朱长保
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
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- qPCR array检测高糖对胆固醇合成基因表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的:高血糖易引起胆固醇在体内积聚,增加糖尿病合并动脉粥样硬化性心血管疾病的患病风险。本文通过建立稳定的实时定量PCR芯片(Real-time quantitative polymerasechain reaction array,qPCR array)检测方案,研究高糖对小鼠肝癌细胞Hepa1-6胆固醇合成基因表达的影响,探讨胆固醇合成基因在糖尿病大血管并发症发展中的作用机制。方法:以不同浓度葡萄糖(5、15、30mmo/L)和不同时间(0、6、12、18、24 h),刺激肝癌细胞Hepa1-6,利用qPCR array检测其胆固醇合成基因的表达差异。结果:与5mmol/L相比,高糖组(15、30 mmo/L)处理细胞18 h后,胆固醇合成基因CYP51、EBP、NSDHL、SQLE、FDFT1和PMVK的表达上调(P<0.05),呈现剂量依赖性。与0 h相比,15 mmol/L高糖处理细胞12 h,CYP51、EBP和SQLE mRNA表达量上调(P<0.01)。至24 h,CYP51、EBP降至0 h水平,而SQLE的表达量继续增加;NSDHL在12 h表达无差异,至18 h表达量发生上调(P<0.05)。结论:该qPCR array检测方案能特异性检测胆固醇合成基因的表达量。高糖能够促进胆固醇合成基因的表达,使细胞内胆固醇积聚,这可能是糖尿病患者容易发生动脉粥样硬化的原因。这提示我们将胆固醇合成基因作为药物靶点可能延缓糖尿病动脉粥样硬化进展。
- 朱长保徐福意晁天柱薛慧慧肖君华李凯
- 关键词：高糖胆固醇合成
- 一种用于检测小鼠胆固醇代谢基因表达的实时定量PCR芯片
- 本发明涉及一种用于检测小鼠胆固醇代谢基因表达的实时定量PCR芯片，该实时定量PCR芯片以与胆固醇代谢密切相关的88基因作为检测位点，并选取了4个看家基因。本发明的实时定量PCR芯片能对小鼠胆固醇代谢相关基因进行针对性分析...
- 朱长保肖君华李凯周宇荀
- 文献传递
- 改进茎环引物RT-PCR法实时定量检测microRNA被引量：3
- 2014年
- 目的:为检测不同组织中microRNA(miRNA)的表达量,本研究建立了一种改进的qRT-PCR(Quantitative reverse transcription PCR)技术。方法:采用具有高特异性的茎环引物逆转录,结合SYBR Green实时定量PCR技术,建立了以延伸茎环引物RT-PCR为基础的实时定量检测microRNA的方法。结果:本研究建立的microRNA检测方法,特异性好,灵敏度高,线性范围宽。熔解曲线的单一峰型和电泳检测到的单一条带都证明了扩增的特异性。对标准品的检测跨越了7个数量级的浓度范围,最低拷贝数为103,效率高达98%。结论:利用该技术检测了120个组织样本,说明该方法可快速、准确、高效的获取不同组织中miRNA的表达量,为进一步探讨miRNA对性发育的影响提供了实验依据。
- 薛慧慧马骁骁朱长保晁天柱肖君华周宇荀
- 关键词：MIRNART-PCR
- 胆固醇代谢qPCR array检测方案的建立及其应用
- 糖尿病患者往往存在血脂异常,是动脉粥样硬化的危险因素。血脂异常可以加速动脉粥样硬化的形成和进展,增加糖尿病大血管病变的发生与发展。然而机体内脂质代谢是一个相当复杂的生物过程,涉及到一系列的基因,糖尿病脂质代谢紊乱的发生机...
- 朱长保
- 关键词：胆固醇代谢基因表达葡萄糖
- 文献传递
