一致。在牛FcγRⅠ成熟蛋白胞外环区两端分别合成带有BamHⅠ、XhoⅠ限制酶切位点的引物,用PCR扩增后亚克隆到GST融合蛋白表达载体pGEX - 6P- 1,转化宿主菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导,SDS -PAGE分析表达了N端带有GST的融合蛋白,Western -blotting试验表明融合蛋白在变性条件下能和牛IgG结合。GST -FcγRⅠ融合蛋白的成功表达为研究牛IgG和受体的相互作用机制及其介导的免疫反应打下了基础。
- 张改平乔松林李青梅王丽张红郭军庆王选年夏春
- 关键词：GST融合蛋白
- IBDV VP3结构蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定被引量：18
- 2005年
- 应用RT-PCR技术从鸡IBDV总RNA中克隆出893bp的VP3基因,并将其进一步克隆于pET-28a载体T7启动子的下游,构建了pETVP3原核表达载体。经IPTG诱导,在其宿主菌BL21(DE3)中成功表达了35.5,33kDa的鸡IBDVVP3蛋白。经SDS-PAGE和Westernblotting分析,VP3表达产物以包涵体形式存在,并与鸡IBDV抗血清特异性反应。
- 张改平席俊王选年乔宏兴张华王丽郭军庆
- 关键词：传染性法氏囊病病毒VP3蛋白抗原性
- 奶牛布氏杆菌分离株的分子分型
- 根据布氏杆菌编码36kDa外膜蛋白的omp2基因多态性设计引物,PCR扩增51株布氏杆菌分离株omp2a和omp2b基因,并进行序列测定,GenBank数据库BLAST序列比对分析显示,43株为牛种布氏杆菌(B.abor...
- 郭军庆杜振昆张妙仙项玉燕柯永恩周继勇
- 关键词：布氏杆菌多态性分子分型
- 文献传递
- 双抗夹心ELISA检测猪圆环病毒2型抗原方法的建立及初步应用
- 引言猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS),临床表现为断奶仔...
- 刘肖金前跃郭军庆李鹏张改平
- 奶牛布氏杆菌分离株的分子分型
- 根据布氏杆菌编码36kDa外膜蛋白的omp2基因多态性设计引物，PCR扩增51株布氏杆菌分离株omp2a和omp2b基因，并进行序列测定，GenBank数据库BLAST序列比对分析显示，43株为牛种布氏杆菌(B．abor...
- 郭军庆杜振昆张妙仙项玉燕柯永恩周继勇
- 关键词：布氏杆菌基因多态性分子分型奶牛
- 鸡CD25的克隆及组织表达分析
- 为更好地研究鸡IL-2与其受体(CD25)之间的相互作用机制，我们通过RT-PCR的方法从鸡脾单个脾细胞中克隆获得了由1027bp组成的chCD25的cDNA序列，并获得其mRNA的组织分布：在正常鸡的心肌、肺、肾、脑、...
- 滕巧泱吴佳俊方杰郭军庆周继勇
- 关键词：白细胞介素-2受体基因克隆
- 文献传递
- 动物IgG Fc受体研究
- 张改平郭军庆乔松林李青梅杨艳艳郝慧芳赵东王丽
- 1.所属科学技术领域：该项目属兽医免疫学与家畜病毒学领域。2.主要研究内容：(1)通过构建牛肺泡巨噬细胞cDNA表达文库，创建了基于玫瑰花环指示系统的亲和分子克隆技术方法，并克隆鉴定了牛的四类FcγR(boFcγRI、b...
- 关键词：
- 关键词：家畜病毒学
- 传染性法氏囊病毒的抗原及分子特征(英文)被引量：4
- 2005年
- 用鸡胚成纤维细胞对来自野外的5个传染性法氏囊病毒株(IBDV-JD1、JD2、NB、HZ1、HZ2)进行分离,测定理化特性、致病性,同时进行血清亚型测定及A片段基因组的克隆分析.试验所用5个法氏囊组织悬液在鸡胚成纤维细胞盲传2～14代后适应细胞并产生细胞病变.细胞适应的IBDV毒株的理化和形态特征与经典传染性法氏囊病毒株一致.除IBDV-HZ1、HZ2属经典IBDV血清型外,IBDV-JD1、JD2和NB毒株分属不同的血清亚型.人工感染实验结果显示,分离的IBDV毒株产生与野外病例相似的临床症状和病变,出现法氏囊滤泡髓质的淋巴细胞变性、坏死和消失.基因组序列分析显示,IBDV-NB毒株A片段由3 264个核苷酸组成,编码由145个氨基酸残基组成的VP5和由1 012个氨基酸残基组成的多聚蛋白.与来自GenBank的IBDV Ⅰ型毒株比较,NB毒株A片段编码的多聚蛋白与JD1毒株的同源性最高,达99.5%,VP2与JD1、CEF94、D78的同源性为99.8%,VP3与JD1的同源性为99.2%,VP4与JD1的同源性为100%,VP5与JD1,HZ2,P2,CEF94,CT,Cu-1和D78毒株的同源性为99.3%.NB毒株VP2蛋白的第253、280、284位氨基酸残基与IBDV变异毒株和经典毒株一致,但不同于IBDV超强毒株.这些结果暗示IBDV的抗原表位是构象依赖性表位,IBDV血清亚型的形成与IBDV弱毒疫苗病毒株密切相关.
- 周继勇叶菊秀叶伟成陈庆新郑肖娟郭军庆
- 关键词：传染性法氏囊病毒理化特性血清亚型
- 鸡CD25的克隆及组织表达分析
- 为更好地研究鸡 IL-2与其受体(CD25)之间的相互作用机制,我们通过 RT-PCR 的方法从鸡脾单个脾细胞中克隆获得了由1027bp 组成的 chCD25的 cDNA 序列,并获得其 mRNA 的组织分布：在正常鸡的...
- 滕巧泱吴佳俊方杰郭军庆周继勇
- 关键词：克隆
- 文献传递
