程航远
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：兰州大学基础医学院病理学研究所更多>>
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- 维甲酸对丙烯醛作用下大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的影响
- 目的建立原代大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）的分离、纯化及原代培养的方法,探索丙烯醛对AECⅡ细胞周期的影响,同时观察维生素A酸（RA）能否拮抗丙烯醛对AECⅡ的损伤作用。方法用4.2u/ml的弹性蛋白酶溶液通过气管插管...
- 程航远
- 关键词：肺泡上皮细胞丙烯醛维甲酸细胞周期
- 文献传递
- 大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的原代分离被引量：4
- 2012年
- 目的建立大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar epithelial cells typeⅡ,AECⅡ)分离、纯化、原代培养及鉴定的方法。方法用4.2U/ml的弹性蛋白酶通过气管插管注入肺泡内,消化分离AECⅡ。把细胞悬液接种到包被有大鼠IgG的塑料平皿中纯化细胞。用电镜、碱性磷酸酶显色法、改良巴氏染色法、单宁酸染色法、免疫组化染色法鉴定AECⅡ。结果细胞纯度达到90%以上,倒置显微镜下可见细胞呈岛屿状生长。电镜下可见细胞内有大量板层小体,包膜上有绒毛结构。碱性磷酸酶染色法(BCIP/NBT)可见胞浆内有蓝色颗粒。改良巴氏染色法、单宁酸染色法可见胞浆内有黑色颗粒。抗大鼠肺泡表面活性蛋白A(surfactant protein A,SP-A)免疫组化染色呈阳性反应。结论弹性蛋白酶作用温和,不损伤胞膜,分离所得细胞活力好;IgG免疫粘附纯化法操作简单,纯化效率高。电镜、BCIP/NBT、巴氏染色、单宁酸染色及免疫组化染色等鉴定方法稳定可靠,特异性高。
- 焦宗宪程航远张强弩朱艳芳王晨昱王勇刘沨
- 关键词：肺泡上皮细胞纯化细胞鉴定
- 维甲酸拮抗丙烯醛损伤肺泡Ⅱ型上皮细胞的作用被引量：1
- 2012年
- 背景:肺泡Ⅱ型上皮细胞是肺泡上皮组织的干细胞,它的损伤和多种肺部疾病密切相关。有研究显示维甲酸不仅能促进发育期大鼠肺泡的形成,还能促进肺损伤后的修复,但也有研究表明维甲酸在肺气肿模型的治疗中无明显作用。目的:探索维甲酸能否拮抗丙烯醛对原代培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的损伤作用。方法:综合Dobbs等的细胞分离方法并加以改良,从普通雄性SD大鼠肺组织中成功分离出较高纯度的肺泡Ⅱ型上皮细胞,并行原代培养。应用MTT法检测丙烯醛对肺泡Ⅱ型上皮细胞活性的影响,流式细胞术检测在丙烯醛及维甲酸作用下肺泡Ⅱ型上皮细胞的细胞周期变化。结果与结论:MTT检测结果显示丙烯醛作用下大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞生长明显受抑,而且肺泡Ⅱ型上皮细胞活性与药物浓度成剂量效应关系。流式细胞仪检测结果显示丙烯醛作用下G1期细胞增加,维甲酸对丙烯醛的拮抗作用不明显。提示丙烯醛对原代培养的肺泡Ⅱ型上皮细胞具有明显的损伤作用,但维甲酸对丙烯醛的拮抗作用不明显,其作用机制还需进一步深入研究。
- 程航远张强弩朱艳芳王晨昱王勇刘沨焦宗宪
- 关键词：原代培养丙烯醛维甲酸肺损伤细胞活性
