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HIV-1 Tat真核表达载体的构建及在Huh-7细胞中表达: 2008年; 目的构建1型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)反式激活因子(Tat)基因真核表达质粒,并研究该质粒在真核细胞中的有效表达。方法以含有HIV-1全长基因的质粒pNL4-3为模板,通过PCR扩增HIV-1tat第一外显子,应用基因工程技术将扩增的基因片段插入真核表达质粒pCDNA3.1(+),构建重组真核表达质粒pCDNA3.1-tat,经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,应用脂质体转染技术转染入人体肝癌细胞系Huh-7细胞。RT-PCR检测其基因转录情况,Westernblot鉴定其是否能够表达相应的目的蛋白质。结果成功扩增了Tat基因,酶切和测序证明正确构建了重组真核表达质粒pCDNA3.1-tat,RT-PCR和Westernblot方法证实该质粒能在Huh-7真核细胞中有效表达HIV-1Tat目的蛋白质。结论成功构建了HIV-1Tat基因的真核表达质粒载体,并在Huh-7细胞中表达,为在Huh-7细胞模型中研究Tat的功能奠定了基础。; 李洪涛刘水平谭宇蓉李乐周秩权; 关键词：HUH-7细胞

纳米金修饰的免疫传感器直接测定2,4-D的研究被引量：4: 2011年; 利用自组装技术和静电吸附作用,制备出用于检测2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)的无试剂型免疫传感器,通过交流阻抗技术考察了电极的电化学特性。试验结果表明:该免疫传感器对2,4-D的检测范围为1～5 000 ng/mL,检测下限为0.5 ng/mL。该方法提高了2,4-D抗体的固定量,增强了传感器的灵敏度和稳定性,为2,4-D的快速检测提供了一种新途径。; 钟菲菲章建辉李乐赖灯妮彭新凯胡朝晖; 关键词：纳米金免疫传感器

生物传感技术在食品生物安全检测中的应用被引量：9: 2009年; 近年来,食品生物安全问题越来越受到各国政府和百姓的重视,寻找一种优良的检测方法成为当前食品安全监督部门的当务之急。生物传感器技术具有快速、灵敏、特异、简便等特点,在食品检测领域具有广阔的应用前景。本文对生物传感器在食品中的细菌、毒素、农药残留等问题的应用进行综述,并简要探讨生物传感器在食品生物安全中的发展前景。; 胡朝晖李乐彭新凯章建辉蔡再兴; 关键词：生物传感器病原微生物毒素农药残留

HACCP在湖南卤肉制品生产中的应用被引量：2: 2010年; 针对湖南卤肉制品生产中工艺步骤,采用HACCP体系进行管理,确立关键控制点、关键限值以及有效监测方法。实施HACCP体系管理后,卤肉制品产品合格率显著性提高。此体系以期为相关卤肉制品企业的安全生产提供示范。; 陈祖杰李乐章建辉钟菲菲周金沙彭新凯; 关键词：HACCP 卤肉制品微生物

鲍曼不动杆菌Ⅰ类整合酶基因在生物被膜内的表达及耐药分析被引量：13: 2008年; 目的:研究携带Ⅰ类整合子的鲍曼不动杆菌在生物被膜状态和普通液相培养状态下Ⅰ类整合酶基因(Class Ⅰ integrase gene,intI 1)mRNA的表达,并分析Ⅰ类整合子阳性菌耐药情况。方法:收集鲍曼不动杆菌临床株,并经过基因扩增筛选出携带Ⅰ类整合子的阳性菌株。提取携带Ⅰ类整合子的鲍曼不动杆菌在生物被膜和液相培养2种生长状态下的总RNA,采用半定量RT-PCR方法分析2种生长状态下细菌的Ⅰ类整合酶表达情况。并用纸片扩散法对携带Ⅰ类整合子的临床分离鲍曼不动杆菌进行药敏试验。结果:携带Ⅰ类整合子的鲍曼不动杆菌在生物被膜状态和液相培养状态下均有intI 1基因mRNA表达。但生物被膜生长状态下的intI 1mRNA表达量高于液相培养状态下表达量约4倍。在收集的64株鲍曼不动杆菌中有46株携带intI 1基因,而且Ⅰ类整合子基因盒阳性菌株的部分耐药率高于整合子基因阴性的菌株。结论:鲍曼不动杆菌在生物被膜状态intI 1mRNA的表达上调,Ⅰ类整合子在细菌耐药中发挥作用。提示整合子在生物被膜状态下可进行更活跃的基因捕获。; 李乐夏忠弟胡朝晖周秩权李洪涛; 关键词：鲍曼不动杆菌生物被膜 RT-PCR

动物源食品安全控制技术体系: 彭新凯杨丽霞李乐夏立新周金沙李林陈娜; 近几年来，国际上相继发生了一系列震惊世界的食品安全事件，如欧洲的二噁英、中国的瘦肉精、三聚氰胺、黄曲霉毒素等食品安全事故，食品安全问题成为社会关注的焦点。随着经济的快速发展，食品安全也面临新的挑战，病原生物、农药兽药残留...; 关键词：; 关键词：食品安全纳米材料

鲍曼不动杆菌耐药程度与其主动外排泵蛋白的相关性研究被引量：3: 2008年; 目的:探讨鲍曼不动杆菌耐药程度与其主动外排泵蛋白的相关性。方法:首先用纸片扩散法检测64株临床鲍曼不动杆菌对8种抗菌药物的敏感性;将其分为A组(0～2种抗生素耐药)、B组(对3～5种抗生素耐药)和C组(对6～8种抗生素耐药);检测64株临床鲍曼不动杆菌对罗丹明6G的外排情况,筛选出罗丹明6G外排明显增加的菌株;并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测主动外排泵基因AdeABC的表达水平。结果:64株鲍曼不动杆菌中有4株对0～2种抗生素耐药(A组),对3～5种抗生素耐药的有33株(B组),对6～8种抗生素耐药的有27株(C组);多重耐药组鲍曼不动杆菌罗丹6G外排明显增高,外排程度A组; 周秩权夏忠弟李乐李洪涛邓俊范志茹叶亚菲; 关键词：鲍曼不动杆菌主动外排泵多重耐药

食品安全快速高效检测技术: 彭新凯胡朝晖杨丽霞李乐夏立新周金沙付冠艳刘佩汪辉黄辉; 主要技术内容：1)开展了抗体纯化方法研究，获得高特异性单克隆抗体获得了黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、赭曲霉毒素A等生物毒素和盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、氯霉素、硝基呋喃等兽药的高特异性单克隆抗体。2)开展了兽药残留胶体金...; 关键词：; 关键词：食品安全

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李乐