李清
- 作品数：14 被引量：120H指数：7
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- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技重大专项更多>>
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- 药物提高心肌干细胞治疗急性心肌梗死疗效的实验研究
- 本文主要从以下几个部分展开论述: 摘要（一） 阿托伐他汀预处理提高心肌干细胞移植治疗急性心肌梗死疗效的实验研究 目的:心肌干细胞(cardiac stem cells，CSCs)移植治疗急性心肌梗死(acute my...
- 李清
- 关键词：急性心肌梗死心肌凋亡细胞自噬通心络心脏微血管
- 金钗石斛HMGR基因克隆及菌根真菌诱导表达分析被引量：5
- 2017年
- 目的克隆金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl.)3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGR)基因,并进行生物信息学及接菌前后差异表达分析。方法采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得DnHMGR2基因cDNA全长;生物信息学分析编码蛋白的理化特性、结构域等特征;用DNASTAR、MEGA软件分别进行氨基酸多序列比对和进化树构建分析;借助实时定量PCR技术检测基因接菌前后表达模式。结果从金钗石斛中分离得到一个HMGR基因,命名为DnHMGR2(Gen Bank注册号KX825920)。DnHMGR2基因cDNA全长2 095 bp,编码一条由562个氨基酸组成的多肽,相对分子质量为59.68×10~3,等电点6.18。DnHMGR2蛋白具有植物HMGR酶的典型结构域和结合基序。DnHMGR2与多种植物HMGR基因高度同源,与铁皮石斛的亲缘关系最近。DnHMGR2基因具有组织表达特异性,在金钗石斛叶、茎中的表达量较高,为根中的2.59和1.60倍;但接菌后各器官的表达量表现为茎>叶>根。结论首次克隆得到金钗石斛中HMGR基因的全长cDNA,为进一步解析该基因在金钗石斛萜类物质合成代谢途径中的分子调控作用,及菌根真菌对石斛碱生物合成调控机制奠定了基础。
- 李清李标郭顺星
- 关键词：金钗石斛基因克隆
- 人参皂甙对缺血心肌保护作用及机制研究进展被引量：5
- 2014年
- 人参是在世界范围内广泛应用的传统中药,其最主要的活性成分为人参皂甙,主要包括Rb1、Rb2、Rc、Rg1等单体。研究发现,人参皂甙对心血管系统具有良好的保护作用,它可以通过抑制凋亡和自噬、抗氧自由基、减轻钙超载、抑制中性粒细胞激活和炎症介质释放、以及参与新生血管形成等一系列多因素,多途径的调节过程,改善缺血心肌功能。
- 李清李娜杨跃进
- 关键词：人参皂甙缺血心肌
- 金钗石斛焦磷酸甲羟戊酸脱羧酶基因的克隆及表达分析被引量：12
- 2018年
- 焦磷酸甲羟戊酸脱羧酶（pyrophospomevalonate decarboxylase,MVD）是甲羟戊酸途径中的关键酶,在植物细胞萜类物质合成代谢过程中发挥着重要的作用。石斛碱作为倍半萜类生物碱,其合成很可能离不开MVD的参与。本研究利用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）和cDNA末端快速扩增（RACE）技术,首次从金钗石斛中克隆到一个MVD基因,命名为DnMVD（GenBank注册号KY626328）。DnMVD基因cDNA全长1 763 bp,编码一条由424个氨基酸组成的多肽,分子量为47.132 63 kD,等电点6.84。DnMVD编码的蛋白包含GHMP激酶超家族的特异性识别序列,且拥有严格保守的1个亮氨酸、1个天冬氨酸和3个半胱氨酸活性位点,与多种植物MVD高度同源。DnMVD的表达受到菌根真菌的影响,金钗石斛茎中DnMVD的表达量于接菌后期显著高于对照。DnMVD基因的分子鉴定及其在接菌前后金钗石斛茎中的表达特性为进一步解析该基因在金钗石斛石斛碱合成代谢途径及菌根互作过程中的分子调控作用奠定了重要的基础。
- 李清李标郭顺星
- 关键词：金钗石斛基因克隆实时荧光定量PCR
- 兰科石斛属植物分子生物学研究进展被引量：17
- 2016年
- 随着分子生物学技术的进步,石斛属植物在分子方面的研究快速发展,不仅为石斛属植物的快速鉴别提供了新途径,较全面的揭示了其种群的遗传多样性和亲缘关系,更为揭示石斛属植物生长发育、代谢调控机制奠定了重要的分子基础。鉴于此,该文从分子鉴定、遗传多样性、功能基因等方面对近年来石斛属植物分子生物学方面的研究现状进行综述,以期为该领域的进一步研究及石斛属植物的有效保护、开发和利用提供理论依据。
- 李清李标郭顺星
- 关键词：石斛属分子鉴定功能基因
- 阿托伐他汀抗缺氧无血清条件下小鼠心肌干细胞凋亡的作用
- 2016年
- 目的在体外缺氧无血清条件下模拟心肌缺氧微环境,研究阿托伐他汀(Atorvastatin,ATV)对小鼠心肌干细胞(cardiac stem cells,CSCs)的抗凋亡作用及可能发挥作用的分子机制。方法分离培养小鼠CSCs,在缺氧无血清条件下用ATV处理12 h,应用流式细胞术和Hoechst 33342荧光染色观察细胞凋亡,并利用Western blotting方法检测通路蛋白单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的磷酸化水平。结果缺氧无血清条件引起明显的细胞凋亡,ATV处理组细胞凋亡率显著降低(p<0.05),且呈一定的浓度依赖性。ATV处理组AMPK磷酸化水平明显升高(p<0.05),加入AMPK阻断剂CompoundC可以显著阻断这种效应。结论在缺氧无血清条件下,一定浓度的ATV对CSCs具有显著抗凋亡作用,且AMPK/mTOR通路可能参与了该过程。
- 李清李娜田夏秋黄沛森陈桂浩徐珺杨跃进
- 关键词：阿托伐他汀心肌干细胞凋亡AMPK
- 骨髓衰竭综合征患儿行allo--UCBT和allo--PBSCT后的造血重建规律解析
- 目的:造血干细胞移植(HSCT)可以治愈恶性血液系统及非血液系统疾病,是最经典和成熟的干细胞临床应用方案。脐带血(UCB)内含有丰富的造血干细胞(HSC)、造血祖细胞(HPC)和大量幼稚型T淋巴细胞(na(?)ve T)...
- 李清
- 关键词：异基因外周血干细胞移植
- 金钗石斛中3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶基因的克隆及特征分析被引量：9
- 2017年
- 目的克隆金钗石斛Dendrobium nobile中3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA synthase,HMGS)基因DnHMGS,并进行生物信息学和表达分析。方法采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得DnHMGS基因cDNA全长;生物信息学分析编码蛋白的理化特性、结构域等特征;用DNASTAR、MEGA软件分别进行氨基酸多序列比对和进化树构建分析;借助实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测基因组织表达模式。结果 DnHMGS基因全长为1 816 bp(GenBank注册号KX789180),编码一条由474个氨基酸组成的多肽,相对分子质量为52 458.47,等电点5.98。DnHMGS蛋白具有植物HMGS酶的典型结构域和活性中心,与凤梨、稻、玉米等单子叶植物亲缘关系较近。DnHMGS基因具有组织表达特异性,接菌前,DnHMGS转录本在金钗石斛叶中的表达量最高,为根、茎中的2倍以上。但接菌后DnHMGS基因表达情况转变为茎>叶>根。结论首次从金钗石斛中克隆得到HMGS基因的全长cDNA,该基因的分子鉴定为进一步揭示该基因在金钗石斛萜类物质合成代谢途径中的作用及菌根真菌影响石斛碱生物合成的调控机制奠定了基础。
- 李清李标郭顺星
- 关键词：金钗石斛基因克隆实时荧光定量PCR
- 慢性栓塞性肺动脉高压72例临床分析被引量：27
- 1997年
- 为提高对肺栓塞临床实验室所见的认识和其诊断水平，回顾性分析７２例慢性栓塞性肺动脉高压的临床资料，列举和分析了常见症状、体征及实验室检查。结果显示，动脉血氧分压（ＰａＯ２）、动脉血二氧化碳分压（ＰａＣＯ２）减低，肺泡气－动脉血氧分压差（Ｐ（Ａ－ａ）Ｏ２）增大，Ｘ线胸片示肺血不匀和心电图右室肥厚分别占８０．３％和７６．４％，超声心动图示右房、右室内径扩大分别占９２．５％和９７．１％，有心包积液者１１．１％，有肺动脉压增高者为１００．０％。右心导管测肺动脉平均压为６．５０±１．８０ｋＰａ（４８．７５±１３．５０ｍｍＨｇ），肺动脉造影有阳性所见者占９３．８％，放射性核素肺灌注扫描阳性者为１００．０％。有下肢深静脉病史者４３．１％，核素造影阳性者占７５．０％。院外误诊率高达９０．３％。结果表明，了解栓塞性肺动脉高压的临床表现和实验室所见，对提高本病的诊断意识和水平是重要的。
- 程显声李瑛李清李清马秀平高莹
- 关键词：肺动脉高压栓塞性慢性
- 金钗石斛转录组SSR位点信息分析被引量：27
- 2017年
- SSR是应用于金钗石斛鉴定和遗传多样性研究的重要分子标记之一。为开发新的SSR标记,寻求快速鉴别金钗石斛的方法,该文通过生物信息学手段对金钗石斛转录组序列进行SSR位点搜索、分析,并设计出SSR特异性引物。结果显示,从金钗石斛转录组中搜索到32 709个SSR,分布与26 742条unigenes中,SSR位点发生频率为12.90%,平均每3 748 bp含1个SSR位点。其中,单核苷酸是最主要重复类型,占SSR总数的72.18%,其次是二核苷酸和三核苷酸,分别占SSR总数的15.97%,11.19%。而在所有重复基元中,A/T出现频率最高,AG/CT次之。通过设计、筛选,该研究共获得62 157对SSR位点特异性引物。从中随机挑选20对引物进行PCR扩增,17对扩增出清晰、可重复的条带,扩增率为85.0%。选择3种石斛检测引物多态性,共获得多态性引物13条。以上结果表明,金钗石斛转录组测序产生的unigenes信息可作为开发SSR标记的有效来源,其中的SSR位点出现密度大、类型丰富、多态性潜能高,在金钗石斛及其近缘种的分子鉴定、遗传多样性与分子育种等方面具有较好的应用前景。
- 李清李标郭顺星
- 关键词：金钗石斛转录组SSR
