李俊
- 作品数：6 被引量：2H指数：1
- 供职机构：大连大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种抗人源多药耐药蛋白Fab抗体及其制备方法
- 本发明提供了一种抗人源多药耐药蛋白Fab抗体及其制备方法，属于抗体及其制备领域；本发明为取多药耐药性大肠癌病理组织总RNA并逆转录为cDNA，利用本实验室设计的特异性引物扩增出P‑gp跨膜区（氨基酸784～968）基因片...
- 张学梅张海玉王清李俊
- 文献传递
- 抗人大肠癌P-gp Fab抗体的制备、纯化及初步鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的:构建可溶性抗人大肠癌P-gp Fab抗体原核表达载体,表达、纯化Fab抗体并鉴定其生物活性和所识别的抗原表位。方法:以实验室制备纯化的人大肠癌P-gp21作为抗原从噬菌体Fab抗体库中经5轮淘选,筛选出阳性克隆菌株,切去gⅢ蛋白基因再次转化大肠杆菌XL1-Blue。酶切鉴定后阳性单克隆经IPTG诱导表达,经Protein L亲和柱纯化Fab抗体后,通过SDS-PAGE、Western Blot和ELISA法检测目的蛋白并鉴定其生物活性和所识别的抗原表位。结果:成功构建可溶性抗人大肠癌P-gp Fab抗体原核表达载体,成功表达48kDa的Fab抗体,经纯化后Fab抗体的浓度为150mg/L。经鉴定该抗体所识别的抗原表位为位于紧邻ATP结合区的跨膜肽段10肽:ANDAAQVKGA。结论:成功制备、原核表达并纯化了单克隆抗人大肠癌P-gp的Fab抗体,该Fab抗体的获得有望应用于P-gp功能的研究以及过表达P-gp的肿瘤诊断和干预。
- 王清蒋葵李俊张学梅
- 关键词：原核表达大肠癌FAB抗体
- 鼠源抗人乳腺癌MRP1/ABCC1噬菌体Fab抗体库的构建
- 2014年
- 鼠源抗人乳腺癌多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1/ABCC1)噬菌体Fab抗体库的构建首先是利用乳腺癌组织匀浆液作为免疫原免疫BALB/c小鼠,成功免疫后提取小鼠脾组织的总RNA逆转录为cDNA。然后设计小鼠IgG各亚型的特异性Fab引物,PCR扩增Fd和L基因并依次连接到噬菌体载体pComb3中。重组体pComb3-Fab转化至E.coli XL1-Blue菌中,最后经辅助噬菌体VCSM13超感染,成功构建噬菌体Fab抗体库。以化学合成的MRP1/ABCC1膜表位10肽为抗原进行3轮淘选、富集,对淘选后获得的各级噬菌体抗体库进行ELISA检测和鉴定。成功获得的抗MRP1/ABCC1-10肽三级噬菌体Fab抗体库将为抗人乳腺癌MRP1/ABCC1 Fab抗体的制备提供保障。
- 张学梅赵彩红李俊罗晓蒋葵
- 关键词：FAB抗体乳腺癌
- 抗人大肠癌P-gp_(185)Fab抗体的制备
- 2013年
- 针对人大肠癌P-gp(P-glycoprotein),获得用于研究其功能的抗某一线性表位的单克隆Fab抗体.以原核表达的P-gp185为抗原,对前期所构建的库容量为2.47×106cfu的抗人大肠癌Fab抗体库进行5轮的淘选和富集.ELISA法鉴定获得的各级抗P-gp185Fab抗体库.利用化学合成的膜表位P-gp10肽(ANDAAQVKGA)从五级库中获得表达阳性Fab抗体的克隆及该Fab抗体的基因序列.结果显示,成功富集、淘选获得各级抗人大肠癌P-gp185Fab抗体库;成功获得抗线性表位P-gp10肽的阳性克隆——24号菌株及其表达的Fab抗体基因序列.该Fab抗体的后续制备有望用于大肠癌P-gp功能的研究,该方法也为研究其它目标蛋白的功能提供了有价值的线索.
- 李俊蔺娜卞威张学梅
- 关键词：P-GPFAB抗体大肠癌
- 多药耐药相关蛋白1及其与肿瘤关系的研究进展被引量：1
- 2014年
- 多药耐药(MDR)是导致临床肿瘤化疗失败的重要原因。多药耐药相关蛋白1(MRP1/ABCC1)被认为是介导肿瘤多药耐药的主要跨膜转运蛋白之一。探究MRP1/ABCC1的结构、功能,以及与肿瘤的关系,有利于指导临床合理用药和肿瘤预后的评估。
- 李俊蒋葵张学梅
- 关键词：多药耐药相关蛋白1多药耐药肿瘤
- 一种抗人源多药耐药蛋白Fab抗体及其制备方法
- 本发明提供了一种抗人源多药耐药蛋白Fab抗体及其制备方法，属于抗体及其制备领域；本发明为取多药耐药性大肠癌病理组织总RNA并逆转录为cDNA，利用本实验室设计的特异性引物扩增出P-gp跨膜区（氨基酸784～968）基因片...
- 张学梅张海玉王清李俊
- 文献传递
