张胜
- 作品数：10 被引量：54H指数：4
- 供职机构：西北农林科技大学林学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家林业公益性行业科研专项新疆维吾尔自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 不同树龄银杏叶片差异蛋白组学研究被引量：3
- 2018年
- 为了在蛋白表达水平上了解银杏(Ginkgo biloba)基于年龄变化的叶片蛋白质表达特征,寻找与年龄变化相关的响应蛋白,以楼观台老子手植银杏(约2 600年生)、说经台银杏(约800年生)和20年生幼龄银杏的叶片为研究对象,利用双向凝胶电泳(2-DE)和MALDI TOF/TOF MS/MS技术研究3个树龄银杏叶片蛋白质差异表达。蛋白质2-DE凝胶图谱经PD-Quest 8.0软件分析与检测分别得到340、341和410个点形规则清晰、可重复的蛋白点,这些蛋白点的分子质量大多分布在20~50ku(占70%),等电点主要集中分布在pH 5~6.5(占75%);选取37个差异显著蛋白质凝胶点进行MALDI TOF/TOF MS/MS鉴定分析,成功鉴定30个蛋白质点,经过功能注释得出这些蛋白质主要参与能量及碳水化合物代谢(40%)、蛋白及氨基酸合成代谢(20%)及光合作用(16.7%)等途径;通过聚类分析得到基于年龄变化的蛋白质差异表达图谱,在高龄银杏叶片中上调表达的蛋白有11个,主要与光合作用、蛋白质及氨基酸代谢有关,下调表达的有8个,主要参与植物的能量及碳水化合物代谢。本研究明确了不同树龄银杏叶片差异蛋白参与的代谢途径,为进一步从分子水平深入了解银杏抗衰老的机理提供了理论基础。
- 周凯凯张胜赵忠
- 关键词：蛋白质组学双向凝胶电泳差异表达蛋白
- 油用向日葵铵转运基因HaAMT1.1的克隆及功能分析
- 2022年
- AMT1.1是铵转运家族的基因之一,在植物吸收转运NH_(4)^(+)中起到重要作用。为了明确氮素在植物体的转运吸收机制,本研究以油用向日葵‘早矮大头’为研究材料,成功从中克隆向日葵AMT1.1的同源基因HaAMT1.1。生物信息学分析表明该基因CDS区长1497 bp,编码491个氨基酸;正电荷残基28个,占氨基酸总数的5.7%,负电荷残基30个,占氨基酸总数的6.1%;其分子式为C_(2417)H_(3625)N_(597)O_(668)S_(22),预测分子量为52439.29 Da,理论等电点为6.58;HaAMT1.1为疏水性蛋白,无跨膜结构域,具有Ammonium Transp超家族保守结构域,与黄花蒿AMT1.1亲缘关系最近。亚细胞定位结果表明HaAMT1.1位于细胞质膜和细胞核上。实时荧光定量PCR分析表明,不同组织中Ha AMT1.1基因在根系中表达量最高;不同NH_(4)^(+)浓度处理下,该基因在经低浓度NH_(4)^(+)处理的表达量显著高于经高浓度NH_(4)^(+)处理的组织。本研究结果为进一步分析HaAMT1.1基因的生物学功能提供参考。
- 张爽李一谭定权王淑冉张胜
- 关键词：油用向日葵亚细胞定位
- 国槐氮素转运对干旱胁迫的分子响应机制被引量：3
- 2017年
- 为了从分子水平上了解国槐(Sophora japonica)氮素转运对干旱胁迫的响应机制,以国槐为对象,参考大豆(Glycine max)和鹰嘴豆(Cicer arietinum)氮素转运同源基因,设计国槐氮素转运蛋白基因克隆引物,克隆国槐氮转运蛋白基因;测定不同程度(轻度、中度、重度)干旱胁迫下国槐幼苗氮素转运蛋白基因相对表达量。结果表明,通过同源克隆得到5条氮素转运蛋白基因,SjNPF2.11、SjNPF2.13、SjNPF7.2、SjAMT1.3和SjAMT2.1,基因片段长度分别为424、490、294、407、577bp。其中SjNPF2.13在国槐根部的表达量在中度和重度胁迫36h后开始显著上升;叶部的表达量在中度和重度胁迫24h后开始显著上升,轻度胁迫48h后表达量显著上升;SjNPF7.2根部的表达量在中度和重度胁迫24h后开始显著上升;叶部的相对表达量在重度干旱胁迫24h和48h时显著下降;SjAMT1.3根部的表达量在各干旱胁迫处理24h和36h后显著上升。叶部的表达量在重度干旱胁迫12h后开始显著下降。试验表明,SjAMT1.3可能参与干旱胁迫下国槐根系对铵盐的吸收,而SjNPF2.13和SjNPF7.2可能参与干旱胁迫下硝酸盐在国槐体内的转运和同化。
- 苏莉孟森张胜李怡鸣赵忠
- 关键词：国槐同源克隆干旱胁迫
- 四倍体刺槐枝条韧皮部总蛋白质双向电泳体系建立及应用被引量：2
- 2013年
- 采用TCA/丙酮法对四倍体刺槐枝段韧皮部全蛋白质进行提取,通过对IPG胶条pH梯度、分离胶浓度的选择,上样量、等电聚焦条件的优化,建立起四倍体刺槐枝段韧皮部蛋白质双向电泳体系。研究结果表明:采用TCA/丙酮法提取四倍体刺槐枝段韧皮部全蛋白质,选用pH4-7的17 cm IPG胶条,考马斯亮蓝染色上样量550μg,等电聚焦IEF聚焦总伏小时数从60 000 Vh提高到80 000 Vh,并采用12%的分离胶对四倍体刺槐枝段韧皮部全蛋白进行双向电泳,能得到背景清晰、蛋白质点数相对较多,分离度高且重复性好的电泳图谱。利用建立的体系进行双向电泳分离蛋白质,能直接挖点送质谱分析。采用该体系分析四倍体刺槐硬枝扦插生根愈伤组织阶段蛋白质表达差异,共筛选出83个差异蛋白质点,其中上调蛋白15个,新产生蛋白22个,下调蛋白22个,缺失表达24个。
- 张胜赵忠刘昭军张博勇宗建伟张玲玲
- 关键词：四倍体刺槐韧皮部双向电泳
- 木质素含量对四倍体刺槐嫩枝插穗扦插生根的影响被引量：10
- 2014年
- 以四倍体刺槐1年生嫩枝插条为试验材料,分析插穗木质素含量与其横截面剪切强度、相关酶活性和激素关系,并探究不同木质素含量的插穗扦插生根性状的效应,为四倍体刺槐扦插选择合适插穗提供理论参考。结果表明:(1)插穗的木质素含量与其横截面剪切强度呈极显著正相关关系(相关系数为0.99),根据剪切强度可以间接地估算其木质素含量。(2)插穗的木质素含量与其POD和PPO活性呈极显著正相关关系(POD相关系数为0.98,PPO相关系数为0.92),也与激素ABA含量呈极显著的正相关关系(相关系数为0.97),而同IAA、IBA呈不显著的相关性,根据POD和PPO活性以及激素ABA含量对生根的影响可以推测木质素含量对生根有一定的影响。(3)不同木质素含量的插穗生根性状差异显著,木质素含量为19.47%时插穗生根能力最强,其插穗生根率为60.39%,平均每株生根量为9.70个,根长为4.85cm;木质素含量为10.60%时插穗生根能力最差。(4)生根性状最佳时的木质素含量为19.47%,其对应的剪切强度范围为40～50kg。
- 权金娥张春霞张晓鹏朱海兰张胜赵忠
- 关键词：四倍体刺槐嫩枝插穗木质素含量生根率
- 四倍体刺槐茎段组织石蜡切片的制作方法被引量：16
- 2014年
- 以传统石蜡切片方法为基础,针对林木茎段木质化程度高、硬度和脆性大的特点对固定、软化、脱水、透明、染色等具体步骤进行了改进,并成功应用于四倍体刺槐生根过程插穗基部解剖学研究。结果表明:较传统方法切片时组织不易碎,切片结构完整,减少了脱水时间,缩短了制片周期;获得了厚度为8μm且染色清晰、细胞结构完整的林木茎段横切面切片;四倍体刺槐插穗石蜡切片可清晰的观察大量能够反映生根各时期发育特征。该方法为进一步从解剖学上研究林木茎段组织生长机制提供基础,为探究其组织形态变化提供了新的技术方法。
- 权金娥朱海兰张春霞张胜赵忠
- 关键词：四倍体刺槐石蜡切片制作方法
- 梭梭SCARECROW-like 30基因的克隆、表达及功能分析被引量：1
- 2022年
- SCARECROW-like(SCL)是GRAS转录因子中的重要成员,主要参与植物生长发育、逆境胁迫响应以及赤霉素(GA)信号转导调控等。本研究基于梭梭转录组数据克隆获得1条在干旱胁迫下显著上调表达的SCL基因,并命名为HaSCL30。HaSCL30全长编码序列(CDS)为2109 bp,编码702个氨基酸,预测蛋白分子量为78.37 kDa,理论等电点为5.57,为不稳定亲水性蛋白,具有GRAS超家族保守结构域。多序列比对及系统进化表明梭梭HaSCL30蛋白与同为C4植物的玉米ZmSCL30及同科植物甜菜BvSCL30同源性较高、亲缘关系较近。STRING蛋白互作分析预测出SCL30蛋白与转录因子WRKY33和ERF104具有共表达特征。HaSCL30基因在梭梭不同组织(子叶、同化枝及根)均有表达,在子叶中相对表达量最高。在干旱和盐胁迫下HaSCL30出现不同程度上调表达。亚细胞定位结果表明HaSCL30定位于细胞核和细胞膜。酵母异源表达结果显示,过表达HaSCL30能提高酵母耐盐和耐旱性。基于以上结果,HaSCL30可能参与荒漠植物梭梭的高盐、干旱胁迫响应,对其荒漠环境生存能力的提高存在正向调控作用。研究结果为进一步揭示HaSCL30在梭梭抗旱耐盐中的功能及作用机制提供依据。
- 彭洁莹李彩弟刘洁谭定权王淑冉赵忠张胜
- 关键词：梭梭亚细胞定位酵母表达
- 梭梭qRT-PCR内参基因的筛选及稳定性分析
- 2023年
- 研究旨在探明梭梭(Haloxylon ammodendron)不同非生物胁迫下稳定表达的内参基因,为后续梭梭抗逆性相关基因功能研究奠定基础。采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)技术从梭梭转录组数据库中检测了GAPDH、EF1-α、UBC、RPL32、ALB、50S-1721、50S-1063、RPⅡ、H3、PP2A、SOD、HSC70、TUA和TUB 14个候选内参基因在热胁迫、干旱、盐、ABA和昼夜节律条件下的表达变化,利用geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder软件对梭梭候选内参基因的稳定性进行评价,最终筛选出合适的内参基因,并通过对梭梭磷酸烯醇丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC)基因表达分析,验证不同内参基因对试验结果的影响。4种软件分析得到的最优内参基因存在差异,在RefFinder网站上综合排序分析表明,在ABA处理和昼夜节律下,ALB是最优内参基因,RPⅡ基因在干旱胁迫下表达最稳定,TUB和RPⅡ基因在盐胁迫下最适用,H3基因在热胁迫下表达最为稳定。各种胁迫下最适宜的内参基因为ALB和RPL32。计算几何平均值得14个候选内参基因的综合稳定性排名,其中排名前2位的基因分别为SOD和RPL32。综上,SOD和RPL32可作为梭梭qRT-PCR标准化的内参基因。
- 张玲玲王淑冉张胜
- 关键词：梭梭非生物胁迫内参基因QRT-PCR
- IBA对文冠果硬枝扦插根系形态指标的影响被引量：17
- 2012年
- 对文冠果硬枝扦插苗生根根系形态特征进行定量分析,研究其根系总长度、根系总表面积、总体积等根系形态指标及其与IBA浓度变化的关系。结果表明:与清水对照(CK)相比较,IBA显著(P<0.05)提高了插穗根系总根长、总表面积、总体积形态指标;随着IBA浓度的升高,根系各形态指标呈现先升高后降低的趋势,总根长和总表面积峰值均出现在IBA浓度为800mg/L,且生根率达到了65.40%;经IBA处理的插穗生根根系主要分布在径级>2.0mm区间;根系总根长、总表面积、总体积与IBA浓度相关性均达到显著性水平。经回归分析,当IBA浓度保持在795～820mg/L时,文冠果插穗可获得较高的根系形态指标。
- 宗建伟杨雨华赵忠刘昭军张胜
- 关键词：硬枝扦插
- 文冠果枝条韧皮部蛋白质双向电泳体系的建立被引量：4
- 2012年
- 以文冠果当年生硬枝韧皮部为材料,通过TCA/丙酮法提取总蛋白,研究了不同的蛋白质裂解液组成对双向电泳的影响,并在胶条选择、蛋白质上样量和等电聚焦时间等方面进行了优化。结果表明,TCA/丙酮提取法适用于提取文冠果韧皮部组织总蛋白,得到的图谱背景低,蛋白质点清晰;样品溶解于含有尿素和硫脲的蛋白质裂解液Ⅱ中,可显著地提高蛋白质的溶解性,获得的总蛋白溶液浓度远大于裂解液Ⅰ提取的总蛋白溶液浓度。在适宜的时间范围用超声波破碎仪处理蛋白质粉溶液有助于大幅度提高裂解液中蛋白质的浓度。等电聚焦条件宜根据样品特性选择,80 000Vh能够使得文冠果韧皮部蛋白质双向凝胶碱性端的横条纹大大减少。
- 刘昭军张胜赵忠张博勇宗建伟
- 关键词：韧皮部双向电泳技术
