陈发
- 作品数：10 被引量：0H指数：0
- 供职机构：湖南师范大学更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 利用斑马鱼模型研究心脏和骨骼肌特异表达基因fhlA的功能
- HL家族含有四个半LIM结构域而得名,通过LIM结构域与其他蛋白质相互作用,在细胞增殖、肿瘤与骨骼肌疾病的发生、以及基因的转录调节中发挥重要的作用,但其是否调控心脏的发育尚不得而知。FHLA是我们从斑马鱼心脏组织cDNA...
- 谢华平唐雄卓陈发屈永贵叶湘漓陈婷芳吴秀山邓云
- 文献传递
- 斑马鱼Had31基因在心脏左右不对称发育中的作用研究
- 心脏左右不对称畸形影响着人们的生活品质,甚至导致死亡。目前对心脏左右不对称发育过程牵涉到的分子机制仍不清楚,因此,研究调控心脏左右不对称发育候选基因的功能及其作用的分子机制具有重要的理论与临床应用意义。本文首先利用斑马鱼...
- 陈发
- 关键词：斑马鱼
- 利用斑马鱼模型研究心脏和骨骼肌特异表达基因fh1A的功能
- HL家族含有四个半LIM结构域而得名,通过LIM结构域与其他蛋白质相互作用,在细胞增殖、肿瘤与骨骼肌疾病的发生、以及基因的转录调节中发挥重要的作用,但其是否调控心脏的发育尚不得而知.FHLA是我们从斑马鱼心脏组织cDNA...
- 谢华平唐雄卓陈发屈永贵叶湘漓陈婷芳吴秀山邓云
- 斑马鱼fhlA在骨骼肌发育中的作用
- 调控骨骼肌发育的分子机制尚不完全明了.有证据显示LIM-only蛋白FHL1与骨骼肌的生长以及人体骨骼肌病有关联,但FHL1在骨骼肌发育中的作用还有待阐明.本文以斑马鱼为模型研究了FHL1在斑马鱼中的一个同源基因fhl1...
- 谢华平陈发周作琼李佑锋彭浩邓云吴秀山李永青
- 关键词：卫星细胞
- 文献传递
- 斑马鱼Nfatc3基因多克隆抗体的制备及检测
- 2014年
- 为了在斑马鱼模型中更深入地研究Nfatc3蛋白在心脏发育中的功能,采用PCR技术扩增斑马鱼Nfatc3基因的部分编码区并插入pET-28a表达载体中,之后将重组质粒转入大肠杆菌(E.coli)通过IPTG诱导表达His-Nfatc3融合蛋白,对该融合蛋白采用Ni-IDA凝胶柱层析纯化后,免疫新西兰兔制备了多克隆抗体,并用western blotting对抗体进行分析.结果表明获得了高效价的特异性兔抗Nfatc3多克隆抗体.这为Nfatc3功能的进一步研究奠定了基础.
- 冯德峰屈永贵袁佳佳陈发吴秀山李永青
- 关键词：斑马鱼融合蛋白多克隆抗体
- 斑马鱼瓣膜高表达基因kbtbd1在心脏瓣膜结构发育中的功能研究
- 已有研究表明,心脏瓣膜的形成受各种调控因子及其信号通路的控制,其调控异常导致瓣膜发育缺损。我们前期从大规模基因表达分析中,筛选出人类KBTBD1 基因是调控人类心脏发育和心脏疾病发生的一个重要候选基因;斑马鱼Kbtdb1...
- 陈发彭夕洋陈圆圆吴燕廖艳伟曹灵慧罗孝宇吴秀山邓云
- 关键词：瓣膜心脏发育
- 利用WISH技术研究斑马鱼TMP3和FHLA基因在心脏和骨骼肌发育中的作用
- 脊椎动物的心脏是最早出现并表现出功能的器官之一。它的发育过程极其复杂，受到一系列心脏发育相关基因的精确调控。这些基因发生异常将会导致先天性心脏病，严重的将会导致胚胎的死亡。目前对心脏发育过程中牵涉到的分子机制仍然不清楚，...
- 陈发
- 关键词：脊椎动物
- 文献传递
- 斑马鱼fhIA在骨骼肌发育中的作用
- <正>调控骨骼肌发育的分子机制尚不完全明了。有证据显示LIM-only蛋白FHL1与骨骼肌的生长以及人体骨骼肌病有关联,但FHL1在骨骼肌发育中的作用还有待阐明。本文以斑马鱼为模型研究了FHL1在斑马鱼中的一个同源基因f...
- 谢华平陈发周作琼李佑锋彭浩邓云吴秀山李永青
- 文献传递
- CRISPR/Cas9系统对斑马鱼fhl1a基因敲除有效性的研究
- 2017年
- 为研究fhl1a基因在心脏发育中的作用,利用CRISPR/Cas9系统敲除斑马鱼fhl1a基因.在斑马鱼fhl1a基因的三号外显子处选取打靶位点,构建sgRNA表达载体.将体外转录的sgRNA和Cas9 mRNA混合物分别显微注射到斑马鱼单细胞期的受精卵中以期实现对目的靶基因fhl1a的敲除.随后收集部分72 h胚胎进行PCR检测和产物直接测序,确定有无突变.为进一步验证突变是否可稳定遗传,选择具有敲除了的F_0与野生型斑马鱼进行外交,对获得的F_1进行逐一剪尾,提取DNA进行PCR和测序分析.结果显示F_1获得了不同程度的插入、缺失等突变类型.研究结果证明所设计的fhl1a基因CRISPR/Cas9敲除系统能在斑马鱼体内有效地形成基因突变,该突变能稳定地遗传到下一代个体,这为进一步研究fhl1a基因在心脏发育中的具体调控机制打下了基础.
- 陈思行陈发蔡湾湾吴燕廖艳伟邓云吴秀山王跃群
- 关键词：斑马鱼
- 斑马鱼心脏发育候选基因Klhl31的TALEN打靶有效性分析
- 2016年
- TALEN(transcription activator-like effector nuclease)打靶是一种定向敲除基因技术,利用该技术能解决目前在斑马鱼体内难以进行基因敲除的难题。Klhl31是本实验室鉴定的人类心脏发育候选基因,且目前国内外尚无斑马鱼Klhl31敲除品系。为了在斑马鱼的整体水平鉴定Klhl31的生物学功能,我们利用TALEN打靶技术建立斑马鱼Klhl31基因敲除品系。酶切验证的结果显示,注射了TALEN表达质粒的胚胎在酶切位点处发生了基因突变,该突变破坏了酶切位点导致酶切出现阳性结果,证明了TALEN打靶的有效性。对F0代突变体成鱼的筛选过程中,经酶切验证,同样出现了阳性结果。这些结果说明用TALEN这种技术成功敲除了斑马鱼Klhl31基因,获得了Klhl31基因敲除的嵌合体斑马鱼。
- 蔡湾湾陈发万永奇吴秀山邓云袁婺洲
- 关键词：TALEN酶切位点基因敲除
