何小丹
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 供职机构：南京工业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划江苏省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程更多>>
- 地衣芽孢杆菌YP1A耐有机溶剂蛋白酶基因的克隆与功能表达被引量：5
- 2009年
- 根据B.licheniformisYP1A来源的碱性蛋白酶具有的高强度耐有机溶剂性能及相关数据库分析,采用PCR克隆B.licheniformisYP1A耐有机溶剂碱性蛋白酶基因,序列分析显示该基因(1 264 bp)包含启动子与编码380个氨基酸的开放阅读框(ORF),ORF包括信号肽、前肽及编码254个氨基酸的成熟肽序列。相关基因分析表明,YP1A耐有机溶剂碱性蛋白酶基因与地衣芽孢杆菌ATCC14580的碱性蛋白酶基因仅有6个氨基酸残基差异。构建2种含YP1A碱性蛋白酶CDS的组成型穿梭表达载体pHY/aprYP与pHY/aprP43,前者采用YP1A蛋白酶自带的启动子,后者则采用来自于质粒pP43NMK的P43强启动子。利用这2种表达载体在枯草芽孢杆菌WB800中成功进行蛋白酶的功能表达,其中P43强启动子的表达能力明显优于碱性蛋白酶自带的启动子,表达的蛋白酶比酶活为395 U/mL。重组菌表达的碱性蛋白酶在体积分数50%的亲水及疏水有机溶剂中表现出了很好的耐受性,验证了克隆基因为地衣芽孢杆菌YP1A的高强度耐有机溶剂碱性蛋白酶基因。
- 何小丹李霜孙蓓蓓何冰芳
- 关键词：克隆
- 利用Biolog系统进行乳酸生产菌代谢能力的快速分析被引量：5
- 2009年
- 利用Biolog系统考察目标菌株对产乳酸途径相关碳源的代谢能力,表明在厌氧条件下两自行筛选的候选菌株中S-18比菌株S-44具有更高的己糖激酶和乳酸脱氢酶等产乳酸代谢关键酶活力;通过好氧条件下产乳酸途径及旁路相关碳源利用能力的考察,显示在好氧条件下丙酮酸更易转向旁路代谢且L-乳酸脱氢酶受到强烈抑制,为乳酸发酵条件的优化与调控奠定了理论基础。利用Biolog系统对特定代谢途径代谢能力进行分析的方法具有快速、简便、重现性高的特点,并适合高通量分析的目的,可促进工业微生物代谢能力及代谢调控研究的普遍开展。
- 柏中中许婷婷何小丹何冰芳
- 溶剂稳定性蛋白酶产生菌Bacillus licheniformis YP1的发酵优化
- 2008年
- 溶剂稳定性蛋白酶产生菌Bacillus licheniformisYP1分离自油田土样。考察了碳源、氮源、金属离子等营养因素对YP1菌株发酵产溶剂稳定性蛋白酶的影响。YP1菌株发酵产胞外蛋白酶的最佳碳源为淀粉,果糖、甘露糖和乳糖显著抑制产酶;最佳氮源为酵母膏,干酪素、酵母粉和牛肉膏促进产酶,玉米浆和尿素显著抑制产酶。Mn2+可以显著促进酶活,Mg2+可以促进产酶,在初步优化的培养条件下,YP1菌株的胞外蛋白酶产量达980 U。
- 李霜陈加罡何小丹何冰芳
- 关键词：BACILLUSLICHENIFORMIS
- 耐有机溶剂蛋白酶产生菌PT121基因的克隆及异源表达
- 蛋白酶催化的最普通的反应是水解蛋白质中的肽键，而在有机相中能进行水解的逆反应，可表现为酰胺酶活力或酯酶活力。利用蛋白酶在有机相中合成肽的衍生物，不仅使得底物中的氨基酸部分侧链不需保护，而且避免了在化学法合成中存在的产物消...
- 何小丹李秀婷吴光耀何冰芳
- 关键词：大肠杆菌枯草杆菌
- 一种耐有机溶剂蛋白酶高产菌以及该耐有机溶剂蛋白酶的基因和应用
- 本发明公开了一种耐有机溶剂蛋白酶高产菌株，其蛋白酶基因以及该蛋白酶在有机相中催化肽合成中的应用。该菌株分类命名为Pseudomonas aeruginosaPT121，其保藏登记号为：CCTCC M 208029，为革兰...
- 何冰芳欧阳平凯唐啸宇何小丹潘瑶姚忠柏中中
- 文献传递
- 一种耐有机溶剂蛋白酶高产菌以及该耐有机溶剂蛋白酶的基因和应用
- 本发明公开了一种耐有机溶剂蛋白酶高产菌株，其蛋白酶基因以及该蛋白酶在有机相中催化肽合成中的应用。该菌株分类命名为Pseudomonas aeruginosaPT121，其保藏登记号为：CCTCC M 208029，为革兰...
- 何冰芳欧阳平凯唐啸宇何小丹潘瑶姚忠柏中中
- 文献传递
