陈春丽
- 作品数：9 被引量：13H指数：2
- 供职机构：华农动物保健品股份有限公司更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 表面展示鸡传染性支气管炎病毒M41株S1蛋白的重组假型杆状病毒的构建
- 2012年
- 以鸡传染性支气管炎病毒M41毒株基因序列为模板,利用PCR方法扩增膜定位信号缺失的S1基因(dS1),将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1中,再次将S1及gp64的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBacTMDual,得到重组质粒pFastBac-gp64-dS1.将该重组质粒转化到DH10Bac感受态细胞中,获得重组穿梭载体Bacmid-gp64-dS1,提取重组Bacmid质粒,以PCR验证其正确性.将阳性重组Bacmid质粒利用脂质体转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒BV-dS1.间接免疫荧光试验表明,该重组杆状病毒可以Sf9昆虫细胞膜表达鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白.
- 陈筱薇樊惠英林文耀程晓亮叶昱陈春丽廖明
- 关键词：鸡传染性支气管炎病毒M41S1蛋白重组杆状病毒
- 一株H9亚型禽流感病毒的分离鉴定及生物特性研究
- 2013年我国吉林某养鸡场发生疑似H9亚型禽流感疫情,采集该发病鸡场病料接种9日龄SPF鸡胚,分离得到一株病毒.分离毒株具有鸡红细胞凝集性,将有血凝活性的病毒液分别与ND、EDS、AIV H5、AIV H7和AIV H9...
- 陈春丽黄文科唐秀英李群芳严洁珍陈瑞爱
- 利用SUMO系统高效表达可溶性猪圆环病毒2型Cap蛋白被引量：11
- 2012年
- 利用pCold-SUMO可溶性原核表达载体,构建表达猪圆环病毒2型缺失核定位信号肽的Cap基因的重组表达载体pCold-SUMO-dCap,并将其转入Arctic-Express表达菌株中15℃低温诱导表达.表达产物经SDS-PAGE分析,结果表明SUMO-dCap融合蛋白获得了高效表达,可溶性SUMO-dCap融合蛋白约占总融合蛋白的50%;用NI-NTA树脂纯化可溶性的融合蛋白,然后利用SUMO蛋白酶特异性去除SUMO标签,从而得到不含任何标签的dCap蛋白,进一步的Western-blot分析表明,表达的dCap蛋白具有良好的反应原性.
- 陈春丽郭宇飞陈筱薇叶昱王强廖明樊惠英
- 关键词：猪圆环病毒2型CAP蛋白原核表达
- 应用猪圆环病毒2型缺失NLS的Cap蛋白建立一种ELISA检测方法
- 引言 猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)与猪的多种疾病综合征密切相关,临床上以PMWS最为常见,危害最为严重.PMWS多发生于5～12周龄仔猪和早期育肥猪,具有低发病率高死亡率和长期呈现...
- 陈春丽王强叶昱陈晓薇张春雷刘晓柯廖明樊惠英
- 利用pCold-sumo表达载体高效表达PCV 2 Cap蛋白的方法
- 本发明公开了一种利用pCold-sumo表达载体高效表达PCV 2 Cap蛋白的方法，该方法包括以下步骤：抽提PCV 2病毒的DNA，扩增得到PCV 2去核定位信号肽的Cap蛋白的基因片段；将扩增片段连接到pCold-S...
- 樊惠英廖明陈春丽叶昱张杰
- 文献传递
- 一株H9亚型禽流感病毒的分离鉴定及生物特性研究被引量：2
- 2015年
- 2013年中国吉林某养鸡场发生疑似H9亚型禽流感疫情,采集该发病鸡场病料接种9日龄SPF鸡胚,分离得到一株病毒。经血凝(HA)试验、血凝抑制(HI)试验、测序分析,鉴定该毒株为H9亚型禽流感病毒(AIV)。对本试验分离株HA基因进行测序及序列分析,结果显示分离株HA基因的裂解位点为RSSR↓GLF,符合低致病性AIV的基因特征;HA肽链具有9个潜在糖基化位点,与近些年H9亚型AIV分离株的潜在糖基化位点相同;具有8个受体结合位点,其中234位受体结合位点由谷氨酰胺(Q)变异成苏氨酸(T);HA基因系统进化树结果显示本试验分离株属于欧亚进化分支,与中国最早分离株A/Chicken/Beijing/1/94(H9N2)亲缘关系较远,与2007年后中国H9亚型AIV主要流行分支的代表株A/Chicken/Guangxi/55/2005(H9N2)亲缘关系较近。将该毒株制成油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡,免疫后第21天免疫鸡血清抗体高达10log2,表明本试验分离株具有很好的免疫原性。
- 陈春丽王强李群芳严洁珍黄文科
- 关键词：H9亚型禽流感病毒HA基因免疫原性
- 应用猪圆环病毒2型缺失NLS的Cap蛋白建立一种ELISA检测方法被引量：1
- 2014年
- 本试验通过诱导重组质粒pCold-SUMO-dCap在大肠杆菌中高效表达,获得了可溶性表达的SUMO-dCap融合蛋白,以SUMO-dCap融合蛋白作为包被抗原,建立了一种检测猪圆环病毒2型抗体的ELISA方法.用该方法与商品化试剂盒对267份猪血清进行平行检测,两种方法的符合率为90.26％,该方法的特异性和灵敏性分别为93.33％、97.16％;与猪蓝耳病病毒、猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪口蹄疫病毒和猪瘟病毒阳性参考血清无交叉反应;批内和批间变异系数分别为1.25％～6.37％和6.68％～13.58％.研究结果表明,本试验建立的ELISA方法特异性强、敏感性好、重复性高,为临床上PCV2血清抗体检测和PCV2流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法,为商品化试剂盒开发奠定了良好的基础.
- 张春雷陈春丽王强叶昱张杰谢康尚靳立明廖明樊惠英
- 关键词：猪圆环病毒2型CAP蛋白间接ELISA
- 利用pFast Bac Dual杆状病毒表达PCV 2 Cap蛋白的方法
- 本发明公开了一种利用pFast Bac Dual杆状病毒表达PCV2Cap蛋白的方法，该方法包括以下步骤：扩增带有His标签的编码PCV 2 Cap蛋白的基因片段；将上述基因片段连接到pFast Bac Dual质粒上，...
- 樊惠英廖明陈春丽叶昱张杰
- 文献传递
- β-丙内酯在H9N2禽流感灭活疫苗中的应用研究
- 前言 β-丙内酯(BPL)是一种杂环化合物，对病毒具有很强的灭活作用，并且具有极易水解成无毒无害物质的特性，目前在国外广泛应用于各种疫苗的灭活。本研究通过应用β-丙内酯作为H9N2禽流感病毒灭活剂，对病毒灭活效果、灭活剂...
- 黄文科陈春丽韩静芳梁桂益林绮萍严洁珍陈瑞爱
