王莹
- 作品数：30 被引量：140H指数：7
- 供职机构：贵州科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金“十二五”国家科技计划农村领域国家转基因植物研究与产业化专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生文化科学更多>>
- 高等植物启动子克隆方法的研究进展被引量：15
- 2007年
- 启动子是植物基因工程中一个重要的研究对象,文章简述了启动子的定义、分类和启动子的研究策略,从组成型启动子、组织特异型启动子和诱导型启动子3个方面介绍了它们的功能和结构的研究现状。启动子的克隆对于构建基因工程载体,表达目的蛋白有着重要的意义。着重介绍了启动子克隆的方法,从常用的利用启动子探针型载体筛选启动子到PCR方法的应用,及此后相继出现的一些基于PCR法的克隆启动子技术,像I-PCR,P-PCR,SSP-PCR,YADE,TAIL-PCR等,为克隆启动子提供了更可靠,更合理的方法。
- 王莹韩烈保曾会明
- 关键词：启动子基因工程克隆PCR
- 结缕草胁迫诱导型启动子Rd29A的克隆及功能鉴定被引量：1
- 2011年
- 以结缕草基因组DNA为模板,根据已报道Rd29A启动子序列设计了一对特异引物,在优化的PCR反应条件下扩增出了Rd29A启动子的基因片段,通过序列分析与文献报道的基因序列有41.65%的同源性。在GenBank上的登录号为EU346948。利用GFP基因作为报告基因,构建了用于比较鉴定所克隆启动子活性的pB IG(35S-GFP)和pB IRG(Rd29A-GFP)两个植物表达载体,进而采用基因枪法对洋葱表皮细胞进行遗传转化,检测Rd29A启动子在受体细胞中调控基因表达的活性。结果表明,克隆到的Rd29A启动子活性强于组成型的35S启动子,利用GFP瞬时表达的分析方法有效的筛选到用于进行草坪草抗逆育种的启动子。
- 王莹罗国坤韩烈保
- 关键词：GFP基因基因枪法启动子活性分析
- 矿区土壤重金属植物修复技术研究进展(英文)被引量：6
- 2012年
- 植物修复技术是清除土壤中重金属的一种有效、经济的生态技术。重金属污染土壤植物修复技术主要有植物固定、植物挥发和植物吸收等方式,总结了在金属矿区土壤重金属污染的植物固定和植物吸收修复技术研究方面的现状与进展,包括植物修复技术的特点、植物修复的研究现状、超富集植物的筛选方法,并提出了进一步研究的主要方向。
- 王莹向准贺红早任春光孙超
- 关键词：重金属污染土壤植物修复超富集植物
- 基于差异蛋白质组学解析紫色杆菌素抑制结肠癌细胞HT29的作用机制
- 2017年
- 【目的】对紫色杆菌素作用后的结肠癌细胞HT29进行差异蛋白质组学分析,探究其影响的代谢通路,揭示其抑制癌细胞生长的作用机制,为新型抗癌药物的开发提供一定的参考。【方法】以不同剂量的紫色杆菌素处理HT29 24、48、72 h,通过MTT试验以及透射电镜分析其对结肠癌细胞的有效抑制剂量及抑制情况。在此基础上,对提取的3个处理组的蛋白进行同位素标记,利用反相液相色谱(RP-LC)联用串联质谱(AB SCIEX Triple TOF5600)获得样品中的多肽及其相对丰度信息,通过数据库(NCBI.Human.protein database)搜索比对,鉴定差异表达蛋白。利用GO分析、KEGG信号通路分析,解析紫色杆菌素抑癌作用代谢途径。【结果】紫色杆菌素对HT29的抑制作用呈一定的时间、剂量依赖性。当紫色杆菌素对HT29的抑制率达50%时,仅为阳性药物5-Fu剂量的1/6,具有更明显的抑制效果。电镜下观察显示,随着紫色杆菌素剂量增大,细胞内部线粒体出现空泡结构,质膜出泡;当浓度达30 mg·L^(-1)时,细胞膜消失,染色质边集。通过差异蛋白质组学分析,共鉴定出4 258个蛋白,表达差异在2倍以上的蛋白共为757个。其中高剂量组处理差异蛋白数为492个,低剂量组处理的差异蛋白数为112个,阳性对照组差异蛋白数为336个。KEGG分析显示这些差异蛋白共参与50条信号通路。其中有10条信号通路具有显著性(P<0.05),主要参与核糖体循环途径、三羧酸循环途径和RNA降解途径等。【结论】紫色杆菌素主要通过影响HT29细胞生命活动中的蛋白转录和翻译水平进而发挥抑制作用。
- 刘鹭芦晶王莹逄晓阳许嫚张书文吕加平
- 关键词：差异蛋白质组学HT29透射电镜
- 5个芍药属组间杂交新品种被引量：4
- 2016年
- 5个新品种均从芍药与牡丹远缘杂交后代中选出,花色奇特,花期长,生长旺盛,具有典型的组间杂种特征。其中‘京华旭日’花单瓣型或荷花型,鲜亮红色,有不规则黄色或紫色放射状条斑;‘京俊美’花单瓣型,乳黄色,基部有显著棕红色斑;‘京华朝霞’花单瓣型,淡红色,有淡紫色或黄色条纹;‘京桂美’花荷花型,红色;‘京蕊黄’花荷花型,淡黄色,基部有淡红斑,部分雄蕊变态发育为不育心皮。植株繁殖采用嫁接或分株法进行。
- 钟原成仿云何桂梅高静王荣杜秀娟王越岚刘玉英曹羲君王莹
- 关键词：芍药
- 毛果杨中链酰基辅酶A合成酶的克隆及酶学分析被引量：3
- 2016年
- 中链酰基辅酶A合成酶(MACS)属于腺苷酸合成酶超基因家族,催化中链脂肪酸与辅酶A结合形成相应的中链酰基辅酶A。本研究通过同源检索毛果杨基因组数据库中的4CL基因,克隆得到毛果杨Pt MACS1的基因序列(基因编号:est Ext_fgenesh4_pg.c_640066)。通过序列分析可知,Box I和Box II两个在4CL中保守的结构域在该蛋白中并不保守。将Pt MACS1与原核表达载体p ET-30a(+)构建融合表达载体Pt MACS1-p ET-30a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)后诱导重组蛋白进行表达。镍柱纯化重组蛋白后进行酶学活性分析,研究结果表明该蛋白对中链脂肪酸己酸、壬酸、癸酸显示出明显活性:Kcat分别为(130±2.65)、(193±3.46)、(201±5.51)μmol/(min·mg),以该蛋白的最适底物癸酸测得该蛋白的最适反应温度为37℃,最适反应p H为7.0。该结果表明,Pt MACS1属于毛果杨中链酰基辅酶A合成酶家族一员,为后续毛果杨腺苷酸合成酶超基因家族的鉴定及分类分析提供资料。
- 曹山蒋璐瑶李丽红要笑云张强撖静宜王莹李慧陆海
- 关键词：MACS克隆原核表达酶学分析
- 牡丹分子标记研究进展被引量：1
- 2012年
- 文中综述了RAPD、SSR、ISSR、AFLP和SRAP等分子标记的原理和特点,及其在种质资源分类鉴定、亲缘关系分析、杂种鉴定等方面应用的现状,探讨了分子标记技术在牡丹亲缘关系分析、品种分类鉴定、遗传图谱构建和分子标记辅助育种等方面的发展前景。
- 韩丽晓王莹
- 关键词：分子标记
- 结缕草胁迫诱导型启动子Rd29A的克隆及其功能鉴定
- Rd29A基因启动子是一个受干旱、高盐和低温等逆境诱导表达的特异性启动子,也是植物抗逆性基因工程中理想的逆境诱导型启动子。本研究的目的是从结缕草中分离出Rd29A基因启动子,并对其序列进行测序、比较和分析,鉴定该启动子的...
- 王莹
- 关键词：诱导型基因枪
- 文献传递
- 以‘凤丹白’为母本的杂交及其育种潜力分析被引量：25
- 2014年
- 对药用和油用牡丹品种‘凤丹白’自交亲和性进行验证的同时,对其育性以及育种潜力进行研究。分别于2008年、2009年、2011年以‘凤丹白’为母本与中原牡丹、日本牡丹以及紫斑牡丹进行了大量杂交,共设置57个杂交组合,授粉2023朵花,获得43508粒杂交种子。结果表明:1)‘凤丹白’自然授粉结实率高(19.13粒/朵),且明显高于自花授粉结实率(0.4粒/朵),属于异花授粉植物,且不存在无融合生殖现象;2)‘凤丹白’与中原牡丹、日本牡丹、紫斑牡丹杂交结实率(18.44、23.84、26.62粒/朵)均较高,表明‘凤丹白’的杂交亲和性较强;3)结实率受父本花型影响,皇冠型最低(10.42粒/朵)且与其他花型存在极显著差异,这与雄蕊高度瓣化而花粉减少且生活力下降有关;4)‘凤丹白’与‘贵妃插翠’‘黑龙锦’等39个品种杂交结实率(33.33、35.89粒/朵等)高于其自然授粉结实率,对提高油用牡丹种子产量有重要参考价值。总之,‘凤丹白’的育性强、亲和性高,是一种育种潜力巨大的优良牡丹种质资源,值得进一步挖掘与利用。
- 韩欣成仿云肖佳佳王越岚张栋王莹钟原
- 关键词：杂交育种
- 组织培养技术在药用植物中的应用研究进展被引量：8
- 2010年
- 综述了近年来组织培养技术在我国药用植物研究中的应用进展,包括药用植物种苗的快速繁殖,高产优质药用植物新品种的培育,药用植物离体种质保存,并提出了该领域存在的问题和发展方向。
- 王姝赵玉桥罗国坤王莹
- 关键词：药用植物组织培养技术繁殖
