欧阳翔
- 作品数:5 被引量:16H指数:2
- 供职机构:南京农业大学生命科学学院农业部农业环境微生物工程重点开放实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生更多>>
- 灵芝羟甲基戊二酰辅酶A合酶基因的克隆及其表达和功能特性的研究
- 灵芝三萜类化合物是灵芝的重要药用成分,具有多种重要的生理功能,灵芝中三萜含量的高低已经成为灵芝质量高低的重要指标。灵芝羟甲基戊二酰辅酶A合酶基因(GlHMGS)作为甲羟戊酸途径中的第一个催化酶,催化乙酰CoA与乙酰乙酰C...
- 欧阳翔
- 关键词:灵芝三萜启动子功能特性
- 文献传递
- 灵芝漆酶基因Cu2+诱导特性研究及其启动子的克隆与序列分析
- 本文以Cu为诱导物,检测灵芝漆酶同工酶基因的转录特性。研究发现:灵芝漆酶基因在Cu的作用下表达量出现明显差异,其中以发酵液中添加3.0 mmol·LCu、诱导时间为6天时,漆酶基因的mRNA表达量最高。根据GenBank...
- 欧阳翔吴婧丁一新李玉祥赵明文
- 关键词:漆酶半定量RT-PCR转录调控
- 文献传递
- 灵芝漆酶基因转录Cu^(2+)诱导特性及其启动子的克隆与序列分析被引量:5
- 2009年
- 以Cu2+为诱导物检测了灵芝漆酶同工酶基因的转录特性,并对其启动子进行了克隆及序列分析。研究发现:灵芝漆酶基因在Cu2+的作用下表达量出现明显差异,其中以在发酵液中添加3.0 mmol.L-1Cu2+、诱导时间为6 d时,漆酶基因的mRNA表达量最高。根据GenBank中已报道的灵芝漆酶基因的序列信息,经PCR扩增获得了灵芝漆酶5′端长879bp的基因特异序列,进而通过self-formed adaptor PCR(SEFA-PCR)方法,扩增得到灵芝漆酶基因起始密码子上游长832bp的启动子序列。分析表明,该启动子区域除分布有TATA-box、CAAT-box及GC-box等基本的转录起始元件外,还存在多个潜在的顺式作用元件序列位点,包括4个MRE元件、4个STRE元件、11个HSE元件和5个氮因子结合位点等。
- 欧阳翔吴婧丁一新李玉祥赵明文
- 关键词:ADAPTORPCR转录调控
- 灵芝羟甲基戊二酰辅酶A合酶基因的克隆及其表达特性被引量:9
- 2013年
- 灵芝三萜类化合物是灵芝的重要药用成分,具有多种重要的生理功能,灵芝中三萜含量的高低已成为衡量灵芝质量高低的重要指标。灵芝羟甲基戊二酰辅酶A合酶基因(A hy-droxymethylglutary-l CoA synthase,GlHMGS)作为甲羟戊酸途径中的第一个催化酶,催化乙酰CoA与乙酰乙酰CoA生成羟甲基戊二酰CoA,对于灵芝三萜的合成起着十分重要的作用。分别以灵芝总基因组DNA和反转录的原基cDNA为模板,扩增得到GlHMGS基因的全长DNA和cD-NA序列,该基因DNA全长1 870 bp,其中ORF为1 413 bp,编码471个氨基酸,推测的分子量为51.14kD。通过比对获得的DNA和cDNA序列,发现GlHMGS由5个外显子和4个内含子构成。与NCBI数据库中HMGS的蛋白序列比对发现,GlHMGS与解脂耶罗威亚酵母的HMGS表现出最高的同源性(51%)。进化树分析也表明GlHMGS与真菌亲缘关系最近,这与灵芝的物种分类相吻合。通过酿酒酵母HMGS缺陷的菌株证实所得GlHMGS能够使HMGS缺陷的表型得到互补,证实GlHMGS的功能。利用SEFA-PCR技术扩增GlHMGS基因上游启动子序列,该序列长约1 561 bp,用Softberry等软件对启动子序列进行分析,发现GlHMGS基因启动子中包含有明显的TATA-box和CAAT-box,并发现了多个与甾醇、激素和环境压力等调节相关的顺式作用元件。进一步研究发现,茉莉酸甲酯、脱落酸和水杨酸能够提高GlHMGS基因的转录水平。在研究不同发育阶段和不同碳源对GlHMGS基因的影响时,发现GlHMGS基因的表达水平分别在第16天和以麦芽糖为碳源时达到最大。通过过量表达GlHMGS基因能够显著提高灵芝三萜含量。
- 任昂欧阳翔师亮姜爱良穆大帅李梦娇韩琴赵明文
- 关键词:灵芝三萜表达谱
- 灵芝羟甲基戊二酰辅酶A合酶基因的克隆及其表达特性
- 灵芝三萜类化合物是灵芝的重要药用成分,具有多种重要的生理功能,灵芝中三萜含量的高低已成为衡量灵芝质量高低的重要指标.灵芝羟甲基戊二酰辅酶A合酶基因(Ahydroxymethylglutaryl-CoA synthase,...
- 任昂欧阳翔师亮姜爱良穆大帅李梦娇韩琴赵明文
- 关键词:灵芝三萜表达谱