邢克飞
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金军队科研基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 白藜芦醇联合5-FU对人乳腺癌细胞系MCF7的促凋亡作用被引量：6
- 2006年
- 目的:研究白藜芦醇联合5FU促进人乳腺癌细胞MCF7凋亡的作用.方法:4种人乳腺癌细胞系(MCF7,MDAMB231,SKBR3和Bcap37)与不同浓度的白藜芦醇或/和5FU共孵育48h,MTT法检测细胞存活率,并用相差显微镜观察细胞形态学改变.用流式细胞术(检测细胞凋亡相关指标AnnexinV/PI)和Hoechst33258染色检测细胞凋亡.结果:白藜芦醇能够不同程度地抑制4种人乳腺癌细胞系(MCF7,MDAMB231,SKBR3和Bcap37)的生长.白藜芦醇对MCF7,MDAMB231,SKBR3和Bcap37细胞的IC50(半数抑制浓度)分别为65,207,139和213μmol/L.单用5FU对MCF7细胞的IC50为13μmol/L,联合使用5FU和白藜芦醇的IC50分别为9μmol/L和3μmol/L.与单用组相比,65μmol/L白藜芦醇和13μmol/L5FU联合使用后,MCF7细胞AnnexinV水平升高.Hoechst33258荧光染色和流式细胞术分析MCF7细胞的结果一致.结论:白藜芦醇与5FU合用可协同促进MCF7细胞凋亡,提示白藜芦醇可能用作治疗乳腺癌的二线化疗药.
- 李燕邢克飞李福洋汪云药立波刘新平
- 关键词：白藜芦醇化疗细胞凋亡乳腺癌
- 靶向性DNA甲基化酶在pET32a原核表达载体中的表达和鉴定
- 2008年
- 目的:在pET32a原核表达载体中表达融合myc-6his标签的靶向性甲基化酶B1-3a并进行鉴定。方法:以含有B1-3a基因的pcDNA4.0-B1-3a-myc-6his质粒为模板,通过PCR的方法扩增获得融合有myc-6his标签序列的目的区段B1-3a,然后克隆入表达载体pET32a;以SDS-PAGE和Western blot方法对表达产物进行鉴定。结果:表达产物中在分子量43kD左右可见与目的蛋白分子量相符的条带,该条带可被6his标签单克隆抗体特异识别。结论:正确构建了靶向性甲基化酶B1-3a的原核表达载体,靶向性甲基化酶能够在pET32a中成功表达。
- 吴琳邢克飞张治国张健刘新平药立波李福洋
- 关键词：DNA甲基化酶基因靶向性
- 靶向性DNA甲基化酶在毕赤酵母中的表达和鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的:在毕赤酵母中表达融合Myc-His标签的靶向性甲基化酶B1-3a并进行鉴定。方法:以含有B1-3a基因的pcDNA4.0-myc/his质粒为模板,通过PCR扩增获得融合有myc/his标签序列的目的区段B1-3a基因,然后克隆入表达载体pPIC3.5k;电穿孔转化毕赤酵母菌株GS115,经G418筛选后进行甲醇诱导表达,并以SDS-PAGE和Western印迹对表达产物进行鉴定。结果:表达产物中可见与目的蛋白相对分子质量(50000)相符的条带,该条带可被Myc标签单克隆抗体特异识别。结论:正确构建了靶向性甲基化酶B1-3a的酵母表达载体,靶向性甲基化酶能够在毕赤酵母中成功表达。
- 邢克飞吴琳李燕刘新平药立波李福洋
- 关键词：DNA甲基化酶靶向性毕赤酵母
