- 聚合酶链式反应递缩基因组文库以克隆抗生素生物合成基因簇被引量：5
- 2009年
- 在克隆阿维菌素(avermectin)生物合成基因簇的过程中,探索出了一条运用聚合酶链式反应(PCR)扩增技术对链霉菌基因组文库进行递缩法筛选、以克隆抗生素生物合成基因簇的新方法.依次以96孔培养板整板混合质粒、单排混合质粒和单个菌落为模板进行PCR扩增,以逐步递缩的方式定位包含目的基因的克隆.结果表明,与传统的菌落原位杂交方法相比,该方法具有简单、快捷、准确率高等优点.
- 何云龙朱冬青白林泉邓子新
- 关键词：聚合酶链式反应阿维菌素克隆基因组文库基因簇
- 聚醚类南昌霉素生物合成中糖基转移酶NanG5及甲基转移酶NanM的功能研究
- 通过对南昌链霉菌中南昌霉素生物合成基因簇序列分析,推测nanG1-nanG4和nanM 负责dTDP-4-甲基-L-鼠李糖的合成;nanG5为糖基转移酶,负责糖基向南昌霉素母核上的转移。本研究通过对nanG5、nanM的...
- 何云龙白林泉邓子新
- 文献传递
- 梅岭霉素生物合成基因簇的克隆及其相关基因功能的研究
- 从江西农业大学校园油茶根际土壤中分离筛选的南昌链霉菌（Streptomyces nanchangensis n. sp. Yan et Ouyang）中可以产生两种具杀虫活性的抗生素——南昌霉素（nanchangmyci...
- 何云龙
- 关键词：梅岭霉素基因簇甲基转移酶糖基转移酶
- 文献传递
- 梅岭霉素生物合成基因簇的克隆及其相关基因的功能研究
- 何云龙
- 阿维链霉菌中转录因子AveR对阿维菌素生物合成的正调节被引量：4
- 2008年
- aveR是阿维链霉菌NRRL 8165阿维菌素生物合成基因簇中唯一可能的调节基因.为了验证aveR是否参与阿维菌素生物合成基因的转录调节,构建了用于敲除aveR的基因置换质粒pJTU2530,并通过接合转移引入了阿维链霉菌.通过筛选ThioSAprR转化子,经聚合酶链式反应(PCR)扩增验证,获得了aveR内部1 320 bp区域被阿泊拉霉素抗性基因aac(3)IV替换的突变株ZD10.高压液相色谱检测表明,与野生型菌株相比,突变株ZD10不再产生阿维菌素,并且ZD10中寡霉素的产量明显高于野生型菌株.进一步的反转录PCR(RT-PCR)分析表明,与野生型菌株相比,突变株ZD10的聚酮合酶基因aveA3不再转录.结果显示,AveR是阿维菌素生物合成的正调节因子,通过调节结构基因的转录表达来影响阿维菌素的产生.
- 朱冬青何云龙白林泉邓子新
- 关键词：阿维链霉菌阿维菌素寡霉素
