李艳蕊
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 供职机构：甘肃农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学更多>>
- 猪瘟病毒C株E^(rns)/E2嵌合基因表达蛋白单克隆抗体的制备及其生物学特性的鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的:制备抗猪瘟病毒(CSFV)C株Erns/E2嵌合基因表达蛋白的单克隆抗体(mAb),探讨Erns/E2蛋白的分子结构和生物学功能。方法:在大肠杆菌RosettaTM2(DE3)中表达了猪瘟病毒(CSFV)C株Erns、E2蛋白主要抗原域的嵌合基因CSFVErns/E2蛋白;以纯化复性后的CSFVErns/E2为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗CSFVErns/E2 mAb;利用间接ELISA、Western blot、Dotblot方法鉴定mAb生物学特性。结果:获得了1株稳定分泌抗CSFVErns/E2融合蛋白的单克隆杂交瘤细胞系C8株,该株mAb的细胞培养上清效价为1∶6400,小鼠腹水效价1∶2×105。其免疫球蛋白亚类为IgG1。间接ELISA和Western blot结果显示该株mAb不与猪瘟C株细胞毒、pET-32a标签蛋白反应,仅与融合表达的CSFVErns/E2蛋白存在特异性反应。Dot blot结果表明其识别的抗原表位为E2蛋白的RSGL-CPFDTSPV氨基酸序列。结论:获得了一株能特异识别E2蛋白抗原表位的mAb,为进一步研究CSFV的分子结构及功能奠定了物质基础。
- 王丽李学伍腾蔓杨艳艳李娅丽李艳蕊赵东柴书军张改平
- 关键词：猪瘟病毒CSFV嵌合基因
- 猪瘟病毒Erns蛋白在毕赤酵母中的表达及其单克隆抗体制备
- 猪瘟(classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)引起的以高热、出血、死亡率高为特征的一种高度接触性传染病,严重影响养猪业的健康发展...
- 李艳蕊
- 关键词：猪瘟病毒巴斯德毕赤酵母单克隆抗体
- 文献传递
- 猪瘟病毒Erns蛋白在毕赤酵母中的表达及鉴定被引量：8
- 2010年
- 为制备猪瘟病毒(CSFV)特异性诊断抗原,根据国内CSFV流行毒株的序列合成了其主要的保护性抗原Erns蛋白的基因序列,将合成的基因按设计的酶切位点与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接,构建了重组表达质粒pPIC9K-Erns。用SalⅠ将重组表达质粒线性化后,转化GS115酵母菌。经筛选、鉴定,成功获得了表达CSFV的Erns蛋白的阳性重组酵母菌。该阳性重组酵母菌经甲醇诱导,在培养液上清中可检测到目的蛋白。Western-blot结果显示,该蛋白能特异识别CSFV抗体,且具有很好的反应原性。
- 李艳蕊李学伍王丽刘磊张改平
- 关键词：猪瘟病毒毕赤酵母
