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兼抗玉米矮花叶病毒及粗缩病毒无选择标记siRNA复合表达载体的构建: 2011年; 根据GenBank和MaizeSeq等数据库中的玉米矮花叶病毒和粗缩病毒外壳蛋白基因(CP)全序列设计特异性引物,RT-PCR扩增玉米矮花叶病毒及粗缩病毒的CP基因特异性RNA干扰片段,分别构建反向重复片段并串联成pBluscript+SM;Hind III-EcoR I双酶切2T-DNA真核表达载体pDTB,插入Ubiquitin启动子及Nos终止子,构建pDTBU;串联的反向重复片段插入pDTBU,构建兼抗玉米矮花叶病毒和粗缩病毒的siRNA复合表达载体pDTBUSM。酶切结果显示,目的片段均正确插入到相应的载体中。本研究对开展抗病毒RNA干扰调控技术研究,创建高抗病毒玉米新种质具有重要的理论和实践意义。; 张姣赵阳甘德芳; 关键词：玉米矮花叶病毒玉米粗缩病毒外壳蛋白 SIRNA

玉米兼抗矮花叶病毒及粗缩病毒无选择标记siRNA复合表达载体及其构建方法: 本发明公开了一种玉米兼抗矮花叶病毒及粗缩病毒无选择标记siRNA复合表达载体及其构建方法。RT-PCR分别扩增玉米矮花叶病毒及粗缩病毒外壳蛋白基因特异性片段，构建反向重复表达载体，利用中间载体分别将玉米矮花叶病毒外壳蛋白...; 甘德芳程备久朱苏文张姣赵阳程郢; 文献传递

玉米体外应用dsRNA抗矮花叶病毒干扰调控技术: 本发明是一种生物技术领域的利用RNA干涉技术，玉米体外应用dsRNA抗MDMV干扰调控技术。利用RT-PCR扩增玉米矮花叶病毒CP基因两个特异性片段，构建反向重复表达载体LMCP1及LMCP2，利用IPTG诱导表达，在大...; 程备久甘德芳朱苏文马庆张姣赵阳程郢; 文献传递

玉米矮花叶病毒CP基因dsRNA的原核表达与分离被引量：1: 2011年; 根据玉米矮花叶病毒CP基因序列设计特异性引物,RT-PCR扩增玉米矮花叶病毒CP基因特异性干涉片段,将干涉片段及pUCCRNAi载体分别用BamH I及Sal I双酶切,然后将干涉片段分别正反向插入pUC-CRNAi载体中,构建CP基因反向重复克隆载体pUCCRNAi+2 F。再利用PstⅠ-Sal I位点插入到L4440质粒中构建原核表达载体LMCP。利用IPTG进行诱导表达并对诱导表达条件进行优化。结果表明,经过IPTG诱导,LMCP在大肠杆菌HT115(DE3)菌株中可表达产生预期大小的核酸片段,经DNase I和RNase A消化处理,证实为dsRNA。同时IPTG浓度为0.4～0.6mmol/L,诱导表达4h,dsRNA的表达量最高。另外,溶解于ddH_2O中的dsRNA稳定性要高于溶解在NaCl中的,且随着放置时间的延长,dsRNA将出现明显的降解。; 甘德芳张姣赵阳朱苏文程备久; 关键词：DWARF CP基因原核表达 DSRNA

外源dsRNA抗甘蔗花叶病毒干扰调控研究: 玉米（Zea mays L.）是重要的粮食作物与饲料作物，也是现代蔬菜、食品、医药与化学工业的重要原料。然而，玉米病害尤其是玉米矮花叶病成了限制我国玉米产量与质量的重要因素。传统的育种方法由于抗性资源的匮乏及物种间的遗传...; 张姣; 关键词：甘蔗花叶病毒遗传育种抗病毒基因工程; 文献传递

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张姣