张永芹
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国防基础科研计划江苏省高校优势学科建设工程资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 耐辐射球菌PprI蛋白质表达及其纯化的实验研究被引量：5
- 2011年
- 为了在大肠杆菌中高效表达耐辐射球菌PprI融合蛋白并进行纯化,本研究以PCMV-HA-pprI质粒为模板,PCR扩增pprI基因全序列,经Nco I和EcoR I双酶切后定向克隆到pET-28a表达载体中,构建重组原核表达质粒pET-28a-His-pprI,并转入E.coli BL21(DE3)RP。IPTG诱导融合蛋白表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物。对蛋白表达优化诱导时菌液的A600值、IPTG浓度、诱导时间和温度表达条件。诱导表达的PprI融合蛋白采用Ni-NTA His-Bind树脂和分子筛两步法进行纯化。结果显示,Western blotting检测的表达产物确为6×His-PprI融合蛋白,相对分子质量约为37 KD。不同诱导浓度、温度和时间在相对分子量为37 KD处见到特异性的PprI蛋白条带具有一定的差异,目的蛋白在上清和沉淀中均有表达。BCA法测得纯化蛋白质浓度为0.15 mg/mL。结果表明,本研究成功构建了耐辐射球菌pprI基因的pET-28a-His-pprI重组原核表达载体,并获得纯化的毫克级耐辐射球菌PprI融合蛋白,为进一步研究PprI蛋白的抗放作用和免疫等性能奠定了基础。
- 张永芹周辉陈洁杨占山
- 关键词：耐辐射球菌原核表达质粒蛋白表达纯化
- 替吉奥联合顺铂或奥沙利铂治疗进展期胃癌的临床观察
- 目的：观察替吉奥联合顺铂或奥沙利铂治疗进展期胃癌的临床疗效.方法：收集我院肿瘤科采用SP和SOX方案治疗的72例进展期胃癌患者为研究对象，对其资料进行回顾性分析.根据患者所接受的化疗方案，将患者分为SP组(36例)和SO...
- 卢玮冬左云许震张敏张永芹
- 关键词：顺铂奥沙利铂进展期胃癌
- 耐辐射球菌PprI蛋白对急性放射损伤小鼠防护作用的初步研究被引量：7
- 2012年
- 研究耐辐射球菌PprI蛋白对哺乳动物急性放射损伤的防护作用,初步探讨其作为一种新的抗辐射蛋白的作用机制。将PprI蛋白或生理盐水注射入小鼠肌肉内,观察辐照后第1、7、14、28天小鼠外周血象以及小鼠骨髓、胸腺和脾脏淋巴细胞的凋亡情况。研究结果表明:与生理盐水注射组相比,PprI蛋白注射组外周血白细胞计数于照后第28天显著增高(p<0.05);外周血小板数和淋巴细胞百分率于照后第1、7天显著增高(p<0.05);PprI蛋白注射组脾脏淋巴细胞凋亡率在照后第1、7、14天明显降低(p<0.05);胸腺淋巴细胞凋亡率于照后第14和28天明显降低(p<0.05);骨髓细胞凋亡率在照后第1、14和28天明显降低(p<0.05);并且骨髓细胞凋亡率于照后第28天基本恢复正常。上述结果初步表明,耐辐射球菌PprI蛋白对哺乳动物急性放射损伤有着明显的防护作用。
- 陈洁张永芹毕洁静杨占山
- 关键词：耐辐射球菌
- 抗辐射球菌pprI基因活体电转染对受照小鼠睾丸病理学作用的研究被引量：1
- 2011年
- 观察抗辐射球菌pprI基因活体电转染小鼠受γ射线辐照后睾丸组织的形态学变化,探讨一种新的原核基因表达对哺乳动物生殖系统损伤的防治作用。将含有pprI基因的pCMV-HA-pprI质粒注入小鼠肌肉内,然后采用活体基因电转染技术将该基因导入细胞内,对照组小鼠和转基因组小鼠均采用60Coγ射线全身照射,吸收剂量为6 Gy,分别于辐照后第1、7、14、28和35天取下注射部位肌肉组织,提取组织总蛋白,进行PprI蛋白的Western blotting检测。同时取小鼠睾丸组织,石蜡包埋制片,苏木精-伊红染色,进行镜下病理学观察。PprI蛋白在辐照后第1天有较强的表达,说明pprI质粒成功转染至小鼠体内。对照组小鼠在照后第1天生精小管结构完整,各级生精细胞未见明显病理变化;第7天在部分生精小管观察到少量精原细胞坏死;第14天生精细胞变性坏死明显加重,生精小管萎缩变细,相互"远离";至第28天各级生精细胞及精子极度减少,生精小管内细胞分层结构基本消失,甚至空虚,仅残留支持细胞,间质疏松;第35天空虚的生精小管内开始出现新生精原细胞。而转基因组小鼠辐照后第1天生精细胞未见明显病理变化;第7天部分生精小管见少量精原细胞坏死,较单纯照射组轻;第14天生精细胞变性坏死加重,各级生精细胞数量减少;第28天局部生精小管内出现新生精原细胞,基底层结构基本显现;第35天转基因组局部生精小管内新生生精细胞增多,出现分层现象。研究结果表明,pprI基因活体电转染对小鼠睾丸γ辐射损伤具有显著的防治作用,睾丸辐射损伤修复明显提前。
- 连利霞陈婷婷张永芹王秀珍杨占山
- 关键词：PPRI睾丸组织病理学
- 耐辐射菌PprI蛋白的制备及其对小鼠急性辐射损伤作用的研究
- 目的：耐辐射球菌(Deinococcus radiodurans)(简称DR)是一种对电离辐射,紫外线,强氧化剂和化学诱变剂具有超强耐受力的极端微生物,是迄今为止地球上发现的抗辐射能力最强的生物之一。最近研究表明,负责这...
- 张永芹
- 关键词：电离辐射实验药理
